① 厭氧培養的培養工藝
厭氧培養——微生物厭氧培養
1.可利用厭氧產氣袋法進行厭氧培養。
規格2.5L的產氣袋只能將2.5L容積內的氧氣完全吸收,轉化成二氧化碳,同理,3,5L的產氣袋能吸收3.5L容積的氧氣。微需要產氣袋和二氧化碳產氣袋亦是如此,為達到相應的氧氣濃度和二氧化碳濃度,不僅容積要固定,放置的培養物數量也基本要裝滿,在出廠前都根據計算設定好了的,所以,培養也需要在設定的條件下進行。
日本三菱的厭氧培養罐有兩種規格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容納12隻9cm標准培養皿),配套使用1隻2.5L規格的厭氧產氣袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容納42隻9cm標准培養皿),配套使用3隻2.5L規格的厭氧產氣袋或者2隻3.5L的厭氧產氣袋。兩種都是長方體,原廠的產氣袋培養後不會產生負壓,直接可以打開,所以不需要泄壓孔。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後,盡量擠出袋內空氣,然後密封袋口。先折斷氣體發生管,後折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然後手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
② 厭氧產氣袋的介紹
厭氧產氣袋AnaeroPack——是由日本三菱瓦斯化學株式會社發明並擁有專利的一類產品,其基本原理是將密閉空間中的氧氣完全或者部分吸收掉,然後產生二氧化碳。
③ 厭氧產氣袋的產品特點
厭氧產氣袋和其他厭氧培養方法相比,優勢體現在以下方面:
1,操作簡便,不用加水、不用催化劑,只需把葯劑(產氣袋)外包裝剪開放入容器內,密封後即可形成適宜的厭氧、微需氧、二氧化碳培養環境。
2,適用范圍廣,培養容器內不會產生壓差,不會產生高溫。同容積的培養容器可通用,廢棄物處理方便,不 會污染環境。
3,高效經濟,無須使用昂貴且占空間的大型設備,無須使用危險氣體,性能價格比更經濟實惠。
4,針對性強,厭氧、微需氧、二氧化碳培養三種類型,根據培養量選擇350ml、2.5L和3.5L三個系列,自由搭配,產氣量穩定準確有保障。
因為其獨特的應用優勢,英國OXOID公司以及法國生物梅里埃公司亦將其配套到產品線中,名稱雖有不同,但其包裝均註明製造者:MITSUBISHI GAS CHEMICAL COMPANY,INC. 北京九和永泰代理的是從日本直接進口的產品,優勢主要體現在經濟實惠供貨及時,生產日期較短品質更有保證。 1,技術上:行業的技術性很強,還沒有得到廣泛應用。
2,資金上:資金要求較高
④ 厭氧培養中氧指示劑
這是利用的是水解酸化的原理,有機物水解酸化使PH值變小,石蕊與亞甲蘭都是酸鹼指示劑。
⑤ 如何消除紡織面料里已經含有的壬基酚聚氧乙烯醚,謝謝NPEO是:壬基苯酚聚氧乙烯醚
摘要 當排除厭氧污泥,控制污泥泥齡,是控制系統最終出水中NP及短鏈NPEO濃度的可行方法.
⑥ 厭氧產氣袋的應用范圍
涉及的行業有:啤酒、飲料、食品、包裝材料,石化及環保產業
1.實驗室和現場分析儀器及配件、微生物檢測消耗品供應
2.儀器現場安裝調試及培訓服務
3.儀器的維護、校準及維修等售後技術服務,技術咨詢
4.提供客戶其它特定需求的服務公司技術實力
⑦ 厭氧菌都有哪些呢
根據對O₂的耐受程度,可將厭氧菌分為三大類:
(1)對氧極端敏感的厭氧菌:代表菌種為月形單胞菌,這類細菌對厭氧條件要求很高,在空氣中暴露10min即死亡,臨床上很難分離出。
(2)中度厭氧菌:代表菌種為脆弱擬桿菌、產氣莢膜梭菌等臨床分離常見的厭氧菌。它們在空氣中暴露60~90min或在膿汁抽出72h後仍然能分離出來。
(3)耐氧厭氧菌:代表菌種為溶組織梭菌。這類細菌不能利用氧,在無氧條件下生長好,而在有氧條件下生長不佳。
厭氧培養:
可利用厭氧產氣袋法進行厭氧培養。規格2.5L的產氣袋只能將2.5L容積內的氧氣完全吸收,轉化成二氧化碳,同理,3,5L的產氣袋能吸收3.5L容積的氧氣。
微需要產氣袋和二氧化碳產氣袋亦是如此,為達到相應的氧氣濃度和二氧化碳濃度,不僅容積要固定,放置的培養物數量也基本要裝滿,在出廠前都根據計算設定好了的,所以,培養也需要在設定的條件下進行。
日本三菱的厭氧培養罐有兩種規格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容納12隻9cm標准培養皿),配套使用1隻2.5L規格的厭氧產氣袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容納42隻9cm標准培養皿),配套使用3隻2.5L規格的厭氧產氣袋或者2隻3.5L的厭氧產氣袋。
兩種都是長方體,原廠的產氣袋培養後不會產生負壓,直接可以打開,所以不需要泄壓孔。初期摸索實驗條件,還可以選擇350ml厭氧產氣袋(配套用350ml密封袋可容納2隻9cm標准培養皿)。
以上內容參考:網路-厭氧菌;網路-厭氧
⑧ 如何培養厭氧菌
有幾種密封方法:
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌,必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多,可根據實際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的乾燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後,盡量擠出袋內空氣,然後密封袋口。先折斷氣體發生管,後折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然後手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產生二氧化碳,供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養,簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環境。
至於厭氧培養基怎麼配我就不太清楚了,不過就是按一般要的各種營養,滅菌即可,個人看法
⑨ 厭氧指示劑和厭氧產氣袋要一起使用嗎
厭氧指示劑是表明厭氧環境是否維持或者維持的好不好的直觀指示,所以要一起使用效果才好,才能及時更換。
⑩ 厭氧產氣袋多久換一個
如果打開樣品培養的密封環境,就需要更換新的厭氧產氣包重新進行實驗。
1、厭氧包的主要原理是利用氫硼化鈉或氫硼化鉀與水反應產生氫,氫與密封袋中的氧氣在鈀催化下結合成水,從而建立起無氧小環境。
2、厭氧袋中二氧化碳由檸檬酸生成,利用美藍的變色反應作為厭氧度的指示劑。厭氧環境無氧指示劑呈無色,有氧則變為藍色。