A. 血球計數板的使用方法
(1)構造:血球計數板是一塊特製的載玻片,它的上表面有4條下凹的槽,構成3個平台,中間的平台又被一短橫槽隔為兩半,每半邊各有一個方格網,每個方格網上有9個大小相等的大方格,其中只有中間的一個大方格為計數室,供微生物計數用,這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3。
(2)規格:
一種是大方格內分為25中方格,每一中格又分為16小方格;另一種是大方格內分為16中方格,每一中方格又分為25小方格。但是不管計數室是哪一種構造,它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成,見圖:
(3)使用方法
①取清潔乾燥的血球計數板,加蓋玻片蓋住網格和兩邊的槽。
②將待測菌液充分搖勻後,用無菌吸管吸少許,由蓋玻片邊緣或槽內加入計數板,使其自行滲入計數室內,計數室內不能有氣泡。靜置5-10分鍾。
③在低倍鏡下找到小方格網後更換高倍鏡觀察計數,上下調動細螺旋,以便看到小室內不同深度的菌體。位於分格線上的菌體,只數兩條邊上的,其餘兩邊不計數。即數上線就不數下線,數左邊線就不數右邊線。
④計數時,若使用刻度為25中方格×16小方格的計數板,計數四個角的4個中方格,及中央1個中方格的菌數(即80小方格);若使用刻度為16中方格×25小方格的計數板,就數四個角的4個中方格(即100小方格)內的菌數。每小方格中菌數以5-10個為宜,如菌液過濃可適當稀釋。
⑤每個樣品重復計數2-3次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數。
刻度為25中方格×16小方格的計數板:
刻度為16中方格×25小方格的計數板:
⑥試驗結束後要清洗和整理試驗用具,特別注意血球計數板不能用試管刷蘸洗滌劑擦洗,正確的做法是浸泡和沖洗,洗後自行晾乾或用吹風機吹乾。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉澱物,若不幹凈,則必須重復清洗直到干凈為止。
B. 細胞計數板的計數方法,有4×4小格的4個大格
每個大格桉順序依次計數,記左不計右,記上不記下。再4個大格的數相加除以四最後乘以每個大格的體積
C. 血球計數板使用條件是什麼
血球計數板使用條件的話是在一定條件下,比如說空腹啊或者是其他的環境。
D. 血球計數板的使用方法
使用方法如下:
1.視待測菌懸液濃度,加無菌水適當稀釋(斜面一般稀釋100倍),以每小格的菌數可數為度。
2.取潔凈的血球計數板一塊,在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
3.將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過多),讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區,勿使氣泡產生,並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上(不要使計數區兩邊平台沾上菌懸液,以免加蓋蓋玻片後,造成計數區深度的升高),然後加蓋蓋玻片(勿使產生氣泡)。
4.靜置片刻,使細胞沉降到計數板上,不再隨液體漂移。將血球計數板放置於顯微鏡的載物台上夾穩,先在低倍鏡下找到計數區後,再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近,觀察時應減弱光照的強度。
5.計數時若計數區是由16個中方格組成,按對角線方位,數左上、左下、右上、右下的4個中方格(即100小格)的菌數。如果是25個中方格組成的計數區,除數上述四個中方格外,還需數中央1個中方格的。
菌數(即80個小格)。為了保證計數的准確性,避免重復計數和漏記,在計數時,對沉降在格線上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位於大方格的雙線上,計數時則數上線不數下線,數左線不數右線,以減少誤差。即位於本格上線和左線上的細胞計入本格,本格的下線和右線上的細胞按規定計入相應的格中。見右圖:即本格中計數細胞為3個。
6.對於出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時,即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數2-3次(每次數值不應相差過大,否則應重新操作),按公式計算出每mL(g)菌懸液所含細胞數量。
7.測數完畢,取下蓋玻片,用水將血球計數板沖洗干凈,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免損壞網格刻度。洗凈後自行晾乾或用吹風機吹乾,放入盒內保存。
(4)細胞計數板使用方法擴展閱讀:
計數公式
紅細胞數(RBCs)/L=N/5×25×10×106×200
N為:五個中方格的RBC總數
N/5為:5個中方格(粉紅色區域)的平均RBC數量(然後推及至中央大方格中每一個中方格RBC的數量)
N/5×25為:中央大方格RBC總數(即:0.1mm3(ul)的RBC總數)
N/5×25×10為:1mm3(ul)RBC總數
N/5×25×10×106為:1L的RBC總數
200為:血液的稀釋倍數
公式簡化後:紅細胞數/L=N×5×107×稀釋倍數
公式前面部分都是換算成每微升血多少該計數細胞;最後都是由微升換算到升,乘以10的6次方
(1)目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數
(2)以同樣方法,分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度.
(3)如此測定後的目鏡測微尺的尺度,僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數.若更換物鏡,目鏡的放大倍數時,必須再進行校正標定.
參考資料:血球計數板-網路
E. 高中血球計數板怎麼用 簡潔些
計數板上的待測菌懸液中的細胞穩定後,按對角線方位,數左上,坐下,右上,右下,四個大方格的菌數
F. 細胞計數板
蓋玻片上的計數板(池)網格總面積:3 mm x 3 mm 或 9 sq mm,總面積分成9個大方格,每個為1 mm x 1 mm,四個角區的大方格被劃分成16個小方格(每個方格為1/16 sq mm)。中央大方格被劃分成100個小方格(每個為0.1 mm X 0.1mm),用於紅細胞、血小板和精子計數;
G. 用細胞計數板怎麼控制細胞計數在一定范圍呢
計數板本來就是用於計數細胞的,並不是用於控制細胞數量的。
如果你希望讓液體中的細胞含量在某個范圍,可以通過計數板計數細胞含量,然後根據計算出的細胞量大致算一下需要稀釋多少,然後加生理鹽水或實驗需要的溶液進行稀釋就可以了。當然因為計數板計數結果存在比較大的不確定性,最好逐漸嘗試稀釋。
H. 細胞計數板怎麼數細胞
實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。
具體操作:
1. 將計數板及蓋片擦拭乾凈,並將蓋片蓋在計數板。
2. 將細胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
3. 計算板四大格細胞總數,壓線細胞只計左側和上方的。然後按公式計算:
細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104
說明:公式中除以4,因為計數了4個大格的細胞數。
公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為:
1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
(注意:鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算,若細胞團10%以上,說明分散不好,需重新制備細胞懸液)
I. 用血細胞計數板計數的方法叫什麼
用血細胞計數板計數的方法叫直接計數法。
解析:1.細菌數量的統計方法一般包括:直接計數法和間接計數法。
2.直接計數法:利用特定的細菌計數板或者血細胞計數板,在顯微鏡下計算一定容積樣品中微生物的數量。一般用血細胞計數板對酵母菌進行計數。
3.間接計數法:一般是指稀釋塗布平板法。