比色計的使用方法

1. 分光光度計調零的正確詳細步驟

分光光度計應如何調零？具體步驟如下：

1、首先在使用紫外分光光度計前，用戶應先了解儀器的結構和工作原理，以及各個操作旋鈕的功能。在未接通電源前，應對儀器進行檢查，電源線接線應牢固，通地要良好，各個調節旋鈕的起始位置要正確，然後接通電源開關。

2、開啟電源，指示燈亮，選擇開關置於「T」 ，波長調至測試用波長。儀器預熱30 分鍾。

3、打開試樣室蓋，調節「0」旋鈕，使數字顯示為「0。00」蓋上試樣室蓋，將比色皿架處於蒸餾水校正位置，使光電管受光，調節透過率「100％」旋鈕，使字顯示為「100。0」

4、預熱後，按（3）連續幾次調整「0」和「100％」，紫外分光光度計即可進行測定工作。

5、吸光度的測量：按（3）調整儀器的「00.0」和「100％」後，將選擇開關置於「A」，調節吸光度調零旋鈕，使數字顯示為「000」 ，然後將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。

拓展資料

分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復雜的光，分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200～380 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可採用不同的發光體作為儀器的光源。鎢燈的發射光譜：鎢燈光源所發出的380～780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射後，可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：(1)200～380nm的紫外光區，(2)380～780nm的可見光區，(3)2.5～25μm（按波數計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和准確度，所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定，定期進行校正檢定。

2. 可否使用比色計或分光光度計測定濁度

濁度也可以利用比色計或分光光度計等儀器，通過測定光線照射樣品時由濁度引起的透射損失而進行估測。但是，這種測定方法不被相應的管理機構認可，其測得的濁度也不符合美國公共衛生組織(APHA)對濁度的定義。
能見度測定的結果也會由於色度對光的吸收或顆粒物質對光的吸收等干擾的存在而不夠准確。而且，能見度測定方法與濁度計測定方法之間沒有任何相關關系。不過，色度計和分光光度計有時可用來檢測濁度的大幅度變化或用於過程式控制制。
真正的濁度測定必須使用濁度計。

3. 有什麼比色方法

第二節 比色分析測量儀器和測量方法

比色分析法通過比較溶液對光的吸收程度以測定物質的含量。

一、比色測量儀器

（一）比色測量儀器的基本部件

比色測量儀器一般包括以下五大部件（圖8-4）。

圖8-4 比色測量儀器部件示意圖

1．光源

在光電比色計和可見光分光光度計中，採用6～12v的鎢燈，其最適宜的波長范圍是360～1000nm，為使光的強度穩定，須用穩壓裝置來穩定電壓。

2．波長控制器

在光電比色計中採用濾光片作為波長控制器。濾光片是有色玻璃片，其作用是從光源發出的連續光譜中分出實驗所需的某一特定波長范圍的光，即獲得適當波長的近似單色光。

選擇濾光片的原則是濾光片最易透過的光，也就是溶液最易吸收的光。即濾光片的顏色與溶液的顏色應互為補色，這是因為有色溶液對它的互補色光有最大的吸收。581-g型光電比色計通常只有紅、綠和藍三塊濾光片。例如，要測定kmno4溶液，就應選用綠色濾光片。

分光光度計採用單色器來控制波長。它可以把連續波長的光分解，從中得出任一所需波長的更純的單色光。單色器包含有狹縫調節、透鏡系統以及色散元件。

圖8-5為自準式單色光器。光源發出的光經入射狹縫由凹 面準直鏡反射後的平行光投在棱鏡上，經棱鏡色散後的光又經準直鏡反射到出射 狹縫，轉動棱鏡便可在出射狹縫得到所需波長的單色光。

圖8-5 自準式單色光器示意圖

圖8-6 硒光電效應示意圖

3．吸收池

吸收池供比色時盛溶液用，它是用無色透明、厚度均勻的玻璃製成的。其透光的兩面嚴格平行。同一系列的測定中，所用的比色皿必須配套，即同一配套比色皿盛有同一溶液在同一波長時測得的透光率誤差不得越過0.5%。實驗時可根據溶液的濃度不同選擇。0.5,1.0,2.0,3.0cm不同規格的比色皿。比色皿要保持清潔，透光面要注意保護，不得用手直接接觸或用粗糙的濾紙擦拭，以免劃傷表面，影響吸收程度。若外壁有液珠，應用濾紙吸干後再用擦鏡紙擦凈。

4．光電轉換器

它是將光能轉換成電信號的器件，常用的有光電池和光電管。

光電池 常用的硒光電池如圖8-6，適用 於380～750nm波長范圍。當光線照射到光電池時，電子從半導體表面逸出。由於硒的半導體特性而在電路中產生光電流。將光電池與一個靈敏檢流計相聯，在照射光強度不太大且外電路電陰很小時，光電流大小與照射光的強度成正比。因此可根據光電流的大小測量透過溶液的光強度。

硒光電池的優點是光電流較大，可不必經過放大而直接用靈敏檢流計測量。有時當光電池受強光照射或連續使用時間太長時，容易產生「疲勞」，這時需使其在暗的狀態下暫作恢復，方可繼續使用。

光電管 由封裝在真空透明管中的一個半圓柱型陰極和一個絲狀陽極組成（圖8-7）。陰極凹面有光電發射材料層，被光照射可發電子。當兩極間加有電壓時，發射出來的電子就流向陽極產生光電流。發射出的電子數目與射在該表面上光束的強度成正比。光電管產生的電流啼弱，經放大器放大後可由微安電表直接指示出吸光度或透光率。

圖8-7 光電管線路示意圖

圖8-8 吸光度和透光率標尺

5．檢流計

用光電池作光電轉換器的比色測量儀器中，檢流計一般採用懸鏡式光電反射檢流計，其靈敏度較高，能測量10-9a（安培）的電流。檢流計有吸光度a和百分透光率t（%）兩種刻度標尺，可直接讀數（圖8-8）。

標尺上透光率t是等分的而吸光度a的刻度是不均勻的。透光率t可用小數或百分率表示。a與t的關系可推導為：

例如，已知某溶液對某一波長的光吸光度為0.04，其透光率可由下面方法求得。

0.04=-lgt

lgt=-0.40

t=0.398=39.8%

又如,已知某溶液對某一波長光的透光率為65%,吸光度為:

對於用光電管作光電 轉換器的儀器,由於加了放大器,可方便地連接微安電表、記錄儀，數字顯示器等指示器，也可以調節電橋平衡的方式讀數取數據。

（二）比色測量儀器

1．光電比色計

光電比色計用光電池和檢流計測量透射光的強度並直接可讀出百分透光率t（%）或吸光度a。圖8-9是581-g型光電比色計的示意圖。它是利用濾光片把鎢燈產生的白光中與測定無關的光除去，使入射光盡可能是接近溶液補色的單色光，從而提高了比色分析的准確度。

圖8-9 581-g型光電比色計光學線路示意圖

圖8-10 721型分光光度計光學系統示意圖1.光源 2.,8.聚

光透鏡 3.棱鏡 4.準直鏡 5.,11.保護玻璃 6.入射狹縫 7.

平面鏡 9.吸收池 10.光門 12.光電管 13.光柵

2．721型分光光度計

721型分光光度計的工作波長范圍為360-800nm。採用真空光電管作為光電能量 轉換元件，在整個可見光區都比較靈敏。同時採用晶體管放大電路和電表直讀結構，儀器的靈敏度和穩定性都比較好。

圖8-10為721型分光光度計的光學系統示意圖。由光源發出的連續輻射於聚光鏡上，經平面鏡轉角90度反射到入射狹縫，射入單色器。入射光經過準直鏡反身射在出射狹縫上，再經過聚光透鏡後進入比色皿。經溶液吸收後的透射光通過光門照射在光電管上轉換為光電流信號，經過入大後輸入檢流計，由電表直接顯示吸光度。

二、比色分析的測量方法

無論是光電比色計還是分光光度計，最常用的測量方法有如下兩種。

（一）標准曲線計

先配製一系列不同濃度的標准溶液，用選定的顯色劑顯色。選用合適波長的入射光（光電比色計用濾光片，分光光度計可轉動波長調節器）。測定時先以空白溶液調節透光率100%，然後分別測定標准系列的吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標作圖得到一條通過原點的直線，叫做標准曲線（或稱工作曲線）。

例如，測定維生素b12時，可預先繪制維生素b12的a-c標准曲線（圖8-11），再用完全相同的方法和步驟測定被測溶液的吸光度，即可從標准曲線上找出被測溶液的濃度或含量。

這種方法叫做標准蛐線法。標准曲線可在固定儀器和方法的條件下多次使用，適合於經常性工作。但若儀器不同或測定方法及條件改變，測得的標准曲線不同。因此在更換任何測定條件時都需重新繪制標准曲線。

圖8-11 維生素b12的標准曲線

（二）直接比較計演算法

若僅對個別樣品進行測定，且a-c曲線線性良好，可水作標准曲線而直接比較測定結果。

先配製一個被測物質溶液濃度相近的標准溶液，與被測溶液在相同條件下測定吸光度。根據下式可以計算。

a標=k標c標b標

a測=k測c測b測

由於使用同一波長的入射光，採用同樣的比色皿，測定同樣的物質。所以

k標=k測

b標=b測

因此a標/a測=c標/c測

則c測=a測/a標×c標

4. 比色劑是什麼東西，有人能給我解釋一下嗎

納氏試劑比色法
1 原理
碘化汞和碘化鉀的鹼性溶液與氨反映生成淡紅棕色膠態化合物,其色度與氨氮含量成正比,通常可在波長410~425nm范圍內測其吸光度,計算其含量.
本法最低檢出濃度為0.025mg/L(光度法),測定上限為2mg/L.採用目視比色法,最低檢出濃度為0.02mg/L.水樣做適當的預處理後,本法可用於地面水,地下水,工業廢水和生活污水中氨氮的測定.
2 儀器
2.1 帶氮球的定氮蒸餾裝置:500mL凱氏燒瓶,氮球,直形冷凝管和導管.
2.2 分光光度計
2.3 pH計
3 試劑
配製試劑用水均應為無氨水
3.1 無氨水可選用下列方法之一進行制備:
3.1.1 蒸餾法:每升蒸餾水中加0.1mL硫酸,在全玻璃蒸餾器中重蒸餾,棄去50mL初餾液,按取其餘餾出液於具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存.
3.1.2 離子交換法:使蒸餾水通過強酸型陽離子交換樹脂柱.
3.2 1mol/L鹽酸溶液.
3.3 1mol/L氫氧化納溶液.
3.4 輕質氧化鎂(MgO):將氧化鎂在500℃下加熱,以出去碳酸鹽.
3.5 0.05%溴百里酚藍指示液:pH60.~7.6.
3.6 防沫劑,如石蠟碎片.
3.7 吸收液:
3.7.1 硼酸溶液:稱取20g硼酸溶於水,稀釋至1L.
3.7.2 0.01mol/L硫酸溶液.
3.8 納氏試劑:可選擇下列方法之一制備:
3.8.1 稱取20g碘化鉀溶於約100mL水中,邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞(HgCl2)結晶粉末(約10g),至出現朱紅色沉澱不易溶解時,改寫滴加飽和二氯化汞溶液,並充分攪拌,當出現微量朱紅色沉澱不再溶解時,停止滴加二氯化汞溶液.
另稱取60g氫氧化鉀溶於水,並稀釋至250mL,冷卻至室溫後,將上述溶液徐徐注入氫氧化鉀溶液中,用水稀釋至400mL,混勻.靜置過夜將上清液移入聚乙烯瓶中,密塞保存.
3.8.2 稱取16g氫氧化納,溶於50mL水中,充分冷卻至室溫.
另稱取7g碘化鉀和碘化汞(HgI2)溶於水,然後將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化納溶液中,用水稀釋至100mL,貯於聚乙烯瓶中,密塞保存.
3.9 酒石酸鉀納溶液:稱取50g酒石酸鉀納KNaC4H4O6·4H2O)溶於100mL水中,加熱煮沸以除去氨,放冷,定容至100Ml.
3.10 銨標准貯備溶液:稱取3.819g經100℃乾燥過的優級純氯化銨(NH4Cl)溶於水中,移入1000mL容量瓶中,稀釋至標線.此溶液每毫升含1.00mg氨氮.
3.11 銨標准使用溶液:移取5.00mL銨標准貯備液於500mL容量瓶中,用水稀釋至標線.此溶液每毫升含0.010mg氨氮.
4 測定步驟
4.1 水樣預處理:取250mL水樣(如氨氮含量較高,可取適量並加水至250mL,使氨氮含量不超過2.5mg),移入凱氏燒瓶中,家數滴溴百里酚藍指示液,用氫氧化納溶液或演算溶液調節至pH7左右.加入0.25g輕質氧化鎂和數粒玻璃珠,立即連接氮球和冷凝管,導
管下端插入吸收液液面下.加熱蒸餾,至餾出液達200mL時,停止蒸餾,定容至250mL.
採用酸滴定法或納氏比色法時,以50mL硼酸溶液為吸收液;採用水楊酸-次氯酸鹽比色法時,改用50mL0.01mol/L硫酸溶液為吸收液.
4.2 標准曲線的繪制:吸取0,0.50,1.00,3.00,7.00和10.0mL銨標准使用液分別於50mL比色管中,加水至標線,家1.0mL酒石酸鉀溶液,混勻.加1.5mL納氏試劑,混勻.放置10min後,在波長420nm處,用光程20mm比色皿,以水為參比,測定吸光度. 由測得的吸光度,減去零濃度空白管的吸光度後,得到校正吸光度,繪制以氨氮含量(mg)對校正吸光度的標准曲線.
4.3 水樣的測定:
4.3.1分取適量經絮凝沉澱預處理後的水樣(使氨氮含量不超過0.1mg),加入50mL比色管中,稀釋至標線,家0.1mL酒石酸鉀納溶液.以下同標准曲線的繪制.
4.3.2 分取適量經蒸餾預處理後的餾出液,加入50mL比色管中,加一定量1mol/L氫氧化納溶液,以中和硼酸,稀釋至標線.加1.5mL納氏試劑,混勻.放置10min後,同標准曲線步驟測量吸光度.
4.4 空白實驗:以無氨水代替水樣,做全程序空白測定.
5 計算
由水樣測得的吸光度減去空白實驗的吸光度後,從標准曲線上查得氨氮量(mg)後,
按下式計算:
氨氮(N,mg/L)=m/V×1000
式中:m——由標准曲線查得的氨氮量,mg;
V——水樣體積,mL.
6 注意事項:
6.1 納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例,對顯色反應的靈敏度有較大影響.靜置後生成的沉澱應除去.
6.2 濾紙中常含痕量銨鹽,使用時注意用無氨水洗滌.所用玻璃皿應避免實驗室空氣中氨的玷污.

5. 翻譯下列日語

指導內容
學習活動
指導上的注意點
評價
展開
·測定方法的確認
·雨水的pH測定
·二氧化氮的測定
·數據的整理
·由實驗報告來確認測定方法。
·用packtest（一種簡單的水質分析用具）測定採集的雨水的pH。
·用簡易比色計測定二氧化氮的濃度。
·發表各班的數據。
·多方面指導簡易比色計的用法。
·有關pH測定法，通知可以使用pH計。
·通知對照簡易比色計可以求出換算值。
·實際操作正確與否。
·比色計的使用正確與否。
·大氣污染的狀況
·由各班的數據了解大氣污染的狀況。
·由於氣象條件的不同，測定值會不同，因此將測定值的大小和污染狀況限定在一定范圍。
·大氣污染物質的確認與否。

6. 光電比色計和分光光度計有什麼區別

1、比色計與光度計的概念不同：

比色計是一種化學分析儀器。利用光線分別透過標准溶液（或玻片）和試樣溶液而進行比較顏色強度的儀器。用於比色分析。一般分為目視比色計和光電比色計，而光度計是屬於後者。

2、波長選擇范圍不同：

光電比色計、尿液分析、酶標儀使用濾光片為分光元件，波長選擇范圍有限。

分光光度計、自動生化分析儀使用棱鏡或光柵為分光元件，可獲得連續的。

3、單色器不同：

比色計採用濾光片濾除其他的雜光，光線的純度低，精度差。

分光光度計採用分光系統（光柵或菱鏡）獲取單色光，光線的純度高，精度好。

(6)比色計的使用方法擴展閱讀：

分光光度計的使用注意事項：

1、該儀器應放在乾燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作台上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。

2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然後再按通電源開關。

3、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須於「0」刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。

7. 分光光度法和比色法有何異同

1、原理不同

（1）、分光光度法的原理基於朗伯一比爾（Lambert - Beer）定律，在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法。

（2）、比色法的原理是基於被測物質溶液的顏色或加入顯色劑後生成的有色溶液的顏色，顏色深度和物質含量成正比，則根據光被有色溶液吸收的強度，即可測定溶液中物質的含量。

2、特點不同

（1）、分光光度法具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點，是生物化學實驗中最常用的實驗方法。

（2）、比色法以生成有色化合物的顯色反應為基礎，針對性強，使用條件較為嚴格：反應應具有較高的靈敏度和選擇性，反應生成的有色化合物的組成恆定且較穩定，它和顯色劑的顏色差別較大。

3、歷史發展不同

（1）、比色法的歷史比分光光度法悠久。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵，1795年，俄國人也用五倍子的酒精溶液測定礦泉水中的鐵。比色法作為一種定量分析的方法，大約開始於19世紀30～40年代。而分光光度法是現代社會普遍使用的一種測定物質含量的方法。

（2）、隨著光學儀器製造技術的發展，紫外－可見分光光度計應用日益普及，精密度較高而價格又較低的紫外－可見分光光度計已逐漸代替光電比色計，分光光度法也隨之逐漸代替了比色法。

二、相同點

1、兩個方法均是用來進行物質含量測定地點定性、定量方法；均需要一定的條件和設備。

(7)比色計的使用方法擴展閱讀：

一、常用的比色法有兩種：目視比色法和光電比色法，兩種方法都是以朗伯-比爾定律(A=εbc)為基礎。

1、常用的目視比色法是標准系列法，即用不同量的待測物標准溶液在完全相同的一組比色管中，先按分析步驟顯色，配成顏色逐漸遞變的標准色階。

2、試樣溶液也在完全相同條件下顯色，和標准色階作比較，目視找出色澤最相近的那一份標准，由其中所含標准溶液的量，計算確定試樣中待測組分的含量。

3、與目視比色法相比，光電比色法消除了主觀誤差，提高了測量准確度，而且可以通過選擇濾光片來消除干擾，從而提高了選擇性。

4、但光電比色計採用鎢燈光源和濾光片，只適用於可見光譜區和只能 得到一定波長范圍的復合光， 而不是單色光束，還有其他一些局限，使它無論在測量的准確度、靈敏度和應用范圍上都不如紫外-可見分光光度計。

5、在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。

6、如以波長（λ）為橫坐標，吸收強度（A）為縱坐標，就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法，稱為分光光度法，也稱為吸收光譜法。

7、用紫外光源測定無色物質的方法，稱為紫外分光光度法；用可見光光源測定有色物質的方法，稱為可見光光度法。它們與比色法一樣，都以Lambert-Bee定律為基礎。

8、上述的紫外光區與可見光區是常用的。但分光光度法的應用光區包括紫外光區，可見光區，紅外光區。波長范圍：

（1）、200～400nm的紫外光區

（2）、400～760nm的可見光區

（3）、2.5～25μm(按波數計為4000cm-1～400cm-1)的紅外光區。

8. 比色皿液體加二分之一可以嗎

比色皿液體加二分之一可以。

一般比色計的光源是打在比色皿的對角中心點位置,也就是比色皿一半的高度，為了保證樣品溶液能被比色計光源穿透而測得吸光度,所以比色皿中的溶液要佔比色皿2/3高度。在使用比色皿時,兩個透光面要完全平行,並垂直置於比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直於透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。

比色皿注意事項

比色皿的透光面不應與硬物或臟物接觸，比色皿使用時勿碰撞。

比色皿中的液體，應沿毛面傾斜，慢慢倒掉，不要將比色皿翻轉，直介面向下放在干凈的濾紙上吸干剩餘液，然後用蒸餾水沖洗比色皿內部倒掉(操作同上)避免液體外流，使第2次測量時不用擦拭比色皿，不致因擦拭帶來的誤差。