簡述常用的保藏方法

⑴ 菌種保藏的目的，菌種保藏的方法有哪些

1、目的：盡可能的保持菌種的原有性狀以及活力的穩定，保證菌種不死亡、不發生變異、不被外物污染，保持菌株的優良性狀不發生退化以及優良菌株的存活。2、原理：通過降低微生物體內的代謝，抑制生長繁殖，從而延長菌種的生命，減少變異，常用的方法為低溫保藏、缺氧保藏、乾燥保藏。

一、菌種保藏的目的

1、目的

在使用和傳代的過程中，菌種容易出現污染，發生變異，死亡等情況，從而導致菌種衰退，優良菌種丟失。而菌種保藏的目的就是為了盡可能的保持菌種的原有性狀以及活力的穩定，保證菌種不死亡、不發生變異、不會被外物污染，保持菌株的優良性狀不發生退化以及優良菌株的存活。

2、原理

菌種保藏的原理是通過降低微生物體內的代謝，抑制生長繁殖，從而延長菌種的生命，減少變異。常用的方法主要為低溫保藏，缺氧保藏，乾燥保藏。除此之外，避光，添加保護劑，缺乏營養等也可以提高保藏的效果。

二、菌種保藏的方法有哪些

1、斜面低溫保藏法

將菌種接種到適合的固體斜面培養基上，等到菌種充分生長過後，使用油紙將棉塞部分包紮好，然後轉移至2-8℃的冰箱中進行保存。

2、液體石蠟保藏法

（1）使用三角燒瓶將液體石蠟裝好，塞上棉塞，並用牛皮紙進行包紮，0.1MPa，121.3℃滅菌30分鍾左右，然後轉移至40℃的溫箱中，將水汽蒸發掉。

（2）將菌種在斜面培養基中培養，得到健壯的菌體，然後使用滅菌吸管將石蠟注入斜面上，用量為高出斜面頂端1cm為宜。

（3）將試管直立，放置在低溫或者室溫的環境下進行保存。

3、濾紙保藏法

（1）准備好濾紙條（0.5×1.2cm），裝入安瓿管中（0.6×8cm），每個管中放入1-2張，然後塞上棉塞，在0.1MPa，121.3℃的環境下滅菌30分鍾。

（2）將菌種在斜面培養基中培養，得到健壯的菌體，然後取出1-2ml的滅菌脫脂牛乳，滴加在滅菌培養皿內，接著取數環菌苔在牛乳內混合均勻，製成濃懸液。

（3）使用鑷子將濾紙條夾出，浸入菌懸液內，吸飽後，放回安瓿管中，塞上棉塞。

（4）將安瓿管放入裝有五氧化二磷的乾燥器，並用真空泵抽氣至干，然後將棉花塞入管內，用火焰熔封，放置在低溫下保存。

（5）當需要使用菌種的時候，將安瓿管口在火焰上燒熱，在燒熱的部位滴上一滴冷水，使玻璃破裂，再用鑷子將瓶口端的玻璃敲掉，等到打開安瓿管後，將濾紙取出，放入液體培養基內，置溫箱中培養。

4、沙土保藏法

（1）取出河沙，加入10%稀鹽酸，加熱煮沸30分鍾（除去有機質）。

（2）將酸水倒掉，並用自來水將河沙洗至中性，然後進行烘乾，過篩（40目篩子），將粗顆粒去掉。

（3）取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土，浸泡洗滌數次，直至為中性。

（4）烘乾，碾碎，過篩（100目篩子），去除粗顆粒。

（5）將沙和土按照2：1的比例混合，裝入試管中，塞好棉塞，滅菌30分鍾左右。

（6）將菌種在斜面培養基中培養，得到健壯的菌體，然後向斜面培養物中注入3-5ml無菌水，洗下細胞或孢子製成菌懸液。

（7）用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中，每管0.2-0.5ml，然後真空抽去管中的水分。如果是放線菌和黴菌可以直接挑取孢子拌入沙土管之中。

（8）將沙土管用火焰熔封，然後放置在低溫（4-6℃）乾燥處保藏，或者是將沙土管直接用牛皮紙或塑料紙包好，置乾燥器內保存。保存過程中，需要每隔半年檢查一次菌種的存活性和純度。

5、甘油管保存法

（1）將80%的甘油進行高壓蒸汽滅菌。

（2）將菌種放置在斜面培養基上培養，然後使用無菌水製成高濃度的菌懸液。

（3）使用1ml的甘油與菌液混合均勻，讓甘油的濃度為10-30%左右，然後將其放置在零下70℃的環境下進行凍存。

（4）也可以使用甘油-生理鹽水（體積比8：2），和菌體肉湯混合均勻，然後放置在零下20℃的環境下進行保存。

6、冷凍乾燥保藏法

（1）在低溫下將細胞快速凍結，然後在真空條件下進行乾燥，同時為了保證細胞在冷凍和水分升華的過程中不受損害，應當使用保護劑來制備細胞細胞懸液（菌在凍結和脫水過程中起到保護作用的溶質），通過氫鍵和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。

（2）乾燥後的菌種在真空下封裝，和空氣隔絕，從而實現長期保藏。

（3）該方法兼具低溫、乾燥、除氧三方面菌種保藏的主要因素，除開絲狀真菌的菌絲體外，其它各類微生物大多都適用。

⑵ 食品保藏的基本原理和方法

1、制生
停止食品中一切生命活動和生化反應，殺滅微生物、生物，破壞酶的活性（無生機原理）。
2、抑生
抑制微生物和食品的生命活動及生化反應，延緩食品的腐敗變質（假死原理）。
3、促生
促進生物體的生命活動，藉助有益菌的發酵作用防止食品腐敗變質（不完全生機原理）醫學`教育網搜集整理。常用的方法有低溫保藏、高溫保藏、脫水保藏、提高食品的滲透壓、提高食品的氫離子濃度、輻照保藏、隔絕空氣、加入防腐劑和抗氧化劑。

⑶ 保藏菌種的方法有哪些

1、傳代培養保藏法：包括又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等，培養後於4-6℃冰箱內保存。

2、液體石蠟覆蓋保藏法：液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養的變相方法，能夠適當延長保藏時間。

3、載體保藏法：載體保藏法是將微生物吸附在適當的載體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而後進行乾燥的保藏法。

4、寄主保藏法：寄主保藏法用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物。

5、冷凍乾燥保藏法：先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然後在減壓下利用升華現象除去水分（真空乾燥），其中真空冷凍乾燥法最常見。

(3)簡述常用的保藏方法擴展閱讀

菌種保藏的原理：

菌種保藏有多種方法，其原理大多大同小異，主要是運用一些方式盡量降低生物體內的代謝，達到延長生命，減少變異的目的。通常採用的方法為低溫、缺氧、乾燥。

低溫主要對菌種產生兩方面的影響，首先，較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活，降低新陳代謝，達到保藏菌種的目的。其次，低溫同時會導致菌體誘發菌絲自溶機制，如果降溫過程失誤，同樣會造成機體的機械損傷和溶質損傷。

⑷ 食品保存的七大方法 食品保藏的主要方法介紹

1、干制：干制主要是控制食品在的水分，降低水分活度，從而達到保藏目的。

2、冷凍：降低溫度，抑制食品本身的生化活動和微生物的生長，從而達到保藏目的。

3、熱處理：通過加熱，使食品品質變性達到人們需要的要求，並且殺滅微生物，從而達到保藏目的。

4、氣調儲藏：主要用於水果蔬菜等植物類食品的保藏，通過調節密封室內的氣體成分，從而抑制植物類食品的後熟過程，延長保存期。

5、腌漬：用鹽，糖或者是酒腌漬食品，改變食品的滲透壓，並有其他化學物質抑制微生物生長，從而達到保藏目的。

6、真空包裝和密封：抽掉空氣，使食品處於真空狀態，抑制微生物的生長，從而達到保藏目的。

7、提高氫離子濃度：大多數細菌不能在pH4.5以下正常生長繁殖，所以可以利用提高氫離子濃度的方法進行防腐。醋漬就是向食物中加入食醋，例如常見的醋漬和酸發酵等，這類方法常用於蔬果中，如酸黃瓜、酸菜等。

⑸ 微生物菌種保藏的方法有哪些

菌種的優劣是食用菌生產成敗的關鍵。菌種是國家重要的生物資源，也是微生物工廠首要的生產資料。由於微生物繁殖快、易變異，因此微生物菌種特別需要妥善保藏。世界各國對微生物菌種都很重視。中國科學院微生物研究所專門設立了菌種的保藏機構，為各生產單位收藏和供應各種優良菌種。當然就具體的生產單位而言，大量的生產用菌種還得靠自己來生產和保藏。
菌種保藏的目的：是使優良菌種經過較長時間後，仍能保持菌種的優良性狀、生活能力及純度，降低菌種的衰亡速度，確保菌種的純一，防止雜菌污染及絕種。
保藏菌種的方法：人們在長期的生產實踐中，積累了不少保藏菌種的經驗，常用的保藏方法有：斜面低溫保藏法、液體石蠟保藏法、砂土管保藏法、濾紙片保藏法、穀粒保藏法等。常用保藏菌種的方法有以下幾種：
（1）斜面低溫保藏法這是最簡單最普通的保藏方法。首先將菌種在適宜的斜面培養基（一般PDA）上培養成熟後，選擇菌絲生長粗壯，邊緣保存。一般保存溫度4～6℃，除草菇和銀耳菌種外（10～15℃），此方法對其他食用菌都適宜，一般菌種可保藏2～4個月，所以需定時移接。此法保藏雖然方便，但是保藏時間短，需經常轉管，也很容易發生衰退變異現象。因此，不能用作長期保藏，最好與其他方法結合起來保藏。
另外，為了減少保藏期間培養基水分蒸發，瓊脂最好加到2.5%。為防止菌種在保藏過程中產酸分的積累，應加入0.2%的磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀等緩沖鹽類，同時，培養成熟後，最好將棉塞管口外剪平，並用礦蠟封或換以無菌木塞，這樣做也可以減少培養基水分的散失，延長保存時間。
在農村如果沒有冰箱，可採用土法保藏。即把保藏用的斜面菌種換上無菌橡皮塞，並用礦燭蠟封後密閉的廣口瓶中，懸入井底保藏。（2）貯藏室保藏法原種和栽培種一般只在貯藏室短期保藏，貯藏室溫度0～10℃為好。室內應清潔、乾燥、無光，應經常檢查溫度和濕度，以降低其生活力，減少變異退化，防止雜菌污染，避免過早出菇。溫度越高，保存的時間越短。

⑹ 菌種保藏的常用方法及特點

（1）斜面低溫保藏。是一種最常用、最簡便的菌種保藏方法。首先將需要保藏的菌種接到斜面培養基上，在適宜的溫度條下培養，當菌絲健壯地長滿斜面時，即將此試管菌種取出，放置於4 ℃的冰箱中保藏。特點：
①簡單易行，適用於各類菇類菌種保藏，是目前生產及科研普遍採用的一種方法；②保藏時間短，需6個月轉接一次，轉管次數多菌絲變異的可能性大；③如改用橡皮塞並用石蠟扣，可保藏1年～3年。
（2）液體石蠟保藏。液體石蠟保藏也稱為礦油保藏，即用礦油覆蓋試管斜面試管保藏的方法。礦油是指無色、透明、黏稠、性質穩定、不易被微生物分解的石蠟油和液體石蠟，將其覆蓋在斜面菌種之上，可以隔絕空氣，防治培養基水分蒸發，抑制微生物的代謝活動，推遲細胞老化，從而達到長期保藏菌種的目的。特點：
①方法簡便易行，保藏條件不嚴格，保藏時間長，可作為長期保藏菌種的方法；②菌種必須垂直放，放置不方便。
（3）濾紙保藏。濾紙保藏是一種以無菌濾紙作為食用菌孢子吸附載體長期保藏菌種的方法，又稱濾紙孢子保藏法。特點：技術要求高，設備費用大，菌種不易衰老退化，菌種保藏時間長很少變異。
（4）自然基質保藏。自然基質保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含營養的自然生長的基質作培養基來保藏菌種的方法。自然基質很多，食用菌常用的自然基質有發酵的糞草、木屑及枝條基質等，取材方便，製作方法簡便，保藏時間也較長。使用時，只需取一塊、一粒或一條培養物放在新鮮的培養基上，並在適溫下培養即可。特點：方法簡便易行，保藏時間長。

⑺ 常見的食品保藏方法有哪幾種

1、冷藏法：食物在20-25°C的時候是黴菌最適宜生長的溫度，35°C左右是細菌最適宜生長的溫度，所以降低溫度就能抑制細菌生長，食物的保存時間就會拉長。一般蔬果不宜冷凍，只能冷藏，且最好兩天以內吃完，肉食等如果超過兩天不吃則應該冷凍保存。

2、風干法：食物中的水分是微生物的生長所必須的，如果能將食物脫水，就能達到抑制微生物生長的目的，通常吃的風干魚、風干肉、乾菜等保質期都比新鮮的久。

3、腌製法：食鹽有殺菌的作用，其高滲透作用能使細菌脫水，所以用食鹽腌制的食物可以長時間的保存。比如鹹肉、咸魚、鹹菜等。

(7)簡述常用的保藏方法擴展閱讀：

注意事項：

1、要注意儲藏溫度。不同食物對儲藏溫度的要求是不同的，應根據不同的食物特點決定儲藏的溫度和方法。

2、如魚類和生肉存放時要事先包裝成一次能吃完的數量，放入冷凍室(溫度一般應在-25~18℃),而燒熟的肉類食品則應冷藏保存，鮮蛋應儲存在1~5℃的環境中。

3、蔬菜和水果的適宜溫度是5~10℃，此溫度能抑制微生物的生長繁殖，且能防止蔬菜、水果間隙結冰，避免在冰融化時因水分溢出而造成蔬菜水果的腐敗。

⑻ 菌種保藏的方法 菌種保藏的方法有哪些

1、沙土保藏法。取河沙加入10%稀鹽酸，加熱煮沸30分鍾，以去除其中的有機質。倒去酸水，用自來水沖洗至中性。烘乾，用40目篩子過篩，以去掉粗顆粒，備用。另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土，加自來水浸泡洗滌數次，直至中性。烘乾，碾碎，通過100目篩子過篩，以去除粗顆粒。

2、濾紙保藏法。將濾紙剪成0.5×1.2cm的小條，裝入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2張，塞以棉塞，1.05 kg/cm，121℃滅菌30分鍾。將需要保存的菌種，在適宜的斜面培養基上培養，使充分生長。取滅菌脫脂牛乳1-2ml滴加在滅菌培養皿或試管內，取數環菌苔在牛乳內混勻，製成濃懸液。用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內，使其吸飽，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。將安瓿管放入內有五氧化二磷作吸水劑的乾燥器中，用真空泵抽氣至干。將棉花塞入管內，用火焰按圖Ⅶ-13熔封，保存於低溫下。需要使用菌種，復活培養時，可將安瓿管口在火焰上燒熱，滴一滴冷水在燒熱的部位，使玻璃破裂，再用鑷子敲掉口端的玻璃，待安瓿管開啟後，取出濾紙，放入液體培養基內，置溫箱中培養。細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏，前兩者可保藏2年左右，有些絲狀真菌甚至可保藏14-17年之久。此法較液氮、冷凍乾燥法簡便，不需要特殊設備。

3、寄主保藏法。寄主保藏法用於尚不能在人工培養基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代，此法相當於一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍乾燥保藏法進行保藏。冷凍保藏法可分低溫冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、乾冰酒精快速凍結（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法，其中最常見的是甘油管冷凍保藏法。

4、甘油管保存法。甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達到保藏目的。其方法是將80%的甘油高壓蒸汽滅菌待用。將培養好的斜面菌種用無菌水製成高濃度的菌懸液。取1ml滅菌甘油放入與菌液充分混勻，使甘油濃度約為10%-30%，於-70℃下凍存。-20℃保存時間較短。或採用體積比為8：2的甘油-生理鹽水，加入新鮮培養的菌體肉湯，混合均勻後至-20℃冰箱保存。該方法適用於一般細菌的保存，同時也適用於鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種，適用范圍廣，操作簡便，效果好，無變異現象發生。甘油-生理鹽水保存液保存菌種優於甘油原液，其原因可能是加入生理鹽水適當降低了甘油的高滲作用，且有肉湯培養物適量增加保存液的營養成分，從而更好地保護了待保存的菌株。

5、冷凍乾燥保藏法。先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然後在減壓下利用升華現象除去水分（真空乾燥），其中真空冷凍乾燥法最常見。真空冷凍乾燥保藏法是兼具低溫、乾燥、除氧三方面菌種保藏的主要因素，除不宜於絲狀真菌的菌絲體外，對病毒、細菌、放線菌、酵母及絲狀菌孢子等各類微生物都適用，不宜用凍干法保存的微生物不到2%。真空冷凍乾燥法是在低溫下快速將細胞凍結，然後在真空條件下乾燥，使微生物的生長和酶活動停止。為了防止在冷凍和水分升華過程中對細胞的損害，要採用保護劑來制備細胞懸液，使菌在凍結和脫水過程中起到保護作用的溶質，通過氫鍵和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。即是使樣品中的水分在冰凍狀態下，抽真空減壓，使凍結的冰直接升華為水蒸氣，使樣品達到乾燥。乾燥後的微生物在真空下封裝，與空氣隔絕，達到長期保藏的目的。