最新基因編輯載體治療方法

1. 基因受損怎麼治療基因的治療方法

基因治療是指將外源正常基因導入靶細胞，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療目的。也就是將外源基因通過基因轉移技術將其插入病人的適當的受體細胞中，使外源基因製造的產物能治療某種疾病。從廣義說，基因治療還可包括從DNA水平採取的治療某些疾病的措施和新技術。

基因治療方法
1．基因轉移方法
（1）特異正常基因的分離與克隆：應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果，已有不少基因並將會有更多人類基因被分離和克隆，這是基因治療的前提，在當代分子生物技術條件下，一般來說，只要有基因探針和准確的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，現在既可人工合成DNA探針，還可用DNA合成儀在體外人工合成基因，這些都是在基因治療前，分離克隆特異基因的有利條件。
（2）外源基因的轉移：基因轉移是將外源基因導入細胞內，其轉移方法較多，常用的要有下列幾類：
1）化學法：將正常基因DNA（及其拷貝）與帶電荷物質和磷酸鈣、DEAE－葡萄糖或與若干脂類混合，形成沉澱的DNA微細顆粒，直接傾入培養基中與細胞接觸，由於鈣離子有促進DNA透過細胞有作用，某些化合物可擾亂細胞膜，故可將DNA輸入細胞內，並整合於受體細胞的基因組中，在適當的條件下，整合基因得以表達，細胞亦可傳代。這種方法簡單，但效率極低，一般1000－100000個細胞中只有一個細胞可結合導入的外源基因。要達到治療目的，就需要從病人獲得大量所需的受體細胞。當然，可以通過選擇培養的方法來提高轉化率。
2）物理法：包括電穿孔法和直接顯微注射法。
①電穿孔法：電穿孔法是將細胞置於高壓脈沖電場中，通過電擊使細胞產生可逆性的穿孔，周圍基質中的DNA可滲進細胞，但有時也會使細胞受到嚴重損傷。
②顯微注射法：顯微注射是在顯微鏡直視下，向細胞核內直接注射外源基因，這種方法應是有效的。但一次只能注射一個細胞，工作耗力費時。此法用於生殖細胞時，有效率可達10%。直接用於體細胞卻很困難。在動物實驗中，應用這種方法將目的基因注入生殖細胞，使之表達而傳代，這樣的動物就稱為轉基因動物，目前成功使用得較多的是轉基因小鼠，它可作為繁殖大量後代的疾病動物模型。
③脂質體法：脂質體法是應用人工脂質體包裝外源基因，再與靶細胞融合，或直接注入病灶組織，使之表達。
3）同源重組法：同源重組是將外源基因定位導入受體細胞的染色體上，在該座位因有同源序列，通過單一或雙交換，新基因片段替換有缺陷的片段，達到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁組裝一Neo基因，則在同源重組後，因有Neo基因，可在含有新黴素的培養基中生長，從而使未插入新基因片段的細胞死亡。對於體細胞基因治療，體外培養細胞的時間不能過長，篩選量大，故在臨床上應用也受限制難以進行。今後如能改進技術，提高重組率，這種定點修正基因的方法仍是有前景的。
4）病毒介導基因轉移：前述的化學和物理方法都是通過傳染方式基因轉移。病毒介導基因轉移是通過轉換方式完成基因轉移，即以病毒為載體，將外源目的基因通過基因重組技術，將其組裝於病毒上，讓這種重組病毒去感染受體宿主細胞，這種病毒稱為病毒運載體。目前應用的有兩種病毒介導基因轉移方法。
①反轉錄病毒載體：反轉錄病毒雖是RNA病毒，但有反轉錄酶，可使RNA轉錄為DNA，再整合到宿主細胞基因組。反轉錄病毒載體有以下的優點首先是具有穿透細胞的能力，可使近100%的受體細胞被感染，轉化細胞效率高；其次，它能感染廣譜動物物種和細胞類型而無嚴格的組織特異性；再者隨機整俁的病毒可長期存留，一般無害於細胞，但也存在缺點：這種載體只能把其DNA整合到能旺盛分裂細胞的染色體，而不適合於那些不能正常分裂的細胞，如神經元。最嚴重的問題是由於病毒自身含有病毒蛋白及癌基因，就有使宿主細胞感染病毒和致癌的危險性。因此，人們有目的地將病毒基因及其癌基因除去，僅留它們的外殼蛋白，以保留其穿透細胞的功能，試圖避免上述缺點。這種改造後的病毒稱為缺陷型病毒。這樣的病毒中的反轉錄酶可將RNA轉化為DNA，有助於該DNA順利進入宿主細胞的基因組，而該病毒則死亡。由於病毒整合基因組是隨機的，所以還是可能激活細胞的原癌基因，以及因隨機插入發生插入突變。在反轉錄病毒載體中，最常用於人類的是莫洛尼鼠白血病病毒，其人工構建的結構。
②DNA病毒介導載體：DNA病毒包括腺病毒、SV40、牛乳頭瘤病毒、皰疹病毒等，一般認為這類病毒難於改造成缺陷型病毒。牛乳頭瘤病毒重組後，可不插入宿主染色體中引起插入突變，又可在宿主染色體外獨立復制，並表達出基因產物。有人發現，因缺少E1區而致復制缺陷的腺病毒，可在表達E1基因的細胞中繁殖。後來證明，載有外源DNA的復制缺陷腺病毒呈現相同繁殖的特點。1993年美法等國成功採用腺病毒載體進行心、腦、肺、肝內膽管和肌肉組織的體內基因轉移。它代表了基因治療的新方向。美國設計了一個新的腺病症載體，它是用一個化學連接器即賴氨酸鏈將DNA栓在病毒外殼上，這樣組成的運輸器，通過一個表面抗體而進入細胞核，使宿主基因與治療基因共同表達。這個新病毒載體稱為腺病毒多賴氨酸DNA復合體。採用復制缺陷的腺病毒進行基因治療有以下優點：
①該病毒可感染分裂和非分裂的細胞，並能得到大量基因產物，對神經細胞、心肌細胞等基因缺陷的糾正有特殊意義；
②病毒顆粒相對穩定，並易於純化和濃縮，且感染力不降低；
③可有效轉導多種靶細胞後而少游離於細胞基因組外，並持續表達；
④已用於基因治療的Ad5屬腺病毒C亞群，無致癌性。前述的新腺病毒載體還有一大優點是可以成功地運載48000bp的基因，而其它病毒只能運輸70 00bp的基因。這些優點顯示了腺病毒介導載體的廣闊應用前景。
2．選擇靶細胞的原則
這里所指的靶細胞是指接受轉移基因的體細胞。
選擇靶細胞的原則是：
①必須較堅固，足以耐受處理，並易於由人體分離又便於輸回體內；
②具有增殖優勢，生命周期長，能存活幾月至幾年，最後可延續至病人的整個生命期；
③易於受外源遺傳物質的轉化；
④在選用反轉錄病毒載體時，目的基因表達最好具有組織特異性的細胞。目前使用得較多的是骨髓幹細胞、皮膚成纖維細胞、肝細胞、血管內皮細胞和肌細胞等。許多遺傳病與造血細胞有關，故可用於如β地貧、嚴重復合免疫缺陷病等的基因治療。皮膚成纖維細胞易於移植和從體內分離，又可在培養中生長，並易存活，故有人用之於乙型血友病的基因治療。有不少遺傳病表現了肝細胞功能缺陷，因此，在家族性高膽固醇血症的治療中，有將低密度脂蛋白（LDL）受體基因轉移至肝細胞的嘗試。在動物實驗中已證明：β－半乳糖苷酶基因、ADA基因、小肌營養不良蛋白（minidystrophin）基因都已證明能在肌細胞中表達。
編輯本段基本程序
基因治療
(一)治療性基因的獲得 (二)基因載體的選擇 (三)靶細胞的選擇 (四)基因轉移方法 (五)轉導細胞的選擇鑒定 (六)回輸體內
編輯本段基本步驟
目的基因的轉移
基因治療
在基因治療中迄今所應用的目的基因轉移方法可分為兩大類：病毒方法和非病毒方法。基因轉移的病毒方法中，RNA和DNA病毒都可用為基因轉移的載體。常用的有反轉錄病毒載體和腺病毒載體。轉移的基本過程是將目的基因重組到病毒基因組中，然後把重組病毒感染宿主細胞，以使目的基因能整合到宿主基因組內。非病毒方法有磷酸鈣沉澱法、脂質體轉染法、顯微注射法等。 贊同
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我看也同意及支持這種療法，不知道你以前是否治療過嗎？如果治療過這種療法的，這也許你也還是用這種療法的因素治療，這就是要到有這方面的醫院治療才行啊，如果沒有這方面的醫院，不過，這你要趕緊快去找醫院治療先再說拉。但是，目前國內可能沒有這種醫院還不有及不成熟啊。
不過你這大腦受傷怎麼受傷及或者損傷的，目前損傷嚴重成度中不重，不管損傷嚴重情度中不重，還是趕緊送腦外科醫院先趕緊治療先吧，在這目前損傷嚴重損傷的話，這還是早到外科醫院治療或醫院治療先拉。這就是這樣先拉越快越好吧。快，快，快，吧。

2. 基因編輯技術形式有哪些

基因編輯技術形式有：

1、同源重組

同源重組（Homologous recombination）是最早用來編輯細胞基因組的技術方法。同源重組是在DNA的兩條相似（同源）鏈之間遺傳信息的交換（重組）。

2、核酸酶

基因編輯的關鍵是在基因組內特定位點創建DSB。常用的限制酶在切割DNA方面是有效的，但它們通常在多個位點進行識別和切割，特異性較差。為了克服這一問題並創建特定位點的DSB。

基因編輯技術的應用：

基因編輯和牛體外胚胎培養等繁殖技術結合，允許使用合成的高度特異性的內切核酸酶直接在受精卵母細胞中進行基因組編輯。
CRISPR
-Cas9進一步增加了基因編輯在動物基因靶向修飾的應用范圍。CRISPR-Cas9允許通過細胞質直接注射從而實現對哺乳動物受精卵多個靶標的一次性同時敲除（KO）。

單細胞基因表達分析已經解決了人類發育的轉錄路線圖，從中發現了關鍵候選基因用於功能研究。使用全基因組轉錄組學數據指導實驗，基於CRISPR的基因組編輯工具使得干擾或刪除關鍵基因以闡明其功能成為可能。

以上內容參考：網路—基因編輯技術

3. 如何接受基因編輯治療

從符合條件的癌症患者的血液中過濾、分離出T細胞，然後在體外利用基因編輯技術敲除T細胞表昌則面的州迅掘3個受體（內源性TCRα、TCRβ和PD-1），同時利用慢病毒載體插入一個名為NY-ESO-1的受體基因。NY-ESO-1蛋白是表達於一些癌症細冊核胞表面的蛋白。

經過改造的T細胞會在實驗室培養幾周，以便擴增。患者在接受短暫的化療之後，會注入這些改造的T細胞。這些T細胞會靶向並摧毀癌細胞。

4. 基因組編輯將如何用於治療癌症會有用嗎

基因編輯對癌症的治療是非常有用的。基因編輯治療癌症主要包括直接殺滅和間接殺滅兩種方法治療。

基因編輯技術治療癌症。對癌症產生的原因完全認識後，就可以採用基因編輯治療癌症。目前治療癌症有兩種主要方式，第一種是直接攻擊癌細胞中的關鍵基因。首先科學家會對識別出癌症中的免疫逃逸基因，隨後對T細胞進行工程修飾來滅殺癌細胞。另外一種是間接的編輯免疫細胞，通過該細胞攻擊癌細胞。免疫細胞是人體內的重要細胞，但是免疫細胞在人體很難進化，所以只能通過人工干擾。直接根據某種癌症細胞的DNA序列，測算出免疫細胞的基因編碼，隨後改變人體內免疫細胞的編碼，從而讓人體對癌細胞產量了抗體細胞，從而達到殺滅的目的。