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亞細胞定位常用方法

發布時間:2022-11-16 17:30:50

如何分析蛋白質的亞細胞定位

如何分析蛋白質的亞細胞定位
預測蛋白質的亞細胞定位,是通過生物信息學的方法的。
或者你在NCBI資料庫中比對到了編碼類似蛋白的基因,如果該基因有人做過亞細胞定位的實驗,你也可以大概知道其編碼的蛋白質在細胞內部的定位。不同物種,不同基因家族成員有可能有區別。最終還是需要實驗來驗證的。
功能基因研究中,經常會進行基因編碼的蛋白質的亞細胞定位的,
如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合後,觀察融合蛋白在細胞內的定位,
或者將預測部位(如該蛋白可能在液泡膜上)的蛋白提取出來,進行western實驗,來驗證等。

Ⅱ 亞細胞定位

亞細胞定位是指某種蛋白或表達產物在細胞內的具體存在部位。如僅在核內存在,還是胞質內存在,還是細胞膜上存在。
GFP實際是給你要研究的物質加上標記。使用GFP必須構建融合蛋白載體,並有效表達。這樣在熒光顯微鏡下,如果看到細胞內某一部位存在GFP信號,則說明和GFP融合的蛋白也存在於該部位,這樣就達到了確定某物質亞細胞定位的目的。

Ⅲ 如何利用綠色熒光蛋白對特定的蛋白質進行亞細胞定位

首先構建綠色熒光蛋白與目的蛋白基因的融合基因表達載體 然後轉染到細胞中,再利用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察目的蛋白在細胞中的位置和隨時間變化情況

Ⅳ 研究植物組織定位和亞細胞定位有哪些方法它們兩者的區別是什麼

亞細胞定位的你可以構建亞細胞定位的載體,然後可以做瞬時轉化或者穩定轉化,然後再電鏡下觀察就行了

Ⅳ 亞細胞定位用gfp號還是yfp好

YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白
GFP就是綠色熒光蛋白,YFP就是Thr203以Tyr取代,發出黃色的熒光,成為黃色熒光蛋白
因此兩者最大的區別則是發射波長了

亞細胞定位用YFP或者GFP都是可以的
需要考慮:
如果是標記在N端很可能影響定位
如果是紅色的探針,選用綠色GFP比較經典,兩者疊合的橙色也是很多文獻上常採用的。但如果是藍色的探針,則選用黃色YFP比較容易區分一點

Ⅵ 如何預測一個基因的亞細胞定位

如何預測一個基因的亞細胞定位
預測蛋白質的亞細胞定位,是通過生物信息學的方法的。
或者你在NCBI資料庫中比對到了編碼類似蛋白的基因,如果該基因有人做過亞細胞定位的實驗,你也可以大概知道其編碼的蛋白質在細胞內部的定位。不同物種,不同基因家族成員有可能有區別。最終還是需要實驗來驗證的。
功能基因研究中,經常會進行基因編碼的蛋白質的亞細胞定位的,
如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合後,觀察融合蛋白在細胞內的定位,
或者將預測部位(如該蛋白可能在液泡膜上)的蛋白提取出來,進行western實驗,來驗證等。
希望對你有幫助吧

怎麼亞細胞定位分析

用報告基因技術呀 比如說最常用的綠色熒光蛋白GFP或者改造過的EGFP等。和目的基因構建成為融合蛋白,轉入細胞中以後,用激光掃描共聚焦顯微鏡就可以觀察到基因的亞細胞定位

Ⅷ DFP亞細胞定位主要用作什麼方面可以打個比方么

難道又推出新的熒光蛋白了?目前主要用作亞細胞定位的是GFP綠色螢光蛋白,就是因為這個今年3個哥們得了諾貝爾化學獎。
亞細胞定位就是看目的基因的表達產物被定為在細胞的哪個位置,比如細胞核或細胞質。
操作上一種方法是在你要表達的基因上加上高效啟動子和一段GFP序列,用基因槍將你整合的序列打入一些植物組織,比如洋蔥表皮,培養一小段時間。榮熒光顯微鏡觀察,相應的亞細胞結構會呈現綠色。以此來判斷你要研究的基因產物在細胞中位置。

Ⅸ 用本生煙草,通過濃桿菌注射葉片的方法,來做亞細胞定位

同樣糾結這個問題,拍出來不好看啊

Ⅹ 真核細胞亞細胞定位實驗的原理及步驟

原核細胞(Prokaryotic cells),也就是細菌等生物體的簡單細胞,有時被比喻為單間小屋:它們沒有內部膜,所以它們就像一個單間,沒有牆壁可以分割。如果我們把這個類比擴展到真核細胞,也就是構成植物、真菌和動物的更復雜的細胞,我們會發現,它們在房地產市場上是絕對升值的。

就像一個大的家庭住宅被分割成許多不同用途的房間(卧室、浴室、廚房、起居室等),真核細胞也包含了各種不同的具有專門功能的隔間,彼此之間用膜層整齊地分開。這種組織方式讓每個隔室都能保持自己的條件,也就是它開展工作所需要的條件。

例如,被稱為溶酶體(lysosomes)的隔室,作為細胞的回收中心,必須保持一個酸性的pH值,以處理細胞廢物。同樣,被稱為過氧化物酶體(peroxisomes)的結構也會進行被稱為氧化反應的化學反應,並產生過氧化氫,如果不把它們安全地存放在自己的 "房間 "里,這兩種物質都會損害細胞。

在一個細胞內保持不同環境的能力,使得真核細胞可以進行復雜的代謝反應,而原核生物則不能。事實上,這也是為什麼真核細胞可以長到比原核細胞大很多倍的重要原因。

原核細胞對比真核細胞

真核細胞的主要特徵是什麼?與原核細胞不同,真核細胞具有:

一個膜結合的細胞核(nucleu),一個被膜包圍的中央空腔,裡面有細胞的遺傳物質。
一些膜結合的細胞器(organelles),是漂浮在細胞液中的具有特殊功能的細胞室。細胞器的意思是 "小器官",這個名字反映了細胞器就像我們身體的器官一樣,作為一個更大系統的一部分,具有獨特的功能。
多條線型染色體(linear chromosomes),而不是原核生物的單條圓形染色體(single circular chromosome)。
真核細胞比原核生物的細胞要復雜得多。它們充滿了一系列迷人的亞細胞結構,在能量平衡、新陳代謝和基因表達方面發揮著重要作用。

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