❶ 10ml液體1ml移液10次
使用手動單道移液器。
手動單道移液器1-10mL是一種通用型移液器,移液器,也稱移液槍,微量加樣槍,微量移液器,微量移液槍,是一種小容量液體(ul)級的樣品分配工具,有易拆卸和維護等特點。
手動單道移液器1-10mL的使用方法:1、選擇合適的移液器:移取標准溶液時多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發性、高黏稠度以及密度大於2.0g每cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(PCR)測定中的加樣時使用正向置換移液器。如移取15ul的液體,選擇Zui大量程為20ul的移液器,選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠准確。2、設定移液體積:調節移液器的移液體積控制旋鈕進行移液量的設定。調節移液量時,應視體積大小而旋轉刻度至超過設定體積的刻度,再回調至設定體積,以保證移取的jing確度。3、裝配吸頭:使用單通道移液器時,將可調式移液器的嘴錐對准吸頭管口,輕輕用力垂直下壓使之裝緊。使用多通道移液器時,將移液器的第1排對准第1個管嘴,傾斜插入,前後稍微搖動擰緊。4、移液:保證移液器、吸頭和待移取液體處於同一溫度;然後用待移取吸液體潤洗吸頭1-2次,尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時,將吸頭垂直浸入液面以下2-3mm深度,緩慢均勻地松開操作桿,待吸頭吸入溶液後靜置2-3秒,並斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多餘的液體。5、移液器的放置:使用移液器完畢後,用大拇指按住吸頭推桿向下壓,安全退出吸頭後將其容量調到標識的Zui大值,然後將移液器懸掛在的移液器架上;長期不用時應置於盒內。
❷ 做ELISA實驗需要注意一些什麼
Elisa實驗中應該注意的問題,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問題,希望對你有用處.
Elisa試劑盒有著准確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優點,深受廣大用戶朋友的喜愛.然而,在實驗過程中,也需要注意很多問題.對此,武漢福來生物工程提醒你,需要遵守一些規則,才能更好地進行實驗,取得較好的實驗成果.
Elisa方法被廣泛應用於各種抗原和抗體測定.在Elisa測定中影響因素較多,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果.引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:標本因素;試劑因素;操作因素.
1.樣品稀釋
一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性.酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性.
2.試劑盒平衡
Elisa中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鍾以上.平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鍾.
3.樣品和試劑的混勻
在稀釋前、後的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性.
4.加樣
加樣是一項很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的准確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附.
5.溫育
溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關鍵的一個因素.ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間.
6.洗板
固相免疫測定技術是一種非均相免疫測定技術,需以洗滌操作將特異結合於固相的抗原或抗體與反應溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證ELISA測定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外;加洗液後要靜置1分鍾,甩去板孔中洗液後,一定要大力拍干;及時更換吸水紙,尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗結果.
7.顯色
顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可.一般來說,顯色時間過短,結果偏低;顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加.
8.比色
比色要注意波長的選擇.以TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長為450nm,後者為492nm,濾光片需根據要求隨時更換.因此,容易出現濾光片錯用的問題.
❸ 連續加樣器使用方法
前進移液法(適用於常規液體移取)
1、將加樣槍刻度或讀數調至所需定量吸取的液體量值,並裝上合適的吸頭。
2、將按鈕壓至*停點位置(有明顯的阻滯感)並保持,以擠出吸頭內空氣,形成吸頭內負壓。
3、將吸頭浸入待移取的液體液面下2~3毫米深處,然後慢慢松開按鈕,液體在大氣壓強的作用下進入吸頭內。待吸入要求量的液體後,將加樣槍撤離液面,擦去吸頭外側的液體,注意不能接觸吸頭尖部。
❹ 加油槍怎麼使用加油槍怎麼卡住不用扶
對於自助加油而言,如果油箱比較大,需要長時間扶著加油槍,時間長了會很累,加油槍怎麼卡住不用扶?將加油槍插入油箱口後,4根手指扣下扳機,然後中指往外抬。此時會有個小卡扣被中指頂到扳機的對面卡上,然後松開剩下的三根手指即可,這樣就可以將扳機卡住不用扶了,油加滿以後會自動跳槍的。❺ Mehlich3(M3)法浸出液中磷的測定方法是什麼
答:Mehlich3(M3)法浸出液中磷的測定方法如下:
(1)試劑配製
①鉬銻抗試劑:稱取酒石酸鉀[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O,分析純]0.5克溶於100毫升去離子水中,配製成0.5%的溶液。另稱取鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O,分析純]10.0克溶於450毫升水中,慢慢地加入153毫升濃硫酸(分析純),邊加邊攪動。再將100毫升0.5%的酒石酸銻鉀溶液加入鉬酸銨溶液中,最後加水至1000毫升,充分搖勻,貯存於棕色瓶中,此為鉬銻貯備液。
在臨用前(當天),稱取抗壞血酸(即維生素C,分析純)7.5克,溶於500毫升鉬銻貯備液中,混勻此為鉬銻抗試劑,有效期24小時,如保存在冰箱中則有效期更長。上試劑中硫酸的濃度為5.5摩爾/升(1/2H2SO4),鉬酸銨為1%,酒石酸銻鉀為0.05%,抗壞血酸為1.5%。此溶液可供100樣次(方法一)或250樣次(方法二)使用。
②磷工作液[ρ(P)=5毫克/升]:稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4,分析純,105℃烘乾2小時)0.2195克,置於400毫升去離子水中,加入濃硫酸5毫升(防長黴菌,可使溶液長期保存),轉入1000毫升容量瓶中,用水定容。此溶液為50毫克/升磷標液。准確吸取此貯備液25毫升,稀釋至250毫升,即為5毫克/升磷標液(此溶液不宜久存)。
(2)測定步驟
以下兩種方法任選其一。
方法一:用移液管或加樣槍准確吸取2.00~10.00毫升土壤浸出液(依肥力水平而異)於50毫升容量瓶中,加水至約30毫升,加入5.00毫升鉬銻抗試劑顯色,定容搖勻[注5]。顯色30分鍾後,在880納米處比色。如冬季氣溫較低時,注意保持顯色時溫度在15℃以上,最好在恆溫室內顯色,以加快顯色速度。測定的同時做空白校正[注6]。
方法二:用加樣槍准確吸取1.00毫升土壤浸出液於50毫升塑料瓶中,用溶液分配器准確加水17.0毫升,再用加樣槍准確加入2.00毫升鉬銻抗試劑顯色,搖勻,顯色30分鍾後,在880納米處比色。冬季氣溫低時,保溫措施同方法一。測定的同時做空白試驗校正。該法速度快,浸出試液用量少,試劑用量也少,計算簡單。
工作曲線:准確吸取5毫克/升 P標准溶液0、0.5、1.00、2.00、4.00、6.00毫升,分別放入50毫升容量瓶中,加水至約30毫升,加入5.00毫升鉬銻抗試劑顯色,定容搖勻,即得0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6毫克/升P標准系列溶液。顯色30分鍾後,在880納米處比色。
(3)結果計算
方法一:土壤M3—P,ω(P)=ρ(P)×v×D/m
式中:ω(P)——土壤有效磷(M3—P)的質量分數(毫克/千克);
ρ(P)——待測液中P濃度(毫克/升);
v——顯色液體積(毫升);
D——分取倍數,浸出液體積/吸取濾液體積;
m——風干土樣質量(克)。
方法二:簡化計算公式為:
ω(P)=ρ(P)×200
❻ 生化使用加樣槍時需要將槍頭伸入液面底部嗎
加樣時盡量懸空加入,樣品量太少可以貼壁,如果槍頭伸入液面底部需要每次更換槍頭。
❼ 加樣槍污染怎麼消毒
加樣槍污染消毒方法:將鼻錐用1%消毒液浸泡至少1小時,用無菌蒸餾水小心漂洗,將消毒液完全清除干凈,乾燥。
旋松鼻錐,並清洗,如有需要則進行消毒或蒸汽滅菌,鼻錐部的小孔應被清潔並保持通暢。在將鼻錐旋迴位置上以前,將原位置清潔,並輕輕塗上一層硅樹脂(為加樣槍提供的)。
加樣槍可以完成連續接種20個試條。超過20個試條(更大不超過50個試條)時,在每完成一套鑒定-葯敏試條接種後,須將加樣槍放回立式充電座上。
維護保養時的注意事項
如不使用,要把移液槍的量程調至最大值的刻度,使彈簧處於鬆弛狀態以保護彈簧。最好定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60%的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾乾。
高溫消毒之前,要確保移液器能適應高溫。
校準是可以在20-25度環境中,通過重復幾次秤量蒸餾水的方法來進行。
使用時要檢查是否有漏液現象。方法時吸取液體後懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
1、槍頭是否匹配。
2、彈簧活塞是否正常。
3、如果是易揮發的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題。可以先吸放幾次液體,然後再移液。
以上內容參考:網路-活塞正移動加樣器
❽ 簡述微量加樣器的使用方法
微量加樣器的使用方法主要為:
一、將移液搶在空氣中緩慢按到一檔,並用大拇指保持適當力度按壓使之停止在一檔置換液量的設置。然後將移液槍保持垂直姿勢,慢慢垂直將槍頭尖端浸入液體,一般將槍頭浸入液體3-4毫米即可。二、緩慢松開拇指,讓按鈕緩慢恢復,這時液體會慢慢進入槍頭中置換液量的設置。松開大拇指不要過快,否則容易吸入氣泡。按鈕完全恢復之後,將移液槍移開液體,並將槍頭插入要加入的容器中(如離心管,試管、燒杯等)。三、將按鈕按到一檔,稍停片刻(1秒鍾左右),繼續將按鈕一按到底(二檔)置換液量的設置。這時液體就全部排出了。排液時按的速度可以適當快點,當然你要確保液體不飛濺出容器就完成了。
❾ 簡要敘述加樣器的使用方法及注意事項
加樣器就是「移液槍」,這種取液器在生化實驗中大量地使用,它們主要用於多次重復的快速定量移液,可以只用一隻手操作,十分方便。
使用方法:量取的時候,根據量的容積大小調節後面的螺母,將適當大小的槍頭,用右手操作半按下後面的按紐,將槍尖放在液體中,緩慢釋放手柄按紐(粘度大的防止進入氣泡),吸取液體;然後將按紐壓到底部釋放出液體。
注意事項:
移液槍用完之後要歸到最大計量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性。不用酶標槍時不要一直拿在手裡,不可以倒過來(特別是裡面還有液體的時候)