1. 動物組織加了裂解液要冰上裂解嗎
裂解液不需要冰上裂解。
RIPA主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用於常規的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種，根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。
關於不同的RIPA裂解液以及我們生產的其它裂解液的主要特點和差異，以及如何選擇裂解液可參考附錄。
2. 細胞裂解液怎麼配製
裂解細胞的話：
新鮮配製冷的 RIPA 裂解緩沖液:
先配150 mM NaCL
+ 1% NP-40 (去垢劑) + 0.1% SDS (去垢劑)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)或1 mM PMSF (蛋白酶抑制劑)+1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制劑)+1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制劑)
以上所有試劑均按比例溶於150 mM NaCL溶液中，冰上操作。
裂解細菌就簡單多了，用鹼裂解法
3. 組織ripa必須按比例加嗎
裂解30min後4度冷凍高速離心20min,棄沉澱,上清按比例加入5Xloading buffer沸水煮15min,即可上樣,或-20度保存,用的時候沸水煮5min就行
4. 有了ripa裂解液怎麼提取蛋白
不太推薦
從提取蛋白自身的角度來考慮，ripa裂解液可以使蛋白質的空間結構破壞，即破壞蛋白質分子的二級和三級結構，從而使抗原決定簇得以充分暴露在外，更有利於被檢測出來；
而從試劑盒本身的角度來考慮，以雙抗體夾心法為例，提取的蛋白中含有ripa裂解液，當加入到包被的孔板當中時，可能同樣會對孔板中的包被的抗體起到了裂解作用（如sds），從而使其失去該有的特異性，這方面可能需要考慮在內的
5. ripa裂解液解凍可以放水浴嗎
不能。不能使用水浴，RIPA裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用於常規Western，IP等。RIPA裂解液的配方有很多種，根據其裂解液的強度大致可以分為強，中，弱三類。
6. 細胞裂解液怎麼配製
裂解細胞的話：
新鮮配製冷的 RIPA 裂解緩沖液:
先配150 mM NaCL
+ 1% NP-40 (去垢劑) + 0.1% SDS (去垢劑)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)或1 mM PMSF (蛋白酶抑制劑)+1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制劑)+1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制劑)
以上所有試劑均按比例溶於150 mM NaCL溶液中,冰上操作.
裂解細菌就簡單多了,用鹼裂解法
7. 請問細胞裂解液如何配製，謝謝了先！
博凌科為生物科技-為你解答：一、試劑准備1、新鮮配製冷的 RIPA 裂解緩沖液:150 mM NaCL1% NP-40 (去垢劑) 0.1% SDS (去垢劑)2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)1 mM PMSF (蛋白酶抑制劑)1.5 mM EDTA (蛋白酶抑制劑)1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制劑)(任選)以上所有試劑均按比例溶於150 mM NaCL溶液中。2、冷的PBS 中加入 1 mM PMSF1.5 mM EDTA1mM NaVanadate （釩酸鈉）(任選)3、對數期生長狀態佳的細胞，75cm至少3-4瓶（90%以上生長面積）。二、實驗步驟1、將長滿細胞的培養瓶放置在冰上， 用吸液管吸出培養液。加入足夠的冷的 PBS在培養瓶中充分洗滌細胞表面，以洗去瓶中殘留的培養基，倒掉PBS ，重復以上操作2-3遍。在最後一次洗滌中盡可能吸干殘留的PBS，盡量在冰上操作。2、 向培養瓶中加入冷的RIPA 裂解緩沖液 (每75cm2 培養瓶加1ml). 然後用細胞刮子沿著瓶壁開始刮細胞，如果所需要刮的同種細胞有多瓶，則將第一瓶刮下的細胞液吸出轉入下一瓶中繼續刮 (由於處理後的細胞裂解液較粘稠，所以宜用直徑大點的吸液管吸取)。3、 吸出刮好的細胞裂解液置於14ml 離心管中 （置於冰上），然後重復步驟2以刮取剩下的細胞。4、 盡可能將多的細胞裂解液收集到14ml的離心管中，樣品插入冰盒進行超聲，超聲強度以不產生泡沫為准，超聲每次2-3秒，重復3-4次。如仍有細胞碎片或沉澱，應離心10000rpm,10分鍾，留取上清。5、 取出小量細胞裂解液測其蛋白濃度（用Biorad Bradford 試劑盒或紫外分光光度計，在A280測定），分裝保存在 -70℃。
8. RIPA裂解液(強)怎麼融解,應該在多少溫度下融解
一般都是室溫溶解的啊，你實在不放心的話用之前早點放4度吧