消化爐使用方法

1. 消化爐的用法

消化爐採用井式電加熱方式，使樣品在井式電加熱爐內加熱取得較佳熱效應，提高消煮速度。下面我就給大家介紹消化爐的用法。

消化爐的用法

1、消化爐在蒸餾時翻滾劇烈，是水蒸氣大量進入消化管液體翻滾，並非劇烈反應造成;而且儀器有超壓保護裝置，可以保持管路內部常壓，避免危險。

2、消化爐的蒸餾水桶內要裝蒸餾水或純水，機器長期不用要將蒸餾器里水放掉。

3、消化爐開機沒聲音，如果機器電源開關內紅燈亮，說明是定氮儀內保險管燒斷了，保險管位置在機器內部靠近電源開關介面5公分處黑色殼子內。

4、消化爐蒸鍋不加熱，不能產生蒸氣， 原因：如果機器能正常加鹼，不能加熱出蒸氣，判定加熱絲可能燒壞了，可拿萬用表量一下加熱絲正負極，不通可確定加熱絲損壞，換新加熱絲。如果及其不能正常加鹼，開機後又沒有任何聲音，判斷是保險絲燒斷了，保險管位置在機器內部靠近電源開關介面5公分處黑色殼子內。

5、消化爐工作中不能加鹼、加鹼沒有聲音，原因：見車鹼桶是否漏氣，被氣充鼓機器才能正常工作;儀器使用時間長，鹼管內部會結晶，加液時流速降低，沒有聲音。

6、消化爐使用中發生消化管浸滿水，是由於機器控制水位器導電性降低造成的，解決辦法：打開水位器取出探針用砂紙打磨，去掉氧化層;在蒸餾水桶里加入3-5克實驗室用氯化鈉，搖勻溶解。

消化爐的分類

320智能消化爐

主要特點

HYP-320智能消化爐是由 上海纖檢儀器有限公司研發 。

爐內溫度連續可調，控溫精度高，控溫穩定。鋁錠一體加熱，溫差小，樣品消化均勻。控制面板與爐體散熱隔離，減少爐體高溫輻射對控制系統的影響。過熱保護：溫度超過500℃時自動切斷加熱電源並報警。限溫保護：可設置溫度上限，若實際溫度超過上限溫度，儀器將自動報警並切斷加熱電源，防止控溫系統失靈後溫度不斷上升而報廢樣品。 自動6階段升溫：可設置連續6個階段的溫度和保溫時間，儀器將自動按順序完成。更適於牛奶等易產生泡沫的樣品。毒氣罩排氣，可不用將儀器置於通風櫥中使用。完善的周邊附件配置，方便使用者稱樣，擺放等工作 。

技術參數

測定范圍： 0.1mg～200mg氮; 測定數量：20個/批.; 速 度：45min/批; 消化管容量：250ml; 控溫范圍：室溫～480℃; 控溫精度：±1℃; 平均升溫速度：30℃/min; ★控溫方式：6階段無觸點控溫; ★廢氣密封材料：聚四氟乙烯;加熱方式：鋁合金一體加熱; ★安全功能：過溫保護，限溫保護; ★顯示：2.5寸液晶屏，同時顯示實際溫度與保溫時間，並倒計時，到時後自動停止加熱並報警;電 源：220(V)±10% 50~60HZ; 額定功率： 2000W; 外形尺寸：405×435×475(mm);重 量： 27Kg;

二十孔消化爐

主要特點

HYP-1020消化爐

★消解裝置採用數顯無觸點斷開控溫，設定溫度與實際溫度雙重顯示，加熱體採用鋁合金材料，具備工作室升溫快，爐孔間溫差小的優點;

技術參數

1. 測定范圍： 0.1mg～200mg氮; 2. 測定數量：20個/批; 3. 速 度：45min/批; 4. 消化管容量：標配250ml;

5. 控溫范圍：室溫～500℃ 6. 控溫精度：±1℃; 7. 升溫速度：30℃/min; 8. 控溫方式：採用數顯無觸點斷開控溫; 9. ★廢氣密封材料：聚四氟乙烯; 10. 加熱方式：鋁合金一體加熱; 11. 電 源：220(V)±10% 50~60HZ;額定功率： 2800W; 外形尺寸：392×360×485(mm)重量25KG

4孔恆溫消化爐

消化爐介紹

HYP 4孔恆溫消化爐

按經典凱氏定氮法為原理，廣泛應用於糧食、食品、飼料、土壤、肥料、水、沉澱物、化學品乳製品、釀造、製糖、葯物、煤炭、橡膠等物質的消解，具有測試精確、安全可靠、操作簡便等特點。

技術參數

測定范圍： 0.1mg～200mg氮;測定數量：4個/批; 速 度：45min/批 ;消化管容量：標配300ml;

廢氣密封材料：聚四氟乙烯升溫速度：30℃/min;電 源：220V±10% 50~60HZ;

額定功率：1000W; 外形尺寸：430×310×485(mm);重 量： 17Kg;

8孔消化爐

主要特點

HYP-1008八孔消化爐

1、★採用數顯無觸點斷開控溫，設定溫度與實際溫度雙重顯示，加熱體採用八個陶瓷爐芯，雙排開關，單排使用;

2、★廢氣密封採用聚四氟乙烯材料加工製成，耐酸、耐鹼、耐高溫，保證操作安全;

3、消解時在不需通風櫥的條件下消化管內溢出的SO2等有害氣體，全部通過毒氣罩，經過抽氣泵溶於水中排入下水道，避免了廢氣對環境的污染，確保了操作人員的人身安全。

技術參數

測定范圍： 0.1mg～200mg氮; 測定數量：8個/批; 速 度：45min/批 ;消化管容量：標配300ml;

控溫范圍：室溫～500℃ 控溫精度：±1℃; 升溫速度：30℃/min;控溫方式：採用數顯無觸點斷開控溫;

★廢氣密封材料：聚四氟乙烯;加熱方式：陶瓷爐芯加熱;電 源：220(V)±10% 50~60HZ;

2. 雞肉、瘦肉的主要成分是（ ），檢驗方法為（ ）。

主要成分是蛋白質。檢驗方法是剴氏定氮法。

蛋白質的測定方法

pro的測定方法分為兩大類：一類是利用pro的共性，即含氮量，肽鏈和折射率測定pro含量，另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸、鹼性基團和芳香基團測定pro含量。但是食品種類很多，食品中pro含量又不同，特別是其他成分，如碳水化合物，脂肪和維生素的干擾成分很多，因此pro的測定通常利用經典的剴氏定氮法是由樣品消化成銨鹽蒸餾，用標准酸液吸收，用標准酸或鹼液滴定，由樣品中含氮量計算出pro的含量。由於食品中pro含量不同又分為凱氏定氮常量法、半微量法和微量法，但它們的基本原理都是一樣的。

一 凱氏定氮法

這種方法是1883年Kjeldahl發明，當時凱氏只使用H2SO4來分解試樣，來定量穀物中的pro，他只知用H2SO4分解試樣，而不能闡明H2SO4分解有機氮化合物生成氨的反應歷程，所以只使用H2SO4分解試樣，需要較長時間，後來由Gunning加入改進，他改進的辦法是在消化時加入K2SO4使沸點上升，這樣加快分解速度，因為溫度由原來硫酸沸點的380上升到400℃，提高了不到67℃所以速度也就加快了，凱氏定氮法至今仍在使用。

我們在檢驗食品中pro時，往往只限於測定總氮量，然後乘以pro核算等數，得到蛋白質含量，實際上包括核酸、生物鹼、含氮類脂、葉啉和含氮色素等非蛋白質氮化合物，故稱為粗pro。

1 凱氏常量定氮法：

不論常量、半微量以及微量定氮法它們的原理都是一樣的，首先第一個步驟是消化：

（1）消化：樣品與硫酸一起加熱消化，硫酸使有機物脫水。並破壞有機物，使有機物中的C、H氧化為CO2和H2O蒸汽逸出，而pro則分解氮，則與硫酸結合成硫酸銨，留在酸性溶液中。

（2）在消化過程中添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機物分解，它與硫酸反應生成硫酸氫鉀，可提高反應溫度，一般純硫酸加熱沸點330℃，而添加硫酸鉀後，溫度可達400℃，加速了整個反應過程。此外，也可以加入硫酸鈉，氫化鉀鹽類來提高沸點。其理由隨著消化過程硫酸的不斷地被分解，水分的逸出而使硫酸鉀的濃度增大，沸點增加。加速了有機的分解。但硫酸鉀加入量不能太大，否則溫度太高，生成的硫酸氫銨也會分解，放出氨而造成損失。

為了加速反應過程，還加入硫酸銅，氧化汞或硒粉作為催化劑以及加入少量過氧化氫，次氯酸鉀作為氧化劑。但為了防止污染通常使用硫酸銅。

所以有機物全部消化後，出現硫酸銅的蘭綠色，它具有催化功能，還可以作為鹼性反應指示劑。

（1）蒸餾：樣液中的硫酸銨在鹼性條件下釋放出氨，在這操作中，一是加入氫氧化鈉溶液要過量，二是要防止樣液中氨氣逸出。

（2）吸收與滴定：

蒸餾過程中放出的氨可用一定量的標准硫酸或標准鹽酸溶液進行氨的吸收，然後再用標准氫氧化鈉溶液反滴定過剩的硫酸或鹽酸溶液，從而計算出總氮量。

半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收後，再用標准鹽酸直接滴定，硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影響指示劑變色反應，它有吸收氨的作用。

1．操作步驟：

准確稱取樣品中0.50-2.00g→於500ml凱氏瓶中→加10g無水K2SO4→加0.5gCuSO4→加20ml H2SO4→在通風櫥中先以小火加熱，待泡沫消失後，加大火力，消化至透明無黑粒後，將瓶子搖動一下使瓶壁炭粒溶於硫酸中→繼續消化30分鍾→至到樣液呈綠色狀態，停止消化，冷卻→加200ml水→連接蒸餾裝置→用硼酸作吸收液→在K氏瓶中加波動珠數粒和80ml50% NaOH→立即接好定氮球→加熱→至到K氏瓶內殘液減少到三分之一時，取出用水沖洗→用0.1N HCl滴定。

N（V2-V1）0.014

W

計算：

總氮量%= （N(V2-V1)×0.014）/W × 100

0.014----氮的毫克當量數

pro%=總氮%×K

乳製品K=6.38（N=15.7%）

小麥粉K=5.79（N=17.6%）

動物膠K=5.6（N=18.0%）

冰蛋K=6.7（N=14.8%）

大豆製品K=6.0（16.7%） K=6.25則（N=16%）

K-換稱等數

各種試劑的作用:

濃H2SO4：

A ：脫水使有機物炭化，然後有機物炭化生成碳，碳將H2SO4還原為SO2，本身則變為CO2

B： 氧化

C： pro與濃H2SO4生成NH3↑，CO2，SO2，H2O↑

D： NH3與H2SO4生成硫酸銨

（1）CuSO4的作用（催化劑）

CuSO4為紅色沉澱，當C完全消化後，反應停止，紅色消失，變為蘭色，即為消化達到完全，蘭色為CuSO4的顏色

（2）K2SO4的作用（提高沸點）

沸點由330℃提高到400℃加速了反應過程。

（3）硒粉和過氧化氫，氧化汞都為催化劑，但為了防止污染通常採用硫酸銅

（4）50%NaOH的作用

下面我就針對幾點來說明為何影響氨化完全和速度快的因素:

（1）K氏燒瓶和取樣量

如果稱1g以上的樣品，就需要K氏燒瓶最小500ml，800~1000ml的更好，這樣的K氏燒瓶對於縮短氨化時間，加熱的均勻性和完全氨化效果最好。

（2）分解劑

A H2SO4和K2SO4的添加量

有機無分解需要H2SO4量，H2SO4應根據有機物種類不同而加的量就不同，如果試樣含脂類高，則加H2SO4多，為了提高分解溫度，要大量添加K2SO4，但不能太多，也不能太少，太少則氨化不充分。K2SO4和H2SO4的添加比例是：

1g樣品 K2SO4： H2SO4=7g：12ml

這種比例在國內外都使用，是公認的

還有一種比例： K2SO4：H2SO4=10：20ml

B 催化劑

用作催化劑的有Hg、HgO、Se，硒化合物，CuSO4、TiO2，對Hg，HgO有毒但結果好，Se與CuSO4得到結果是一種，TiO2，的結果偏低，採用不同的催化劑則消化時間不同， HgO消化麥子為38，Se與CuSO4消化麥子55，TiO2消化麥子70，所以在給出測定結果時要註明催化劑的類型。

（3）熱源的強度

消化時熱源的強度同迅速消化和完全氨化關系很大，即便鹽類K2SO4加得多，如果熱源弱，也是沒有意義的，熱源過強導致H2SO4損失，使氨回收率低，另外K氏瓶的容量大小，頸部的粗細和長短等，也與熱源的強度有關。

（4）氨的蒸餾和吸收及滴定

蒸餾有兩種:

1 直接蒸餾（裝置簡便，准確性好）

2 水蒸汽蒸餾

蒸餾加NaOH是50%，加的量為H2SO4量的4倍，硫酸量為12ml，則NaOH為12×4=48ml，而且一般高於這個理論值，即加到50~55ml，如果NaOH量加的不夠就變成H2S， H2S是強酸，使顏色變紅。

吸收液有：

1標准H2SO4 用標准鹼返滴定，甲醛紅指示劑

2 硼酸 用HCl進行滴定，混合指示劑

目前都用硼酸吸收液，用硼酸代替H2SO4，這樣可省略了反滴定，H2SO4是強酸，要求較嚴，而硼酸是弱酸，在滴定時，不影響指示劑變色范圍，另外硼酸為吸收液濃度在3%以上可將氨完全吸收，為保險期間一般用4%。

〈6〉實驗注意事項

a.樣品應時均勻的，若是固體樣品應事先研細，液體樣要混合均勻。

b.樣品放入K氏燒瓶時，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結果偏低。

c.消化時，如不容易呈透明溶液，可將K氏燒瓶放冷後，加入30%過氧化氫催化劑2~3ml，促使氧化。

d.在整個消化過程中，不要用強火，保持和緩的沸騰，使火力集中在K氏燒瓶底部，以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下，使氮有損失。

e.如硫酸缺少，過多的硫酸鉀會引起氨的損失，這時會形成硫酸氫鉀，而不與氨作用，因此當硫酸過多底物被消耗掉或樣品中脂肪含量過高時，要添加硫酸量。

f.混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色，如果沒有溴甲酚綠，可單獨使用0.1%甲醛紅乙醇溶液。

g.氨是否完全蒸餾出來，PH試紙檢查餾出液是否為鹼性。

h.向蒸餾瓶中加入濃鹼時，往往出現褐色沉澱無。這時由於分解促進劑與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱，有時Cu離子與氨作用生成深蘭色的絡合物。

i.消化劑綠色後繼續消化30分鍾即可。

2 K氏微量定氮儀法

3 K氏半微量定氮儀法 (2 、 3原理一樣)

操作方法大同小異，半微量法消化後，定容100ml，然後吸25ml蒸餾吸收液吸收。

N（V2-V1）0.014

W＊10／100

計算總氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100

對於微量定氮儀法，儀器有了改進，樣液稱樣少，蒸餾消化液也少，其它基本一樣。

4 K氏自動定氮法

原理與上面一樣，儀器，採用K氏自動定氮儀：其裝置內具有自動加鹼蒸餾裝置，自動吸收和滴定裝置以及自動數字顯示裝置，消化裝置：由優質玻璃製成的K氏消化瓶以及紅外線裝置的消化爐。

二 水揚酸比色法：

1 原理： 樣品中的pro經H2SO4消化轉化為銨鹽溶液後，在一定的酸度和溫度下與水揚酸鈉和次氯酸鈉作用生成有顏色的化合物，可以在波長660nm處比色測定，求出樣品含氮量，計算蛋白質含量。

2 方法 （1）標准曲線的繪制

取6個25ml容量瓶編號 0 1 2 3 4 5 6

分別加空白酸液 2ml

分別加磷酸鹽緩沖液 5ml

稀釋至總體體積至15ml

分別加水揚酸鈉 5ml

37C水浴 15分鍾

加入次氯酸鈉 2.5ml

37C水浴 15分鍾

取出試液於660nm下進行比色，繪標准曲線。

（2）樣品處理：

准確稱樣0.20~1.00g→於K氏瓶中→加15mlH2SO4和5g催化劑→電爐上加熱到沸騰後→加大

火力消化→直到出現暗綠色時→搖動瓶子→K氏瓶全部消化後→冷卻→加水至250ml容量

瓶。

（3）樣品測定：

准確吸取上述消化溶液10ml→於100ml容量瓶中→定容→准確吸2ml→於25ml容量瓶中→加

5ml磷酸緩沖液→以下操作與標准曲線繪制的步驟相同

並以試劑空白微對照，測得樣液的光密度，從標准曲線查出其含氮量。

（4）計算

C×F

含氮%= ---------------------------× 100

W×1000×1000

C---從標准曲線中查出測定樣液的含氮量（Ug）

F---樣品溶液的稀釋倍數

W---樣品重量（g）

pro%=總氮%×K（K可為6.25，也可查）

3注意事項：

A 當天消化液最好當天測定，結果重現性好，如果樣液改至第二天比色就有變化。

B 當在PH和試劑適當范圍內加入氯源後，顏色的顯色和溫度有關，應嚴格控制反應溫度。

C 這種方法測定結果基本與K氏法一致。

4 試劑

（1）氯標液：稱經110℃乾燥2h的硫酸銨0.4719g→於燒瓶中定容10ml→此液1ml相當於

1.0mg氮標液→使用時配製成1ml相當於2.50Ug氮標液。

（2）空白酸液：稱0.50g蔗糖→加15mlH2SO4和5g催化劑→與樣品一樣消化→定容250ml→

使用時吸收此液10ml→加水至100ml為工作液備用。

（3）磷酸鹽緩沖液：稱7.1g磷酸氫二鈉→加38g磷酸三鈉→加20g三九石酸鉀鈉→加400ml水

溶解→過濾→另稱35gNaOH溶於100ml水中→冷至室溫→緩緩地攪拌加入磷酸鹽溶液中→加

入水稀釋至1000ml備用。

（4）水揚酸鈉溶液：稱25g水楊酸鈉和0.15g亞硝基鐵氰化鈉溶於200ml水中過濾，加水稀釋

至500ml

（5）次氯酸鈉溶液：吸4ml安替富民液，用水稀釋至100ml

5 儀器

（1）分光光度計

（2）恆溫水浴

三 紫外分光光度法

1 原理：

pro及其降解產物的芳香環基 ，在紫外區內對某一波長具有一定的光選擇吸收，在280nm下，光吸收與pro濃度（3~8mg/ml）成直線關系，因此，通過測定pro溶液的吸光度，並參照事先用K氏定氮法分析的標准樣品，從標准曲線查出蛋白質的含量。

2 試劑：

（1） 0.1mol/l檸檬酸水溶液。

（2）8mol/l脲[（NH2）2CO]的2NNaOH溶液。 脲的2N氫氧化鈉液

（3） 95%乙醇

（4） 無水乙醚

3 儀器

（1） 751型的紫外分光光度計

（2） 離心機

4 操作方法

（1）標准曲線的繪制：准確稱取樣品.2.00g，置於50ml燒瓶中，加入0.1mol/l檸檬酸水溶液30ml，攪拌30分鍾使其充分溶解，用四層紗布過濾於玻璃離心管中，以每秒鍾3000~5000轉的速度離心10分鍾，分別吸出上清夜0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml於6個10ml容量瓶鍾，每個容量瓶，8mol/l脲的氫氧化鈉溶液充分搖2分鍾（如果離心再次離心），取透明液於比色皿中，在280nm下測定其吸光度。（做參比值）

以事先用K氏定氮法測定的樣品中蛋白質的含量微橫坐標上面的吸光度為縱坐標，繪制標准曲線。

（2）樣品測定

准確稱取試樣1.00g→於50ml燒杯中→加0.1mol/l檸檬酸溶液30ml→攪拌10分鍾→四層紗布過濾到離心管中→用8mol/L脲的NaOH溶液定容，搖勻後於280nm下測吸光度，從標准曲線上查出pro的含量。

計算： 蛋白質= C/W× 100

C----從標准曲線上查得的pro含量（mg）

W----測定樣品溶液相當於樣品量（mg）

說明：

a.此法運用於糕點，牛乳和可溶性pro樣品，測定糕點時，應把表皮顏色去掉。

b.溫度對pro水解有影響，操作溫度應控制在20~30℃。

四 雙縮脲法-皮尼克法

1 原理：

雙縮脲在鹼性條件中，能與CuSO4結合成紅紫色的絡合物。pro分子中含有肽鏈與雙縮脲結構相似，也呈此反應。本法直接用於測定像小麥粉等固體試樣的pro含量。但作為銅的穩定劑，酒石酸鉀鈉比甘油好些。小麥粉中的pro能直接地一邊抽出一邊進行定量。

2 試劑

⑴甘油作為穩定劑：取10ml10N KOH溶液，3.0ml甘油加到937ml水中，激烈攪拌，同時加入4%CuSO450ml。

⑵酒石酸鈉作穩定劑，吸10ml10N KOH溶液和20ml25%酒石酸鉀鈉溶液加到930ml水中，激烈攪拌，同時加入4%CuSO4液40ml。

配製以上兩種溶液、試劑，必須澄清，無氫氧化銅生成，否則重配。

3 方法：樣品測定

標准曲線繪制

准確稱0.6g樣品→使用試劑（1）

准確稱0.5g樣品→使用試劑（2）

假如用試劑（2）

（1）准確稱樣→0.5g→於80ml離心管→加1mlClC4→混合→加50ml酒石酸鉀鈉穩定劑→蓋上蓋子離心10min（4000轉/分）→放置1小時→吸混合液15ml→於20ml離心管中→離心到完全透明→取上清夜5ml於→10ml容量瓶→加水定容→於550nm處測定吸光度，從標准曲線上查出pro含量。

（2）標准曲線繪制

按樣品測定方法，根據樣品中pro含量，取離心澄清樣液0.0 2.0 4.0 8.0 10.0ml於10ml容量瓶中→分別加水定容，按照樣品測定其吸光度。

事先用K氏定氮法測定樣品中pro含量為橫坐標，以上述吸光度為縱坐標繪制標准曲線。

4 計算：蛋白質%=C/W×100

C----從標准曲線上查得得pro含量（mg）

W----測定樣液時相當於樣品重量（mg）

3. 攝入硒過量對人體健康有什麼害處

硒是人體必需的微量元素，但若攝入過多會對人體健康造成危害，近年過

我國營養學家楊光圻教授根據大量人體資料，提出了硒的每人每日安全攝入量為

400μg，我國衛生部為了控制人體硒的攝入量，也制定了食品中硒的衛生標准

GB13105-91，並研製配套的國家標准方法GB12399-90-食品中硒的熒光測定法。由

於該法操作繁瑣、 Ky用試劑2,2-二氨基萘(2,3-diaminonaph-thatene,簡稱DAN)毒性大、

且需進口。 1>次修訂提出了較快速、簡便、准確度、精密度好的氫化物原子熒江

江譜法測定各類食品中的硒，以彌補GB12399-90的不足。鑒於原子熒江江度計在

國內尚未普及，故作為第二法補充本標准。

1 范圍

本標准規定了用熒光法和氫化物原子熒光光譜法測定食品中硒的方法。

本標准適用於各類食品中硒的測定。

第一法 熒光法

2 原理

樣品經混合酸消化後，硒化合物被氧化為四價無機硒(Se4+)，與2.3-二氨基萘

(2,3-diaminonaphthatene,簡稱DNA)反應生成4,5-苯並苤硒腦(4,5-benzo piaselenol),

其熒光強度與硒的濃度在一定條件下成正比。用下己烷萃取後於激發光波長376nm，

發射江波長520nm處測定熒光強度，與繪制的標准曲線比較定量。本方法檢出限為3ng。

3 試劑

3.1 環己烷。

3.2 硝酸。

3.3 過氯酸。

3.4 鹽酸。

3.5 氫溴酸。

3.6 1+9鹽酸溶液:取10mL鹽酸，加90mL水。

3.7 1+1氨水。

3.8 5+95去硒硫酸:取5mL去硒硫酸，加於95mL水中。

去硒硫酸:取200mL硫酸，加於200mL水中，再加30mL氫溴酸，混勻， 置沙

浴上加熱蒸去硒與水至出現濃白煙，此時體積應為200mL。

3.9 0.2mol/LEDTA:稱37gEDTA二鈉鹽，加水並加熱溶解，冷卻後稀釋至500mL。

3.10 10%鹽酸羥胺:稱取10g鹽酸羥胺溶於水中，稀釋至100mL。

3.11 混合酸:硝酸+過氯酸(2+1)。

3.12 0.1%2,3-二氨基萘(純度95%～98%)需在暗室配製。稱取200mgDAN於一帶蓋三

角瓶中，加入200mL0.1mol/L鹽酸，振搖約15min，使其全部溶解。約加40mL環己烷，

繼續振搖5min，將此液轉入分液漏斗中，待溶液分層後，棄去環己烷層，收集DAN

層溶液。 如此用環己烷純度不同而定，一般約需純化3～4次)。將提純後的DAN溶

液儲於棕色瓶中，約加1cm厚的環己烷覆蓋溶液表面。置冰箱中保存。必要時再

純化一次。

3.13 硒標准溶液

3.13.1 硒標准儲備液(100μg/mL):精確稱取100.0mg元素硒(光譜純)，溶於少量硝酸

中，加2mL過氯酸，置沸水浴中加熱3～4h，冷卻後加入8.4mL鹽酸，再置沸水浴中

煮2min。准確稀釋至1000mL，其鹽酸濃度為0.1mol/L。此儲備液濃度為100μg/mL。

3.13.2 硒標准使用液(0.05μg/mL):將3.13.1液用0.1mol/L鹽酸稀釋，使含硒為0. 05

μg/mL。於冰箱中保存。

3.14 0.02%甲酚紅指示劑:稱取50mg甲酚紅溶於水中，加1+1氨水1滴，待甲酚紅完

全溶解後加水稀釋至250mL。

3.15 EDTA混合液:取(3.9)和(3.10)液各50mL，混勻，再加5mL(2.14)溶液， 用水稀釋

至1L。

4 儀器和設備

4.1 實驗室常用設備。

4.2 熒光分光光度計。

5 分析步驟

5.1 樣品處理及消化

5.1.1 糧食:樣品用水洗三次，60℃烘乾，用不銹鋼磨磨成粉，儲於塑料瓶內，放一小

包樟腦精，蓋緊蓋保存，備用。

5.1.2 蔬菜及其他植物性食物:取可食部用水沖洗三次後用紗布吸去水滴，用不銹鋼刀

切碎，取混合均勻的樣品於60℃烘乾，稱重，粉碎、備用。

5.1.3 稱取0.5-2.0g樣品(含硒量0.01～0.5μg)於磨口三角瓶內， <S10mL5+95去硒硫

酸，樣品濕潤後，再加20mL混合酸液放置過夜。次日於沙浴上逐漸加熱，當激烈反

應發生後(溶液變無色)，繼續加熱至產生白煙，溶液逐漸變成淡黃色即達終點。某

些蔬菜樣品消化後常出現渾濁，難以確定終點，所以要細心觀察，還有含硒較高的

蔬菜含有較多的Se6+，需要在消化達到終點時冷卻後加10mL 1+9鹽酸，繼續加熱，

使Se6+還原成Se4+。

按上述方法確定終點。

5.2 測定

於樣品消化液中加20mLEDTA混合液，用氨水(1+1)或鹽酸調至淡紅橙色(pH1. 5

～2.0)。以下步驟在暗室進行:加3mLDAN試劑，混勻，置沸水浴中煮5min， H!出立即冷卻，加3mL環己烷，振搖4min，將全部溶液移入分液漏斗，待分層後棄去水層，環己烷層轉入帶蓋試管中，小心勿使環己烷中混入水滴，於激發光波長376nm，發射光波長

376nm，發射光波長520nm處測定苤硒腦的熒光強度。

5.3 硒標准曲線繪制:准確吸取硒標准使用液0、0.2、1.0、2.0及4.0mL，加水至5mL，

按樣品測定步驟同時進行。硒含量在0.5μg以下時熒光強度與硒含量呈線性關系，

在常規測定樣品時，每次需做試劑空白與樣品硒含量相近的標准管(雙份)即可。

6 結果

6.1 計算

C-B 1

X= --------- × S × ------

A-B m

式中:X—樣呂中硒含量，μg/g；

A—標准管熒江讀數；

B—空白管熒光讀數；

C—樣品管熒光讀數；

S—標准管硒含量，μg；

m—試樣質量,g。

6.2 結果的允許差

同一實驗室平行測定或重復測定結果相對偏差絕對值≤10%。

第二法 氫化物原子熒光光譜法

7 原理

樣品經酸加熱消化後，在6mol/L鹽酸(HCl)介質中， 將樣品中的六價硒還原成

四價硒，用硼氫化鈉(NaBH4)或硼氫化鉀(KBH4)作還原劑， 將四價硒在鹽酸介質中還

原成硒化氫(SeH2)，由載氣(氬氣)帶入原子化器中進行原子化，在硒特製空心陰極燈

照射下，基態硒原子被激發至高能態，在去活化回到基態時，發射出特徵波長的熒

光，其熒光強度與硒含量成正比。與標准系列比較定量。

8 試劑

本方法中，除特殊規定外，所用試劑為分析純，試驗用水為蒸餾水或同等

純度水。

8.1 硝酸(優級純)

8.2 高氯酸(優級純)

8.3 鹽酸(優級純)

8.4 混合酸:硝酸+高氯酸(4+1)混合酸。

8.5 氫氧化鈉(優級純)

8.6 硼氫化鈉溶液(8g/L):稱取8.0g硼氫化鈉(NaBH4)，溶於氫氧化鈉溶液(5g/L)中，

然後定容至1000mL。

8.7 鐵氰化鉀(100g/L):稱取10.0g鐵氰化鉀(K3Fe(CN)6)，溶於100mL蒸餾水中，混勻。

8.8 硒標准儲備液:精確稱取100.0mg硒(光譜純)，溶於少量硝酸中，加2mL高氯酸，置

沸水浴中加熱3～4小時，冷卻後再加8.4mL鹽酸，再置沸水浴中煮2分鍾，准確稀釋

至1000mL，其鹽酸濃度為0.1mol/L，此儲備液濃度為每毫升相當於100μg硒。

8.9 硒標准應用液:取100μg/mL硒標准儲備液1.0mL，定容至100mL，此應用液濃度

為1μg/mL。

9 儀器

9.1 AFS-210雙道原子熒光光度計或同類儀器

9.2 電熱板

9.3 自動控溫消化爐

10 分析步驟

10.1 樣品處理及消化

10.1.1 糧食:樣品用水洗三次，60℃烘乾，用不銹鋼磨粉碎，儲於塑料瓶內，備用。

10.1.2 蔬菜及其他植物性食物:取可食部用水洗凈後用紗布吸去水滴，打成勻漿後

備用。

10.1.3 稱取0.5-2.0g樣品於高筒燒杯內，加10.0mL混合酸及幾粒玻璃珠，蓋上表面皿

冷消化過夜。次日於電熱板上加熱，並及時補加混酸。當溶液變為清亮無色並伴有

白煙時，再繼續加熱至剩餘體積2mL左右，切不可蒸干。冷卻，再加5mL6mol/L鹽酸，

繼續加熱至溶液變為清亮無色並伴有白煙出現，以完全將六價硒還原成四價硒。

冷卻，轉移定容至50mL容量瓶中。同時做空白實驗。

10.1.4 吸取10mL樣品消化液於15mL離心管中，加濃鹽酸2mL，鐵氰化鉀溶液1mL，

混勻待測。

10.2 標准曲線的配製:分別取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0. *mL標准應用液於15mL離心管中，用去離子水定容至10mL，再分別加濃鹽酸2mL，鐵氰化鉀1mL，混勻，制

成標准工作曲線。

10.3 測定

10.3.1 儀器參考條件:

負高壓:340V；燈電流:100mA；原子化溫度:800℃；爐高:8mm；載氣流

速:500mL/min；屏蔽氣流速:1000mL/min；測量方式:標准曲線法；讀數方式:峰面積；

延遲時間:1s；讀數時間:15s；加液時間:8s；進樣體積:2mL。

10.3.2 測定:根據實驗情況任選以下一種方法。

10.3.2.1 濃度測定方式測量:設定好儀器最佳條件，逐步將爐溫升至所需溫度後，

穩定10～20分鍾後開始測量。連續用標准系列的零管進樣，待讀數穩定之後，轉

入標准系列測量，繪制標准曲線。轉入樣品測量，分別測定樣品空白和樣品消化液，

每測量不同的樣品前都應清洗進樣器。樣品測定結果按以下公式計算。

10.3.2.2 儀器自動計算結果方式測量:設定好儀器最佳條件，在樣品參數畫面， 輸入

以下參數:樣品質量(g或mL)，稀釋體積(mL)，並選擇結果的濃度單位。逐步將爐溫升

至所需溫度後，穩定10～20分鍾後開始測量。連續用標准系列的零管進樣，待讀數

穩定之後，轉入標准系列測量，繪制標准曲線。在轉入樣品測定之前，再進入空白

值測量狀態，用樣品空白消化液進樣，讓儀器取其均值作為扣底的空白值。隨後即

可依次測定樣品。測定完畢後，選擇「列印報告」即可將測定結果自動列印。

10.4 結果

10.4.1 計算

(C-C0)×V×1000

X=-------------------------------------------

M×1000×1000

式中:X:樣品中硒的含量，mg/kg(或mg/L)；

C:樣品消化液測定濃度，ng/mL；

C0:樣品空白消化液測定濃度，ng/mL；

M:樣品質量(體積)，g(mL)；

V:樣品消化液總體積，mL。

10.4.2 本標准檢出限儀器檢出限為0.5ng/mL。

標准曲線線性范圍0～400ng/mL。

方法回收率:標准粉:85.7%～102.3%奶粉:88.8%～101.2%。

標准參比物質控結果:

標准物 測定次數(n) 測定值 標准值

茶葉 (GBW08505) 7 0.044 0.041±0.010

豬肝 (GBW08551) 7 0.931 0.940±0.050

相對標准偏差:RSD=2.6%(n=12)

附錄A(提示的附錄)

食品中硒的測定

氫化物原子熒光光譜法

1 方法評價

氫化物原子熒光光譜法測定食品中硒，簡便、快速、准確度、靈敏度、

精密度好，線性范圍寬，所用試劑毒性小，實用性強。

2 方法研製及驗證結果

┌——————┬——————┬——————┬————————┐

│ 單位 │北京市衛生 │衛生部食品衛│北京進口食品衛生│

│ │ 防疫站 │生監督檢驗所│ 監督檢驗所 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 儀器型號 │ AFS-220 │ xdy-2a │ AFS-210 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 檢出限 │ 0.5(ng/ml) │ 0.3(ng/ml) │ 0.2(ng/mL) │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 回收率 │ 85.7-112.3 │ 85.7-112.3 │ 95.4-120.0 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 質控樣名稱 │茶葉 豬肝 │奶粉 牛血清 │ 甘蘭 豬肝 │

│ │GBN GBN │GBN GBN │ GBN GBN │

│ │08505 08551 │0859 09131 │08504 08551 │

│ 分析結果 │0.044 0.931 │0.209 38.2 │0.082 0.934 │

│ 標准值 │0.041 0.940 │ 0.22 38.9 │0.083 0.934 │

│ (μg/g) │0.010�0.05│0.02 �2.3 │�0.008�0.05 │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 相對標准 │ 2.6 │ 2.1 │ 5.1 │

│ 偏差(rsd%) │ │ │ │

├——————┼——————┼——————┼————————┤

│ 標准曲線相 │ r=0.9999 │ │ r=0.9992 │

│ 關系數(r) │ │ r=0.9999 │ │

└——————┴——————┴——————┴————————┘

3 操作注意事項及經驗介紹

(1)本方法樣品在加熱消化過程中，切不可蒸干，以免硒損失。

(2)對於難消化的樣品，若需加硫酸消化，必須進行硫酸的去硒處理， Rr硫酸中含硒量

較高。

4 本標准研製人員:

北京市衛生防疫站:田佩瑤、毛紅

衛生部食品衛生監督檢驗所:楊惠芬 黃流生 陳青川

北京進口食品衛生監督檢驗所:閻軍 楊光

------------------------------------------------

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

中華人民共和國衛生部1996--06--19批准 1996--09--01實施

進口豌豆 警惕硒超標

2006-4-18 廈門出入境檢驗檢疫局 鄭萬里

國家質檢總局發出風險警示要求批批嚴檢發現問題一律退運

記者4月14日下午從廈門檢驗檢疫局了解到，為有效防止被有毒有害物質污染的食品入境，國家質檢總局發出風險預警，要求各地檢驗檢疫機構對進口豌豆加強檢驗檢疫，批批檢測硒含量，凡經檢驗檢疫不符合我國要求的進口豌豆，一律作退運處理。

為防止不符合我國衛生安全要求的豌豆進境，同時為避免進口企業產生不必要的經濟損失，廈門檢驗檢疫局授權新聞發言人向各進口企業發出警示，希望予以高度重視。特別是在簽訂貿易合同時，要注意嚴格簽訂檢驗檢疫條款，並敦促國外供貨商在出口前對豌豆進行硒、農葯殘留等有毒有害物質檢測，不得出口不符合中國衛生要求的產品。

據悉，今年2月，我國質檢部門分別從美國進口黃豌豆、加拿大進口豌豆中檢出硒含量超過我國國家標准。廈門檢驗檢疫局植檢處介紹，由於漳州等地食品和飼料行業需求旺盛，從去年下半年開始，廈門進口豌豆數量不斷攀升，2005年共進口豌豆20批6091噸，今年第一季度進口量已達14批次4646噸，目前暫未檢出硒超標。

[名詞解釋] 硒 硒是生命必需的微量元素，科學家發現硒與許多疾病的防治有關。在我國，硒被用以預防克山病（一種以心肌壞死為主要症狀的地方病）和大骨節病。人們還認為硒可以防癌、抗衰老等。

但人體中硒攝入量並不是越多越好，已發現在高硒地區，牲畜會因攝入過量硒而中毒，導致發育遲緩、脫毛、甚至死亡。當前人們對缺硒相當重視，而對攝入過量硒的危害尚認識不足。科學家研究，以標准人的體重70公斤計算，人體內硒含量約15毫克，人體在攝取與排泄中要保持體內的硒大致平衡，缺硒當然會患病，但攝入量過多對肌體也會造成傷害。我國國標GB 2762-2005食品中污染物限量中規定豆類及製品中允許含有的硒的最高限量為0.3mg/kg。

4. 廢鋁怎樣回收利用

可以拿到煉制鋁鍋鋁壺的地方做成廚房用具，也可以直接賣廢鋁，

5. 蛋白質及氨基酸的測定有哪些方法求大神幫助

樓主你好： 測定蛋白質最基本的方法是定氮法，即先測定樣品中的總氮量，再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法，它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一，在國內外應用普遍。此外，雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定，由於方法簡便快速，故多用於生產單位質量控制分析。 蛋白質及氨基酸的測定 蛋白質是生命的物質基礎，是構成生物體細胞組織的重要成分，一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質。人體內的酸鹼平衡、水平衡的維持；遺傳信息的傳遞；物質的代謝及轉運都與蛋白質有關。人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物，來構成自身的蛋白質，故蛋白質是人體重要的營養物質，也是食品中重要的營養指標。 蛋白質是復雜的含氮有機化合物，分子量很大，它們由20種氨基酸通過醯胺鍵以一定的方式結合起來，並具有一定的空間結構。不同的蛋白質其氨基酸構成比例及方式不同，故各種不同的蛋白質其含氮量也不同。蛋白質可以被酶、酸或鹼水解，最終產物為氨基酸。氨基酸是構成蛋白質的最基本物質，在構成蛋白質的氨基酸中，亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成，必須依靠食品供給，故被稱為必需氨基酸，它們對人體有著極其重要的生理功能，常會因其在體內缺乏而導致患病，或通過補充而增強了新陳代謝作用。所以食品及其原料中蛋白質和氨基酸的分離、鑒定和定量具有極其重要的意義。 蛋白質的測定 測定蛋白質最基本的方法是定氮法，即先測定樣品中的總氮量，再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法，它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一，在國內外應用普遍。此外，雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定，由於方法簡便快速，故多用於生產單位質量控制分析。 微量凱氏定氮法 本法適用於各類食品中蛋白質的測定。 1．原理 食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸胺。然後鹼化蒸餾使氨游離，用過量硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。反應過程分為三個階段，用反應式表示如下。 ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH。)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+。Na2S04 2NH3+4H3803—，(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2．儀器 ①消化爐。 ②凱氏定氮蒸餾裝置。 3．試劑 所用試劑均用不含氨的蒸餾水配製。試劑均為分析純。 ①CuS04。 ②K2SO。 ③濃H2SO。 ④2％H。BO。溶液。 ⑤混合指示劑：1份O．1％甲基紅乙醇溶液與5份O．1％溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份O．1％甲基紅乙醇溶液與1份0．1％次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。 ⑥飽和氫氧化鈉：500 g氫氧化鈉加入500 mL水中，攪拌溶解，冷卻後放置數日，澄清後使用。 ⑦0．01 toolI．一』或0．05 toolL叫HCl標准溶液(需用無水碳酸鈉標定後使用)。 4．操作步驟 ①樣品消化：精密稱取O．2～2．0 g固體樣品或2～5 g半固體樣品或吸取液體樣品5～20mI。，放人500 mI。乾燥凱氏燒瓶中，加人O．2 g硫酸銅、3 g硫酸鉀及20 mL濃HzSOa，於凱氏瓶口放一小漏斗，並將其以45。角斜支於有小孔的石棉網上。（更多詳細咨詢請參考國家標准物質網 www.rmhot.com ）用電爐以小火加熱，待內容物全部碳化，泡沫停止產生後，加大火力，保持瓶內液體微沸，至液體變藍綠色透明後再繼續加熱微沸30 min。冷卻，小心加入20 mL水，再放冷至室溫，移人100 mL容量瓶中，並用少量水洗燒瓶洗液並人容量瓶，在加水至刻度，混勻備用。除不加樣品外，取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸，按同一方法做試劑空白消化。 ②水蒸氣發生瓶內裝水至約2／3處，加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。 ③向接收瓶內加入10 mL 2％硼酸溶液及混合指示液l滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取lO mI。樣品消化稀釋液由小玻璃杯流人反應室，並以10 mL水洗滌小燒杯使之流人反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將3～10 mL飽和氫氧化鈉溶液倒人小玻璃杯中，提起玻璃塞使其緩緩流入反應室，立即將玻璃塞蓋緊，並加水於小玻璃杯中以防漏氣。加緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸汽通人反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾2～5 min，移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面，然後用少量中性水沖洗冷疑管下端外部，再蒸餾1 min取下接收瓶，以0．01 molI．叫或O．05 molL1HCl標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。同時吸取10 mI_，試劑空白消化液按③操作。 5．計算 6。說明 ①干樣用稱量紙稱重連紙一同消化，空白管同樣放稱量紙消化。 ②含糖量高和油脂高的樣品消化時容易溢出，加熱要緩慢。 ③氨是否蒸餾完全，可用pH試紙測試餾出液是否為鹼性來判斷。 ④實驗前必須仔細檢查蒸餾裝置的各個連接處，保證不漏氣。所用橡皮管、塞子須浸在氫氧化鈉(10％)中，煮沸10 min，然後水洗、水煮，再用水洗。 ⑤小心加樣，切勿使樣品沾污凱氏燒瓶口部和頸部。

6. 凱氏定氮儀消化爐是什麼

凱氏定氮儀消化爐是在測定蛋白質含量時可以用得到的儀器。

凱氏定氮儀消化爐也叫分路數顯消化爐，採用井式電加熱方式，使樣品在井式電加熱爐內加熱取得較佳熱效應，提高消煮速度，消化管內逸出的SO2等有害氣體，通過排污管經抽吸泵從水中排入下水道，有效地抑制有害氣體的外逸。消化爐採用智能溫度儀表數控電加熱爐內溫度，並直接顯示溫度值。配不銹鋼排污罩使用方便採用四氟乙稀密封圈，無須更換。你說的這款托普雲農凱氏定氮儀消化爐廣泛用於食品、農作物、種子、土壤、肥料等樣品的含氮量或蛋白質含量分析。

7. 凱氏定氮法加的指示劑量不同會有影響嗎

摘要 摘要

8. 一個實驗設計「Rh的定量分析方法及其性質」找了好久都沒找到，求助！（最好有文獻和詳細的測定方法）謝謝

對二乙氨基苯基亞甲基若丹寧柱前衍生-高效液相色譜法測定汽車尾氣催化劑中的鉑、鈀、銠的研究

李維莉1* ，馬銀海1，彭永芳1，胡秋芬1，2，尹家元2
(1昆明師范專科學校化學系，昆明650031；2 雲南大學化學系，昆明 650091)

摘要 研究了用對二乙氨基苯基亞甲基若丹寧(DEABR) 為柱前衍生試劑，以安捷倫ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm) 快速分離柱為固定相，85％的甲醇（內含0.5%的醋酸）為流動相，高效液相色譜分離，二極體矩陣檢測器檢測測定鉑、鈀、銠的的方法，三種貴金屬元素的絡合物在2.0 min內可達到基線分離。根據信噪比（S/N=3）得各金屬離子的檢出限分別為：鉑1.2 mg/L，鈀1.0 mg/L，銠1.0 mg/L，方法用於汽車尾氣催化劑中痕量鉑、鈀、銠的測定，相對標准偏差在1.2～2.1%之間, 加標回收率在94～105%之間，結果令人滿意。
關鍵詞 高效液相色譜，對二乙氨基苯基亞甲基若丹寧 (DEABR)，鉑、鈀、銠

1. 引 言
鉑、鈀、銠是汽車尾氣催化劑中的活性元素。由於鉑族金屬價格昂貴且資源貧乏，必須進行再生回收。其回收利用價值又在很大程度上取決於樣品中鉑、鈀、銠的准確測定 [1,2]。但是貴金屬元素性質相似，在樣品中容易共生且含量很低，常規方法測定時樣品前處理很復雜且誤差大。近幾年來高效液相色譜法在無機分析中的應用研究取得了迅速發展，痕量金屬離子與有機試劑形成穩定的有色絡合物，用高效液相色譜分離，紫外-可見光度檢測器測定金屬離子，克服了光度分析選擇性差的缺點，可實現多元素同時測定，方法簡便快速 [3-6]。若丹寧類試劑在光度分析中得到了廣泛應用，但是用於無機元素的高效液相色譜測定報道較少。我們研究了用對二乙氨基苯基亞甲基若丹寧 (DEABR)為柱前衍生試劑，ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm)快速分離柱為固定相分離鉑、鈀、銠的絡合物，並結合微波消化樣品和二極體矩陣檢測器檢測建立了一種高效液相色譜測定鉑、鈀、銠的方法。該方法中3種元素絡合物的分離只需2.0 min，和常規高效液相色譜法相比，大大縮短了分析時間。

2 實驗部分
2.1主要儀器和試劑
美國Waters高效液相色譜儀，包括2690 Alliance分離系統（四元泵及自動進樣器），996 (PAD)紫外二極體矩陣檢測器，Millennium32色譜管理軟體；美國CEM公司MWD-2型微波通用消解裝置，配50 mL聚四氟乙烯消化罐。
鉑、鈀、銠標准儲備液，1.0 mg/mL，購於國家標准物質研製中心，使用時稀釋成 2.0 mg/mL標准工作液；pH為 3.6 的醋酸-醋酸鈉緩沖液，0.5 mol/L；DEABR按文獻[7]的方法合成，使用時用乙醇配成1.0×10-4 mol/L溶液；甲醇：高效液相色譜專用（Fisher公司生產）；水為二次蒸餾水，並用Milli-Q50超純水儀(美國Millipore公司) 處理，電阻³ 18 MW .cm；所用試劑除作特殊說明外均為分析純。
2.2 色譜條件
色譜柱為ZORBAX Stable Bound (4.6×50 mm, 1.8 mm) 快速分離柱；流動相為85％的甲醇 (內含0.5%的醋酸)，流速為2.0 mL/min, 進樣體積10 m L。在上述色譜條件下，標樣和樣品在540 nm處的色譜圖見圖1。

圖1 標樣和催化劑樣品色譜圖
Fig.1 The chromatogram of standard samples (a) and catalyst samples (b)

2.3 實驗方法
取適當的標樣或樣品溶液於 25 mL容量瓶中。加入4 mL pH 3.6 的醋酸-醋酸鈉緩沖液，5.0 mL 1×10-4 mol/L DEABR溶液，定容到25 mL, 搖勻，放置10 min，取5 mL用0.45 m m針頭過濾器過濾，進樣10 mL分析。

3 結果與討論
3.1 柱前衍生條件
DEABR與鉑、鈀、銠在弱酸性介質中顯色，最佳顯色pH為：鉑 1.2-4.8，鈀 0.8-4.6，銠1.6- 4.2，因此實驗選用pH＝3.6 醋酸-醋酸鈉緩沖溶液控制顯色酸度，用量在4.0 mL左右可把pH控制在適宜范圍。試驗表明，1×10-4 mol/L DEABR用量在1.0 mL以上即可分別完全絡合含量為10 m g的鉑、鈀、銠；由於實際樣品中還有其它元素也會與DEABR絡合而消耗試劑，需加入過量的試劑，因此實驗選用加入5.0 mL的DEABR溶液；各元素的絡合物在生成後至少可穩定4 h。
3.2 鉑、鈀、銠的定性及檢測波長的選擇
樣品中鉑、鈀、銠均由其保留時間及二極體矩陣檢測器350-600 nm波長掃描所得紫外光譜圖與標樣對照確認，由二極體矩陣檢測器所記錄光譜圖可知： Pt-DEABR絡合物最大吸收波長為542 nm，Pd-DEABR絡合物最大吸收波長為538 nm，Rh-DEABR絡合物最大吸收波長為530 nm，為了達到最佳靈敏度，各組分均在最大波長下檢測定量。
3.3色譜條件
用水和甲醇為流動分離DEABR與鉑、鈀、銠生成的絡合物，當甲醇的比例為85%時各絡合物均可達到基線分離且分離時間短，因此實驗選用85%的甲醇為流動相。DEABR與鉑、鈀、銠生成的絡合物在弱酸性條件下穩定，因此實驗選擇在流動相中含0.5%的醋酸。
3.4干擾實驗
在弱酸性條件下，除鉑、鈀、銠外，其它元素Au3+，Hg2+，Pb，Cu2+，Ag+也與DEABR生成絡合物，因此我們做了干擾實驗，對於2 mg的鉑、鈀、銠，50倍的Hg2+，Pb2+，Cu2+ 和10倍的 Au3+，Ag+不幹擾測定，方法選擇性較好。
3.5工作曲線及檢出限
用峰面積定量法得工作曲線，結果見表1，根據信噪比S/N=3，算得各組分的檢出限，結果見表1。表中A為峰面積，C單位為 (mg/L)。

表1 回歸方程、相關系數及檢出限
Table 1 Regression Equation, Coefficient and Detect limit

組分
Components
回歸方程
Regression Equation
線性范圍Linear Range (mg/L)
相關系數 Coefficient
檢出限
Detect limit (mg/L)

Pt-DEABR
A=3.58×104 C - 367
5-1200
r=0.9991
1.2

Pd-DEABR
A=3.06×104 C - 115
4-1100
r=0.9993
1.0

Rh-DEABR
A=2.96×104 C + 431
6-900
r=0.9992
1.0

3.6樣品分析結果
樣品分析時每樣平行測定5次，准確稱取已磨細至120-200目的試樣稱取0.2 g (精確到0.0001 g)於聚四氟乙烯消化罐中，加3 mL的濃鹽酸和1.0 mL的過氧化氫，立即蓋上罐內蓋，旋緊外蓋，於微波消化爐中用800 W的功率消解10 min；消解完後於電熱板上加熱蒸發到近干，用10 mL 5 %的鹽酸溶解殘渣，轉入25 mL的容量瓶中定容，依樣品含量高低，酌情取適當體積試液於25 mL的容量瓶中，按實驗方法測定，另取相同樣品一份，加入0.2 mg 的Pt、0.05 mg的Pd和Rh，按上述方法消化後按實驗方法測定，用加標樣品測出量減去未加標樣品測出量再除以標准加入量計算加標回收率，用5次平行測定的結果計算相對標准偏差，結果見表-2。用電感偶合等離子體質譜法作對照，結果見表3。

表2 本方法樣品分析結果 (mg/g)
Table 2 Determination results (mg/g) of the sample with the proposed method

組分
Components
樣品 Samples
RSD％
(n=5)
回收率％recovery%

CHJ0623
CHJ0625
CHJ0626
CHJ0629

Pt
1.22
0.947
1.18
1.54
1.2-1.8
96-101

Pd
0.356
0.218
0.311
0.284
1.4-1.9
98-104

Rh
0.122
0.076
0.148
0.053
1.6-2.1
94-105

表3 ICP-MS法樣品分析結果 (mg/g)
Table 3 Determination results (mg/g) of the sample with ICP-MS method

組分
Components
樣品 Samples
RSD％
(n=5)
加標回收率recovery%

CHJ0623
CHJ0625
CHJ0626
CHJ0629

Pt
1.16
0.952
1.22
1.51
1.7-2.2
94-102

Pd
0.377
0.222
0.317
0.291
2.0-2.5
98-108

Rh
0.125
0.074
0.151
0.051
2.1-2.7
97-109

4 結 論
本方法把若丹寧類試劑應用到高效液相色譜測定無機元素中，採用對二乙氨基苯基亞甲基若丹寧為柱前衍生試劑，快速分離柱高效液相色譜法測定鉑、鈀、銠，3種貴金屬元素的絡合物在2.0 min內可達到基線分離，分析時間比常規色譜柱(10-20 min)相比大大縮短。方法檢出限達m g/L 級，具有較高的靈敏度。本方法採用微波消化樣品，消解一批樣品只需10 min，和常規方法相比大大縮短了樣品消解時間，而且密閉的微波消化環境污染大大降低。總之本方的建立為汽車尾氣催化劑中痕量鉑、鈀和銠的快速准確測定提供了方法。

9. 怎樣用原子吸收法測樣品中的鐵

1．原理

每種元素的原子能夠吸收特定波長的光能，而吸收的能量值與該光路中該元素的原子數目成正比。用特定波長的光照射這些原子，測量該波長的光被吸收的量，與標准溶液製成的效正曲線對比，求出被測元素的含量。

2．儀器

原子吸收光譜分光光度計。

3．試劑

①混合酸消化液：硝酸和高氯酸4+1混合。

②O．5 mol·L_。H＼03溶液。

③O．12 mol·L叫HCl；

④去離子水：80(kQ)以上。

⑤標准貯備液：准確稱取0．4979 g硫酸亞鐵(FeS()4·7H。O)溶於100 mi。水中，加入5mI。濃硫酸微熱，溶解即滴加2％高錳酸鉀溶液，至最後一滴紅色不褪色為止，用水定容至1 000 mI。，搖勻，得標准貯備液，Fe。+濃度為100ug／mI。

4．測定方法

①樣品消化：實驗操作需在無元素污染的環境中進行。准確稱取樣品干樣O．3～0．7 g，濕樣1．O g左右，飲料等其他液體樣品1．O～2．O mL，然後將其放人50 mI。消化管中，加混合酸15 mI．(油樣或含糖量高的食品可多加些酸)，過夜。次日，將消化管放入消化爐中，消化開始時將溫度調低(約130℃左右)，然後逐步將溫度調高(最終調至240℃左右)進行消化，一直消化到樣品冒白煙，液體變成無色或黃綠色為止。若樣品未消化好可再加幾毫升混酸，直到消化完全。消化完後，放冷，加5 mL去離子水，繼續加熱，直到消化管中的液體約剩2 mI。左右，取下放冷，然後轉移至lO mL試管中，再用去離子水沖洗消化管2～3次，並最終定容為10 mI。此為試樣溶液。樣品消化時，取與樣品相同量的混合酸按同上操作方法做試劑空白消化。

②測定：分別吸取0．5、1．0、2．O、4．O mI．的標准貯備液於四個100 mL容量瓶中，用O．5tool·I．叫HN03溶液稀釋至刻度，得濃度為o．5、1．O、2．0、4．O弘g·mI。1的標准工作液。在波長為248．3nm，儀器狹縫為0．2nm，燈位置、燈電流按儀器說明調至最佳狀態的條件下點火准備測定。首先測定標准系列工作液，繪制標准曲線，然後測定試劑空白液和樣品。

5．計算

6．說明

樣品處理要防止污染，所用器皿均應使用塑料或玻璃製品，使用的試管和器皿都應在使用前酸泡，並用去離子水沖洗干凈，乾燥後使用。樣品消化時注意酸不要燒干，以免發生危險。