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鑒定抗體的效價常用哪一種方法

發布時間:2022-09-12 15:01:02

❶ 醫學免疫學名詞解釋:效價

效價是指生物製品活性(數量)高低的標志,通常採用生物學方法測定。
具體到免疫學中,最長說的效價是抗體的效價。抗體的效價是指抗體的物理狀態及其在體內的滯留時間,以其與抗原反應的多少來表示其免疫效果,稱為抗體效價。
抗體效價一般是用ELISA方法。靈敏度很高的。原理是:在反應板上包上抗原,然後加入檢測樣品液(血清,組織液等,需要處理一下),如果檢測樣品中有抗體,就可以與抗原結合,再加入酶標記的抗抗體,就可以和樣品中抗體結合,加入顯色劑,顯色後,檢測,通過吸光度的多少,確定抗體的含量。在其他地方,還有血凝抑制試驗,瓊脂擴散試驗,抗體蛋白純化定量,抗體活性檢測等。

❷ 測定抗體的效價時,瓊脂擴散試驗與ELISA哪一個更好

這兩種方法理論上都挺好的,不過在實際操作中,由於瓊脂糖擴散試驗的結果評定是由試驗人觀察所得,沒有ELISA的結果客觀。

❸ 抗體效價的檢測方法

多采免疫雙向擴散法
【基本原理】
*指抗原和抗體在同一凝膠內都擴散,彼此相遇後形成特異性的沉澱線。
-將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個相隔一定間距的小孔內,使兩者進行相互擴散,當抗原抗體濃度之比相適宜時,彼此相遇形成一白色弧狀沉澱線。
*優缺點:簡便,但敏感性較低,易出現假陰性結果。
免疫雙向擴散法的操作步驟
*將玻璃板用水洗凈後用75%乙醇沖洗,晾乾後放在水平台上備用。
*將1%agar 融化後,置56℃水浴。
*在玻璃板上鋪膠,約1.5mm 厚,凝固後打孔(直徑 3rnm),孔間距10mm。
l 抗血清(抗體預先作系列倍比稀釋即ml 抗原樣品,周圍孔內每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。
*凝膠板置濕盒內,室溫擴散24h。
*觀察結果。
凝聚胺法測定孕婦血清IgG抗-A(抗-B)效價的方法待檢血清與0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在試管內等量混合,放入37℃水浴1 h以破壞血清中的IgM抗體,吸取處理後的血清用生理鹽水倍比稀釋,稀釋度分別為2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024,然後每管加入相應的3%~5%紅細胞懸液,置37℃水浴30 min,觀察是否凝集,不凝集者用生理鹽水洗滌3次,然後加入低離子鹽水介質(LIM液),混勻,滴入2滴凝聚胺,混勻後3 000 r/min離心30 s,扣搖肉眼可見明顯的凝集(無凝集者須重做),再加入2滴重懸液,輕搖,觀察凝集是否消失,凝集1 min內不消失者表示受檢者血清中含有IgG型抗?A(抗?B)。
抗體效價檢測的其它方法
*環狀沉澱試驗,需較多的抗血清,現已很少用;
*對流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴散法敏感,較簡便、實用;
*酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)。
通常抗體效價低於1:128是沒有問題的,有些孕婦高達1:256以上,而且抗體效價最好1個月查上一次,有時候會有所變化。

❹ 抗體定量的方法

抗體應該測定的是效價吧?測定抗體效價一般採用的方法是免疫雙擴散法。

❺ 抗體效價測定的方法內容

1.取小試管10支,分別標明1-10號,各管加生理鹽水0.2ml,用刻度吸管吸取被檢者血清0.2ml加入到第1管充分混勻,再用同一吸管從第1試管中吸出0.2ml加入到第2管,充分混勻後再吸取0.2ml加入第3管,以此倍量稀釋。取第10管的0.2ml稀釋液棄去。使成 1:2、1:4……。
2.然後各管再加等量含相應抗原的5%紅細胞鹽水懸液,振搖試管架使之混勻,置 37℃水浴中放置1h,以3000r/min離心15s,觀察凝集結果並記錄;對凝集強度為「1+」以下及不凝集者,用生理鹽水洗滌3遍,末次吸幹上清液;各加生理鹽水2滴,取出每管加抗人球蛋白試劑2滴,以3000r/min離心15s,觀察凝集結果並記錄。出現凝集的最高稀釋度的倒數為效價。例如右圖表抗A血清效價測定結果為256。

❻ 有什麼好的方法可以快速判定疫苗的效價是否達標

其實從這個問題也能看得出大家的迫切心情。不葯博士和大家一樣,都想知道自己家的孩子到底有沒有碰到不合格疫苗?也盡量的寫文字糾正一些經過事件發酵,給大家造成的誤解的問題。

別的葯品不敢說,其實我國國產疫苗管控體系及質量已經達到國際標准了,並被世衛組織認可。部分國產疫苗甚至比國際標准更嚴格。為什麼大家不信任疫苗了,不是國產疫苗不好,而就是被這么一小部分人怍的,就像有部分人醫鬧不相信醫生一樣。我所知道的有些部門這么多年辛辛苦苦的默默付出,推動了疫苗質量的提升,但最終還是被這一顆老鼠屎打敗了。

【不葯博士】簡介

此博士哥哥葯學出身,卻也立志做一名優秀的營養師,人帥不帥不知道,但內容一定很帥!

❼ 制備免疫血清時,為檢測抗體效價,家兔最常用的采血方法是

正確答案:B
解析:制備免疫血清時,免疫家兔後,常採用耳緣靜脈采血來檢測家兔產生抗體的效價

❽ 求助ELISA測定抗體效價方法

我用的是間接ELISA,以下自我的畢業論文:
將抗原用包被液稀釋至約10 ?g/mL;分別將陽性血清和陰性血清用TBS倍比稀釋,稀釋梯度從1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP標記的羊抗兔IgG(1:5000稀釋) 。酶標儀測定450nm處各個孔的吸光度(A450),計算陽性血清與陰性血清的吸光度之比(P/N),當P/N<1.5時為陰性,當P/N≥1.5而<2.1為可疑,當P/N≥2.1為陽性,將P/N≥2.1時所對應的抗體最高稀釋倍數作為抗體的效價。

如何測定蛋白抗體的效價

在免疫期間,不僅各個不同的動物,而且同一動物在不同的時間內抗血清效價、特異性、親合力等都可能發生變化,因而必須經常地采血測試。只有在對抗血清的效價、特異性、親合力等方面作徹底的評價後,才可使用所取得的抗血清。
1.效價 抗血清的效價,就是指血清中所含抗體的濃度或含量。效價測定的方法常用的是放射免疫法,此法對所有的抗體均適用。某些由大分子(如蛋白類)抗原所產生的抗體,可用雙擴散等方法測定。前者測定的效價極為精確。而後者則粗糙得多。
(1)放射免疫法: 以不同稀釋度的抗血清與優質標記抗原混合,孵育24h後,測定其結合率。通常以結合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000。抗血清的效價,除由抗血清本身的性質決定外,還受標記抗原的質量、孵育時間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(測定方法見第8章 )
(2)雙向擴散法:利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴散,兩者在相交處產生沉澱線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。

❿ 抗體的熒光抗體鑒定

熒光抗體在使用前應加以鑒定。鑒定指醫學標記包括效價及熒光素與蛋白質的結合比率。抗體效價可以用瓊脂雙擴散法進行滴定,效價大於1:16者較為理想。熒光素與蛋白質結合比率(F/P)的測定和計算的基本方法是:將制備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0,分別測讀A280 (蛋白質特異吸收峰)和標記熒光素的特異吸收峰,按公式計算。
F/P值越高,說明抗體分子上結合的熒光素越多,反之則越少。一般用於固定標本的熒光抗體以F/P=1.5為宜,用於活細胞染色的以F/P=2.4為宜。
抗體工作濃度的確定方法類似ELISA間接法中酶標抗體的滴定。將熒光抗體自1:4~1:256倍比稀釋,對切片標本作熒光抗體染色。以能清晰顯示特異熒光、且非特異染色弱的最高稀釋度為熒光抗體工作濃度。
熒光抗體的保存應注意防止抗體失活和防止熒光猝滅。最好小量分裝,-20℃凍存,這樣就可放置3~4年。在4℃中一般也可存放1~2年。

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