結核科常用標本採集方法

Ⅰ 敘述結核桿菌的檢驗程序

結核桿菌與麻風桿菌是分枝桿菌屬中的主要病原菌。
結核桿菌菌體細長略帶彎曲，有分枝生長趨勢。菌體含脂量高，與其抗酸特性、抵抗力特性、致病性與免疫性等都有密切關系。該菌營養要求高，生長緩慢，形成「菜花狀」菌落。

一、結核桿菌檢驗程序
結核病人病灶中查到結核桿菌，是病原學診斷的重要依據，根據感染部位不同，可採集病人的痰、尿、糞便、腦脊液、胸腹水、胃液等，按以下程序進行檢驗。

二、結核桿菌培養特性
1. 液體培養基（蘇通氏培養基、小川培養基、血清酸性培養基等）結核桿菌生長表現：標本材料經前處理（即酸鹼處理，可液化標本，也可殺死雜菌，還可濃縮集菌）後接種液體培養基，35℃培養1-2周，由於表面生物，可在培養基表面表成污灰、乾燥、有皺褶的菌膜。
2. 固體培養基（改良羅氏培養基、丙酮酸鈉培養基等）結核桿菌生長表現：標本材料經前處理後，接種固體培養基，37℃培養2-4周，在培養基表面可形成乳白或米黃色、不透明、粗糙顆粒狀或節狀堆聚的菌落，呈現「菜花狀」。
3. 結核桿菌快速培養檢測方法：無菌手續將前處理後的材料塗片，置液體培養基中，35℃恆溫箱CO2培養箱內培養，3-5日後，每隔日取出一玻片，染色鏡檢，可快速獲得結果。

三、齊~尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色法
【原理】
結核桿菌對苯胺染料不易著色，若加溫或延長染色時間使其著色後，再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色，再經美蘭復染，結核桿菌及其他分枝桿菌仍呈紅色，而非抗酸菌和細胞雜質等呈藍色。
【材料】
1. 結核病人痰液：採取清晨第一口粘痰，或濃縮集落菌法處理過的痰標本。
2. 抗酸染色液
3. 載物玻片、玻片夾、酒精燈、臘筆等。
【方法】
1. 無菌手續採取痰液塗片，自然乾燥，火焰固定。
2. 用臘筆將塗面局部隔開，滴加石炭酸復紅染液，酒精燈上加熱至出現蒸氣。切勿沸騰，亦不可使染液乾涸。如有乾涸的趨勢，應及時補加染液。持續染色5-8分鍾，待冷後流水漂去多餘的染液。
3. 用3%鹽酸酒精清脫色，脫至塗面無色為止，約1-3分鍾，自來水沖洗。
4. 滴加呂氏美蘭染液復雜30秒~1分鍾，水洗。自然乾燥或吸干後油鏡檢查。
【結果】
1. 結核桿菌呈現細長，略有彎曲的紅色菌體，有的可表現出分枝特徵，有的菌體表現有多數濃染顆粒。結核桿菌大多分散排列，亦可以見到有縱行條索狀排列。
2. 塗片染色能查到結核桿菌者，一般需要每毫升痰液內含菌量至少應有500個以上，甚至需達到5萬以上。故材料多進行濃縮集菌處理，以提高檢出陽性率，也造成在染色標本片觀察中，不一定每個視野都能看到結核桿菌。
3. 結核桿菌易發生變異，在陳舊培養基或臨床治療後標本材料中，結核桿菌往往菌體斷裂，或形成非抗酸性革蘭氏陽性的短桿狀、球狀顆粒，亦稱Much顆粒。
4. 標本已經高壓滅菌處理，不影響染色結果，也保證操作者的安全。

四、熒光染色法
此系用金胺熒光素染擴酸性細菌的方法，簡便易行，但不具特異性。金胺染色法有多種、現列於後表，可選擇使用，應用熒光顯微鏡檢查結果。

五、結核桿菌毒力試驗——動物試驗法

【材料】
1. 動物：體重200~250克豚鼠2隻
2. 結核桿菌培養物或結核病人檢驗材料（痰、尿、糞、腹水等材料經濃縮集菌）
3. 注射器及消毒用材料等。
【方法】
1. 選取結核菌素試驗為陰性的豚鼠兩只。
2. 吸取結核桿菌懸液或病人檢材，注入豚鼠腹股溝皮下0.1ml
3. 注射後每周定期檢查一次，觀察豚鼠腹股溝淋巴結是否腫大，局部變硬，化膿及體重減輕、體溫升高等症狀。
4. 給豚鼠作結核菌素試驗，是否出現陽性結果。
5. 6周後，將豚鼠進行解剖，觀察淋巴結是否腫大，有無乾酪性病變，肝、脾、肺等是否腫大，表面有無灰白色結節病灶，取可疑病灶進行塗片染色鏡檢和分離培養。若為陽性結果，可報告「動物接種後××天查到有結核菌感染」。如無症狀及病變者，可報告為陰性。

六、結核桿菌濃縮集菌法（以處理痰標本為例）
【材料】
結核病人24小時痰液，細口瓶，0.02%酚紅液、汽油，NaOH，無菌生理鹽水等。
【方法】
(一)漂浮法：
1. 取24小時痰液15毫升，裝入細口瓶內，加入2倍量0.5%NaOH搖勻，高壓滅菌或煮沸20—30分鍾殺菌。
2. 待冷後加入汽油2毫升（二甲苯也可以），用力振盪20—30分鍾，用生理鹽水加至液面與瓶口齊，靜置半小時。
3. 取瓶口表面油狀物塗於載物玻片上，微微加熱，干後再加，如此重復5—6次，至厚度適宜，烘乾待冷，抗酸染色，油鏡頭檢查。

(二)沉澱法：
1. 取痰液1份或2倍量4%NaOH，高壓無菌或煮沸20—30分鍾後，加入0.02%酚紅指示劑0.1毫升，劇烈振盪混勻，亦可置37℃水浴消化30分鍾。
2. 矯正PH為7.0，3000轉/分離心30分鍾，棄去上清液。
3. 取沉澱物塗片染色鏡檢。若進行分離培養和動物接種，可免去高壓滅菌或煮沸的程序。

附錄：抗酸染液的配製
1. 石炭酸復紅液：稱取鹼性復紅4克，溶於95%酒精100毫升中成飽和液。再取飽和液10毫升與5%石炭酸溶液90毫升混勻即成。
2. 3%鹽酸酒精：取濃鹽酸3毫升，95%酒 97毫升混合。
3. 呂弗勒氏鹼性美蘭液：稱取美蘭2克，溶於95%酒精100毫升中，配成飽和液，取飽和液30毫升，再加入蒸餾水100毫升及10%氫氧化鉀水溶液0.1毫升即成。

Ⅱ 如何採集痰標本其注意事項是什麼

痰是病理產物，主要是肺、支氣管和氣管內的炎性分泌物。咳嗽的病人採集痰標本，主要目的是為了檢查，進行病原菌的鑒定，並有助於診斷和治療。
採集痰標本的方法是：①
一般檢查或培養標本採集法。具體做法是：留集清晨第一口痰，留痰前，囑病人先用貝朵爾氏液漱漱口，再以清水漱口，清除口腔內雜菌。然後，深吸氣用力咳嗽，咳出氣道深部痰液。將痰收集到無菌培養皿或小瓶內送檢，如檢查癌細胞，應立即送檢。②24小時痰標本採集法，為濃縮找結核菌或寄生蟲卵，備清潔帶蓋的留痰容器，貼以標簽，註明姓名、留痰日期、起止時間，囑病人將24小時的痰，全部吐入容器內，並勿將漱口水、唾液、嘔吐物、鼻咽分泌物等混入痰內，以免影響檢驗結果。以上兩種痰標本採集法，適用於年長兒或成年人，小兒咳嗽往往不會吐痰，而將痰液咽下，如需要做痰液的檢查，可抽取胃液來進行檢查，具體做法可參考肺結核篇章中在胃液中尋找結核菌一文。
贊

Ⅲ 微生物檢驗標本的正確採集及注意事項

微生物檢驗標本的正確採集及注意事項

正確採集臨床微生物標本，直接影響到微生物培養鑒定結果。可靠的檢驗結果可以指導臨床診斷治療，為臨床科學用葯和成功的感染控制提供依據，是正確、合理使用抗菌葯物，延緩細菌耐葯，減少抗菌葯物濫用和監測醫院感染的第一步，也是最重要的一步。下面是我為大家帶來的微生物檢驗標本的正確採集及注意事項的知識，歡迎閱讀。

一、 血液標本的採集

1、 採集方法

（1）75%酒精清潔局部皮膚。

（2）待皮膚干後，再用2%—2。5%碘酒從穿刺點中心部位開始消毒，范圍不應小於5cm（直徑），且不能用手指觸摸消毒後的皮膚。

（3）皮膚碘酒干後（約1min），穿刺採集血液，采血量成人5—10ml，嬰幼兒1—5ml。

（4）采血後立即在床旁接種培養瓶，並迅速輕搖，充分混勻防止凝固，但又不可劇震以防溶血。

2、注意事項

（1）懷疑菌血症應盡早采血，體溫上升（38。5℃）采血可提高陽性率，但也要防止因等待而延誤時機。

（2）對已經使用抗菌葯物，而又不能停葯者，也應在下次用葯前采血。切忌不要在靜滴抗菌葯物的靜脈處採取血標本，也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。

（3）培養基與血液之比以10：1為宜，以稀釋血液中的抗生素，抗體等殺菌物質;有人主張對接受抗菌葯物治療的病人，培養基與采血量之比可為20：1或大於這個比例。

（4）近年研究表明，將血液注入血培養基前，更換針頭反而易導致污染。

（5）每例至少採血兩次，間隔0。5—1h，以利於提高陽性率和區分感染菌與污染菌。

（6）疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人，以肘動脈或股動脈采血為宜，除在發熱期采血外，並要多次采血（24h 3—4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血後立即送檢，如不能立即送檢可置室溫，而不能放置冰箱。

（8）如臨床表現很似敗血症，而血培養多次陰性者，提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的採集

1、採集方法

在病灶部位或髂前（後）上脊處嚴格消毒後抽取骨髓1ml，注入血培養瓶內。

2、注意事項

（1）骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞，因而骨髓培養對傷寒病人的.診斷較血培養優越。

（2）用於懷疑細菌性骨髓炎病人。

三、靜脈導管標本的採集

1、採集方法

（1）常規導管部位皮膚消毒。

（2）無菌方法從病人體內拔出靜脈導管，剪下導管尖端5cm，放入無菌瓶中。

（3）立即（15min內）送檢，避免標本乾燥。

2、注意事項

（1）剪下的導管立即接種血平皿，可提高陽性率。

（2）肉湯反復沖洗導管腔內，沖洗液做定量培養。

（3）有人將剪下的導管置肉湯增菌液或培養瓶中，此法不能區分導管感染菌與少量定植菌。

（4）衛生部在《醫學感染診斷標准》（試行）（2001年1月3日施行）中規定：導管管尖培養其接種方法應取導管尖端5cm，在血平板表面往返滾動一次。細菌≥15cfu/平板，即為陽性。

四、呼吸道

1、痰標本

（1）採集方法

①清晨起床後用涼開水漱口多次，以除去口腔內大量雜菌，用力咳出肺深部的膿痰，置於清潔乾燥容器中送檢。

②痰量極少者可用45℃ 3%—10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對於咯痰量少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，當其咯痰後用無菌棉棒採集標本。

③咳嗽無力或昏迷病人，可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。

④氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。

⑤可用支氣管鏡直接在病灶部位採集高濃度的病原菌。

⑥用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內，緩慢注入無菌蒸餾水5ml，取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液，放入無菌容器中送檢。

⑦胃內采痰法。無自覺症狀的結核病人。有時可把痰誤咽入胃內，因而可採用胃內溶物做結核菌培養，其陽性結果比咯痰高10%左右，該方法於晨起空腹時，把滅菌的胃管，從鼻腔送入胃內，用20ml注射器抽取胃液。

（2）注意事項

①痰標本的採集以晨痰為准，此時患者痰量較多且含菌量也多。

②標本採集後立即送檢，若不能及時送檢者，可暫存2—8℃冰箱。若晚1—2h接種，會失去苛氧菌，並使得革蘭陰性菌過分生長。

③可接受的標本：痰;支氣管灌洗液，支氣管刷，支氣管活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本：唾液;24h留的痰（結核桿菌培養除外）;拭子。

④ 痰標本的質量評價：（用顯微鏡篩選）在低倍鏡下，檢查鱗狀上皮細胞，至少10個視野，集中在有白細胞處，合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大於2：1。

2、鼻拭子

（1）用濕的拭子（生理鹽水）;

（2）需插兩個鼻孔;

（3）深入3。3cm左右，轉動4—5次;

（4）以上用於診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。

3、咽拭子、口腔拭子

（1）採集方法（到細菌室取專用拭子）

①患者清水漱口後，由檢查者將其舌外拉，用棉拭子將咽後壁或懸雍垂的後側反復擦拭數次;

②化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時，直接用棉拭子在病灶部位擦拭;

③插入運送培養基中立即送檢，防止乾燥。

（2）注意事項

①棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液;

②採集標本前數小時不可用消毒葯物漱口或接觸病灶局部。

五、胃腸道

1、糞便

（1）採集方法

選取膿血、黏液糞便2—3g，液體糞便取絮狀物1—2ml。盛於滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。

（2）注意事項

①標本要採集新鮮的，陳舊標本影響陽性檢出率;

②切忌糞尿混合;

③若要分離阿米巴，標本要立即送檢並注意保溫;

④運送培養基可提高陽性率;

⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便;

⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便;

⑦標本在病理早期或治療前採集;

⑧一般認為用抗菌葯三天後，標本培養病原菌陰性。

2、肛拭子

在無法獲得糞便的情況下，可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4—5cm（幼兒2—3cm）處，輕輕旋轉擦取直腸表面黏液後取出，置運送培養基中送檢。

六、泌尿道

根據衛生部《醫學感染診斷標准》（試行）通知，泌尿系統臨床診斷為：患者出現尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激症狀，或有下腹觸痛、腎區叩痛、伴或不伴發熱，並具有下列情況之一：

（1）尿檢白細胞男性≥5個/高倍視野，女性≥10個/高倍視野，插導尿管患者應結合尿培養;

（2）臨床已診斷為泌尿道感染，或抗菌治療有效而認定的泌尿道感染。

1、中段尿

（1）採集方法

①女性 采樣前用肥皂水或0。1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰，用手指陰x分開排尿，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml於滅菌容器內。

②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口，滅菌紗布擦乾，上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml於滅菌容器內。

（2）注意事項

①導尿雖然可以減少污染，但是多次重復導尿可以造成逆行性感染，因此近年來大多採用中段尿。

②女性病人最好採取膀胱截石位由護士採取標本，減少污染。

③採集標本以晨起第一次尿液為佳。

④採集標本後，若不能在1h內送檢，暫放4℃冰箱，但不能超過8h。若尿液標本在室溫下放置超過2h，即使接種培養結果細菌數≥104 cfu/ml獲103cfu/ml，也不能作為診斷依據，應重新留取標本送檢。

⑤疑為尿道炎時可將最初3—4ml尿液收集在滅菌容器內。該尿中即使有少數細菌，如反復檢查為同一細菌，也應考慮為病原菌。

⑥兒童在多數情況下，僅沖洗外陰是不夠的，故採集標本較為困難。如果尿內細菌明顯增多，可以高度懷疑為尿路感染，無菌則可否定。

⑦若細菌培養結果為兩種或兩種以上細菌，需考慮污染可能，建議重新留取標本送檢。

⑧尿液中不得加入防腐劑，消毒劑否則影響陽性檢出率。

2、膀胱穿刺採集法

避免污染是很困難的，培養結果與病情不符時，或尿厭氧菌培養，或嬰幼兒中段尿採集困難時，可以用恥骨上穿刺膀胱內采尿。

3、留置導尿者採集法

拔去閉式引流的集尿袋，棄去導尿管前段尿液，留無污染的膀胱內尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標本。

七、腦脊液

1、採集方法

由臨床醫師以無菌方法收集腦脊液3—5ml（細菌1ml，真菌2ml抗酸桿菌2ml，病毒1ml）盛於無菌試管或小瓶中立即送檢。

2、注意事項

（1）採集標本後立即送檢，因腦膜炎奈瑟菌離體後迅速自溶，肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡;

（2）疑為上述細菌感染時，應注意保溫，不可置冰箱或低溫保存。

八、膽汁

1、十二指腸引流法

在無菌操作下，將十二指腸導管吞咽至十二指腸乳頭部（距齒65—70cm）時，收集A液（來自總膽管，為橙黃或金黃色），隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml，經1—2min後再採取B液（來自膽囊，為棕黃綠色），隨後收取C液（來自肝膽管，為檸檬色），一般認為B液做細菌培養意義較大。

2、膽囊穿刺法

膽囊造影術時，可同時採取膽汁。

3手術採取法

由總膽管、膽囊直接穿刺採取膽汁。

以上採集之標本應立即送檢，否則置於4℃冰箱內，採集時需小心，避免被唾液、十二指腸液細菌污染。

九、穿刺液標本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液。

1、採集方法

由臨床醫師行穿刺術抽取。胸腹水可收集5—10ml，心包液、關節液收集2—5ml，置於無菌含抗凝劑的試管或小瓶中，充分混勻後，立即送檢。抗凝劑10%EDTA二鈉鹽，標本與抗凝劑之比10：1。

2、注意事項

⑴標本採集應在患者用葯之前或停止用葯1—2天後進行;

⑵不能立即送檢可置4℃冰箱保存;

⑶疑為淋病性關節炎患者的關節液，採集後立即送檢，或床旁培養為佳;

⑷不能用棉拭子浸蘸標本送檢。

十、膿汁及病灶分泌物

1、傷口

⑴表面傷口拭子採集方法及注意事項

① 僅限於皮膚與皮下組織，包括手術切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。

②用無菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液;

③用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢;

④採集褥瘡潰瘍標本時應採集褥瘡邊緣的膿性分泌物，拭子放在運送培養基中立即送檢，不要採集創口表面的滲液。

⑵傷口、膿腫、竇道、壞疽組織採集方法及注意事項

①閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚後，用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢，疑為厭氧菌感染時，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;

②傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手術切除獲得深處傷口標本;

③當創傷出血時，敷有葯物在2h以內及燒傷在12h內均不應採集標本，此時獲得陽性結果機會甚少。

④採集標本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等。可為培養鑒定提供依據。

⑶燒傷創面

①燒傷創面需要膿性分泌物，焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色，燒傷邊緣水腫。患者發燒>38℃或低體溫<36℃，合並低血壓。

②用無菌生理鹽水沖洗傷口創面。

③由於創面部位不同，細菌種類也不盡相同，要用滅菌棉拭子採集多個部位的炎症區送檢。

④採集痂下變黑或變性的不健康區邊緣或引流液等做定量培養及組織活檢。

2、厭氧傷口拭子

⑴厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;

⑵可用注射器抽吸，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;

⑶立即送檢，送檢過程中必須保持在無氧條件;

⑷不宜做厭氧菌培養的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結腸造瘺術的流出物，胃、小腸及大腸內容物等。

3、尿道口分泌物拭子

⑴男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口，然後採取從尿道口溢出的膿性分泌物;

⑵採集前列腺液時，先將尿道、膀胱沖洗，然後從肛門用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出;

⑶女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細擦拭或清洗尿道口，然後從陰道內診壓迫尿道，使分泌物溢出;

⑷取子宮頸分泌物，先用內窺鏡擴張陰道，然後從宮頸口用滅菌棉拭子採取分泌物，盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。

4、蜂窩織炎

⑴用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚;

⑵用細針在炎症最顯著處穿刺吸引;

⑶抽少量滅菌生理鹽水在針管內;

⑷注入無菌試管內送檢。

5、組織標本

⑴活體組織採取的微量標本，可直接接種在培養基內;

⑵表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀颳去;

⑶較大組織塊的表面可採用燒灼或浸入沸水中5—10s，然後用滅菌剪刀切開，取其中的膿汁;

⑷深部組織標本可經皮膚穿刺或手術切取送檢;

⑸組織標本不可用福爾馬x固定;

⑹有時也可將沾有膿汁的最內層敷料放入無菌平皿內送檢。

十一、眼標本採集

⑴一般細菌，以無菌棉拭子採集眼分泌物，尤其膿性分泌物;

⑵沙眼衣原體，首先擦去眼結膜上面的分泌物，然後用無菌小刀刮取穹窿部及眼結膜上皮細胞，用鏈黴素處理後備用;

⑶對於剛治療或葯物沖洗過的患者最好12—24h後採集標本;

⑷對於淚囊炎患者可稍加擠壓後以無菌棉拭子採集標本。

;

Ⅳ 肺結核的診斷方法有哪些

1．病史和症狀體征

（1）症狀體征情況：肺結核患者的症狀一般沒有特異性，但明確症狀的發展過程對結核病診斷有重要參考意義。體征對肺結核的診斷意義有限。

（2）診斷治療過程：確定患者是新發現還是已發現病例。不少肺結核患者首次就診多在綜合醫院，且接受治療，應記錄首次診斷情況特別是痰排菌情況、用葯品種、用葯量和時間、堅持規律用葯情況等，這對將來確定治療方案有重要價值。如果是復發患者，治療史對判斷耐葯情況有參考意義。

（3）肺結核接觸史：主要是家庭內部接觸史，對鄰居、同事、宿舍等有無肺結核患者也應了解。記錄接觸患者的病情、排菌情況、治療方案和用葯規律情況、接觸時間、接觸密切程度等。

2．影像學診斷

胸部X 線檢查是診斷肺結核的重要方法，可以發現早期輕微的結核病變，確定病變范圍、部位、形態、密度、與周圍組織的關系、病變陰影的伴隨影像；判斷病變性質、有無活動性、有無空洞、空洞大小和洞壁特點等。肺結核病影像特點是病變多發生在上葉的尖後段和下葉的背段，密度不均勻、邊緣較清楚和變化較慢，易形成空洞和播散病灶。診斷最常用的攝影方法是正、側位胸片，常能將心影、肺門、血管、縱隔等遮掩的病變以及中葉和舌葉的病變顯示清晰。

CT 能提供橫斷面的圖像，減少重疊影像，易發現隱蔽的病變而減少微小病變的漏診；比普通胸片更早期顯示微小的粟粒結節；能清晰顯示各型肺結核病變特點和性質，與支氣管關系，有無空洞，以及進展惡化和吸收好轉的變化；能准確顯示縱隔淋巴結有無腫大。

常用於對肺結核的診斷以及與其他胸部疾病的鑒別診斷，也可用於引導穿刺、引流和介入性治療等。

3．痰結核分枝桿菌檢查

確診肺結核病的主要方法，也是制訂化療方案和考核治療效果的主要依據。每一個有肺結核可疑症狀或肺部有異常陰影的患者都必須查痰。

（1）痰標本的收集：肺結核患者的排菌具有間斷性和不均勻性的特點，傳染性患者查一次痰也許查不出，所以要多次查痰。菌陽患者1 個痰標本塗片檢查約80% 陽性，2 個痰標本塗片檢查約90%陽性，3 個痰標本塗片檢查約95% 陽性。通常初診患者要送三份痰標本，包括清晨痰、夜間痰和即時痰，如無夜間痰，宜在留清晨痰後2 ～ 3 小時再留一份痰標本。復診患者每次送兩份痰標本。無痰患者可採用痰誘導技術獲取痰標本。

（2）痰塗片檢查：簡單、快速、易行和可靠的方法，但欠敏感。

每毫升痰中至少含5000 ～ 10000 個細菌時可呈陽性結果。常採用的是齊－尼氏染色法。痰塗片檢查陽性只能說明痰中含有抗酸桿菌，不能區分是結核分枝桿菌還是非結核性分枝桿菌，由於非結核性分枝桿菌少，故痰中檢出抗酸桿菌有極重要的意義。

（3）培養法：結核分枝桿菌培養為痰結核分枝桿菌檢查提供准確可靠的結果，常作為結核病診斷的金標准。同時也為葯物敏感性測定和菌種鑒定提供菌株。結核分枝桿菌培養費時較長，一般為2 ～ 6周，陽性結果隨時報告，培養至8 周仍未生長者報告陰性。常用的培養方法為改良羅氏法和小川法。近期採用測定細菌代謝產物的BACTEC TB460 或BACTEC MGIT 960 法，約2 周左右可獲得結果。

（4）葯物敏感性測定：主要為臨床耐葯病例的診斷、制定合理的化療方案以及流行病學監測提供依據。

（5）其他檢測技術：如聚合酶鏈式反應（PCR）、核酸探針檢測特異性DNA 片段、色譜技術檢測結核硬脂酸和分枝菌酸等菌體特異成分以及採用免疫學方法檢測特異性抗原和抗體等，使結核病快速診斷取得一些進展，但這些方法仍在研究階段，尚需改進和完善。

4．纖維支氣管鏡檢查

纖維支氣管鏡檢查常應用於支氣管結核和淋巴結支氣管炎的診斷，支氣管結核表現為黏膜充血、潰瘍、糜爛、組織增生、形成瘢痕和支氣管狹窄，可以在病灶部位鉗取活體組織進行病理學檢查、結核分枝桿菌培養。對於肺內結核病灶，可以採集分泌物或沖洗液標本做病原體檢查，也可以經支氣管肺活檢獲取標本檢查。

5．結核菌素試驗

廣泛應用於檢出結核分枝桿菌的感染，而非檢出結核病。結核菌素試驗對兒童、少年和青年的結核病診斷有參考意義。由於許多國家和地區廣泛推行卡介苗接種，結核菌素試驗陽性不能區分是結核分枝桿菌的自然感染還是卡介苗接種的免疫反應。因此，在卡介苗普遍接種的地區，結核菌素試驗對檢出結核分枝桿菌感染受到很大限制。目前世界衛生組織和國際防癆和肺病聯合會推薦使用的結核菌素為純蛋白衍化物（purified protein derivative，PPD）PPDRT23，以便於國際結核感染率的比較。

結核菌素試驗選擇左側前臂曲側中上部l/3 處，0.lml（5IU）皮內注射，試驗後48 ～ 72 小時觀察和記錄結果，手指輕摸硬結邊緣，測量硬結的橫徑和縱徑，得出平均直徑=（橫徑＋縱徑）/2，而不是測量紅暈直徑，硬結為特異性變態反應，而紅暈為非特異性反應。

硬結直徑≤ 4mm 為陰性，5 ～ 9mm 為弱陽性，10 ～ 19mm 為陽性，≥ 20 或雖＜ 20mm 但局部出現水泡和淋巴管炎為強陽性反應。結核菌素試驗反應愈強，對結核病的診斷，特別是對嬰幼兒的結核病診斷愈重要。凡是陰性反應結果的兒童，一般來說，表明沒有受過結核分枝桿菌的感染，可以排除結核病。但在某些情況下，也不能完全排除結核病，因為結核菌素試驗可受許多因素影響，結核分枝桿菌感染後需4 ～ 8 周才建立充分變態反應，在此之前，結核菌素試驗可呈陰性；營養不良、HIV 感染、麻疹、水痘、癌症、嚴重的細菌感染包括重症結核病如粟粒性結核病和結核性腦膜炎等，結核菌素試驗結果則多為陰性和弱陽性。

Ⅳ 尿液標本的採集和處理方法及流程

尿液標本的採集和處理方法及流程

尿液的細菌培養，真菌培養、結核菌培養、真菌塗片、結核菌塗片。下面是我為大家帶來的尿液標本的採集和處理方法及流程，歡迎閱讀。

一、檢查項目

尿液的細菌培養，真菌培養、結核菌培養、真菌塗片、結核菌塗片。

二、標本採集

【標本採集前的注意事項】

應在抗生素應用前或停葯一周後採集標本，如不能停用抗生素，應於下次抗生素應用前採集。

【標本送檢指征】

1.有典型的尿路感染症狀;

2.肉眼膿尿或血尿;

3.尿常規檢查表現為白細胞和/或亞硝酸鹽陽性;

4.不明原因的發熱，無其他局部症狀;

5.留置導尿管的病人出現發熱;

6.膀胱排空功能受損;

7.泌尿系統疾病手術前。

【標本採集容器】

無菌試管或無菌尿液標本留取容器。

【標本的採集方法】

1.清潔中段尿標本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床後用肥皂水清洗會陰部，女性應用手分開大陰唇，男性應翻上包皮，仔細清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml於無菌容器中，立即送檢，於一小時內接種。該方法簡單、易行，是最常用的`尿培養標本收集方法，但很容易受到會陰部細菌污染，應由醫護人員採集或在醫護人員指導下由患者正確留取。

2.恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經皮穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內細菌感染的“金標准”方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用於厭氧菌培養或留取標本困難的嬰兒尿標本的採集。

3.直接導尿：按常規方法對會陰部進行清洗消毒後，用導尿管直接經尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。可減少尿液標本的污染，准確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細菌引入膀胱，導致繼發感染，一般不提倡使用。

4.小兒收集包：對於無控制能力的小兒可應用收集包收集尿液，這種裝置由於很難避免會陰部菌群污染產生假陽性，所以只有在檢驗結果為陰性時才有意義。如果檢驗結果為陽性，應結合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或導尿法留取尿液進行復查。

5.留置導尿管收集尿液：利用留置導尿管採集標本時，應先消毒導尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導尿管吸取尿液，操作時應防止混入消毒劑，不能從收集袋中採集尿液。長期留置導尿患者，應在更換新尿管時留取尿標本。

【標本採集注意事項】

一般於晨起第一次尿液送檢。應選在抗菌葯物應用之前。

標本運送過程中必須保證其安全，防止溢出，避免細菌污染。

;

Ⅵ 如何正確留取痰培養標本

可以用無吸水性的商品化專用塑料盒或內層塗蠟紙盒，室溫下2小時，冷藏2~4小時之內就要把痰液送到檢驗室。

採集痰液標本，看似比較容易，但是要取得真正合格的痰液標本並不是一蹴而就，真正的痰液是指氣管、支氣管的分泌物或肺泡內的滲出物，而不是口腔內的唾液或者是鼻咽部的分泌物等等。

一般採用自然咳痰法，病人早晨起床之後先漱口，用力從呼吸道深部咳出一到兩口痰，用干凈的容器立即送檢。用於特殊檢驗的痰液標本採集方法：細胞學檢查，取上午九到十點新鮮痰液。查找結核分枝桿菌，留取24小時的痰。

(6)結核科常用標本採集方法擴展閱讀：

痰培養標本介紹如下：

取痰比較困難的，用特殊的方法取痰，或在鼻咽部直接刮取標本。痰液檢查主要是用於呼吸道炎症和感染，還有腫瘤的診斷。痰脫落細胞學檢查是診斷肺癌最簡單、易行的方法，尤其是不能耐受纖維支氣管鏡檢查和不能行手術治療的患者。

對疾病的診斷和指導用葯具有重要意義。痰標本質量直接影響結果的准確性，陽性檢出率受腫瘤分期、分型、送檢次數、留痰質量和製片質量等多種因素影響。

Ⅶ 目前實驗室對於結核病的實驗方法有哪些

1. 結核菌素試驗 目前全球均推行純蛋白衍生物(PPD)，廣泛應用於流行病學調查，輔助診斷和鑒別診斷，監測卡介苗接種質量和發現患者和選擇預防性治療對象。採用皮內法，72h檢查反應，測量局部硬結反應的橫徑和豎徑，按測得的實際大小記錄，並註明水泡、丘疹等反應。結核菌素試驗陰性(<5mm)表示未受結核菌感染外，還應該注意影響因素，除病變反應前期，技術因素外，年老體衰、營養不良、病毒性疾病、晚期腫瘤、艾滋病、免疫抑制劑等均能影響結核菌素的反應，使其呈陰性。
2. 塗片鏡檢法 是發現傳染源，確診結核病、確定化療方案和考核治療效果的最重要依據，診斷前應3次痰標本塗片查抗酸桿菌。盡量取支氣管深部的痰，量不少於3ml。缺點是敏感性較低，如每ml含的菌量少於104則難以獲得陽性，而且不能區分死菌、活菌，也不能區分非結核抗酸桿菌。
3. 細菌培養法 可克服塗片鏡檢法的缺點，但常規培養方法需2-8周才有結果。快速法可縮短報告時間，但條件要求較高。
4. 其他 血常規通常無改變，嚴重病例可繼發貧血，白細胞總數減少，活動、進展肺結核的部分病人血沉增快，但無特異性診斷意義，血清抗結核抗體檢測對診斷僅有參考價值。

Ⅷ 結核分枝桿菌提取過程操作步驟

標本標本的選擇根據感染部位。可取痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應部位分泌液或組織細胞。
直接塗片鏡檢標本直接塗片或集菌後塗片，用抗酸染色。若找到抗酸陽性菌即可初步診斷。抗酸染色一般用ziehl-neelsen法。為加強染色，可用ik(intensified kinyoun)法染色。將石炭酸復紅染色過夜，用0.5% 鹽酸乙醇脫色30s，則包括大多結核分枝桿菌l型也可著色。為提高鏡檢敏感性，也可用金胺染色，在熒光顯微鏡下結核分枝桿菌呈顯金黃色熒光。
濃縮集菌先集菌後檢查，可提高檢出率。培養與動物試驗也必須經集菌過程以除去雜菌。腦脊液和胸、腹水無雜菌，可直接離心沉澱集菌。痰、支氣管灌洗液、尿、糞等污染標本需經4% naoh（痰和鹼的比例為1:4,尿、支氣管灌洗液和鹼的比例為1:1）處理15min，時間過長易使結核分枝桿菌l型與非結核分枝桿菌死亡。尿標本先加5% 鞣酸、5% 乙酸各0.5ml於錐形量筒內靜置，取沉澱物處理。處理後的材料再離心沉澱。取沉澱物作塗片染色鏡檢。若需進一步作培養或動物接種，應先用酸中和後再離心沉澱。
分離培養將經中和集菌材料接種於固體培養基，器皿口加橡皮塞於37℃培養，每周觀察1次。結核分枝桿菌生長緩慢，一般需2～4周長成肉眼可見的落菌。液體培養可將集菌材料滴加於含血清的培養液，則可於1～2周在管底見有顆粒生長。取沉澱物作塗片，能快速獲得結果，並可進一步作生化、葯敏等測定和區分結核分枝桿菌與非結核分枝桿菌。國內學者已證明結核分枝桿菌l型可存在於血細胞內或粘附於細胞表面。這種患者往往血沉加快，用低滲鹽水溶血後立即接種高滲結核分枝桿菌l型培養基能提高培養陽性率。
動物試驗將集菌後的材料注射於豚鼠腹股溝皮下，3～4周後若局部淋巴結腫大，結核菌素試驗陽轉，即可進行解剖。觀察肺、肝、淋巴結等器官有無結核病變，並作形態、培養等檢查。若6～8周仍不見發病，也應進行解剖檢查。
快速診斷一般塗片檢查菌數需5x103～4/ml,培養需1x102/ml,標本中菌數少於此數時不易獲得陽性結果，且培養需時較長。目前已將多聚酶鏈反應（pcr）擴增技術應用於結核分枝桿菌dna鑒定，每ml中只需含幾個細菌即可獲得陽性，且1?2d得出結果。操作中需注意實驗器材的污染問題，以免出現假陽性。又細菌l型由於缺壁並有代償性細胞膜增厚，而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂釋出dna，以致造成pcr假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細胞破裂後，則可出現陽性。目前有條件的單位使用bactec法，以含14c棕櫚酸作碳源底物的7h12培養基，測量在細菌代謝過程中所產生的14c量推算出標本中是否有抗酸桿菌，5～7d就可出報告。

Ⅸ 肺結核患者為什麼要作痰液檢查、如何正確留取痰標本

(一)為什麼要作痰液檢查？當你懷疑有肺結核就診時，首先要進行胸部透視，醫生若發現你的肺內有異常陰影，就會給你作痰液檢查。查痰，就是用顯微鏡查找結核桿菌，痰內一旦發現結核菌，肺結核的診斷便可確定，查痰是診斷肺結核，發現傳染源最准確的方法。另外，病人在治療過程中醫生也會要求你定期查痰，用以考核和評價治療效果。痰菌陽性病人療程結束後，連續三次查痰陰性為肺結核治癒。 查痰如此重要，因此病人還應掌握正確的留痰方法，否則將會直接影響痰檢結果。正確的留痰方法是，在留痰之前先用清水漱口數次，以清除口腔內的食物殘渣及部分雜菌。留取的痰應是用力咳嗽後自氣管內咳出的痰，然後盛於痰盒內送檢。不要將唾液或鼻涕吐入痰盒，以免影響查痰結果。 初次就診需查痰者，醫生要求送三個痰標本：即時痰：就診當時咳出的痰；夜間痰：前一天晚間咳出的痰；清晨痰：起床後深咳吐出的痰，其中以清晨第一次咳出的痰效果最好。

Ⅹ 結核菌塗片檢查用什麼做標本

這需要根據臨床的實際需要進行標本採集。
例如，最常見的肺結核，那麼可能採集的標本就是痰液，或者支氣管刷檢物等；如果懷疑腸結核那麼可能用的是糞便；關節結核可能採集的是關節液；結核菌入侵中樞神經則可以採集腦脊液，等等。