口腔黏膜的正確提取方法

① 小孩子如何提取口腔試紙做親子鑒定多久有效

北美親子鑒定中心為您講述提取口腔粘膜DNA方法 1． 用清水漱口，使口腔清潔。 2． 盒內有兩管和取樣小棍, 1號平底及2號尖底. 取出1號管，立於桌上, 等蓋上溶液集中到管底。小心地把蓋打開。 3． 取出帶齒的DNA收集小棍， 伸入口腔內側的頰部（位於上下牙齒之間的部位），由後向前不同部位刮六次，再刮另一側的粘膜取DNA樣品。 4． 將有DNA樣品的小棍浸入1號管的溶液中，轉動數次，將DNA細胞洗到溶液中。 上下轉動可使上端殘留也收集到管中。 5． 為保證提取足量的DNA樣品，建議用清水洗滌小棍後再用以上方法再刮一次收集到1號管中。此時，溶液應呈混濁。把取樣小棍棄掉。 6． 取出2號管，小心等蓋上、瓶比壁溶液都收集到管中（可輕輕甩動）。將1號管中的溶液全部倒入2號管中，蓋上2號管的螺旋蓋並擰緊，上下用力搖10次。 7． 將2號管置入樣品袋中寄回本公司指定的收集站。 注意：勿將DNA收集小棍浸到2號管中。 如發生此類事件，請用清水反復洗滌口收集小棍後方可再用。

② 一般做親子鑒定取空腔黏膜需要注意哪些事項

1.准備工具 單頭醫用棉簽、信封或白紙 2.采樣步驟 （1）、手持棉簽，伸進口腔，從口腔內側頰粘膜處（腮幫子內側）反復擦拭20次以上（不時旋轉棉棒），取出棉簽，放在干凈白紙上陰干。 （2）、選擇不同的口腔壁以同樣的方法採集第二根棉簽，每個人至少要提取三根棉簽。 （3）、將採集好的樣本放入信封或用白紙包好，標記好樣本所屬人的身份和姓名，注意將不同當事人的樣本單獨放置，不能相互接觸。 3.注意事項 避免用手觸及棉簽頭，採集前請先用清水漱口。上述方法採集的樣本，可以在乾燥環境下保存2—3個月。 4.方法優點 無痛、便捷 參考資料：http://jiangsu.akbchina.com/news/44.html

③ 口腔粘膜DNA的提取方法

提取口腔粘膜DNA方法

1． 用清水漱口，使口腔清潔。
2． 盒內有兩管和取樣小棍, 1號平底及2號尖底. 取出1號管，立於桌上, 等蓋上溶液集中到管底。小心地把蓋打開。
3． 取出帶齒的DNA收集小棍，
伸入口腔內側的頰部（位於上下牙齒之間的部位），由後向前不同部位刮六次，再刮另一側的粘膜取DNA樣品。
4． 將有DNA樣品的小棍浸入1號管的溶液中，轉動數次，將DNA細胞洗到溶液中。 上下轉動可使上端殘留也收集到管中。
5．
為保證提取足量的DNA樣品，建議用清水洗滌小棍後再用以上方法再刮一次收集到1號管中。此時，溶液應呈混濁。把取樣小棍棄掉。
6．
取出2號管，小心等蓋上、瓶比壁溶液都收集到管中（可輕輕甩動）。將1號管中的溶液全部倒入2號管中，蓋上2號管的螺旋蓋並擰緊，上下用力搖10次。
7． 將2號管置入樣品袋中寄回本公司指定的收集站。
注意：勿將DNA收集小棍浸到2號管中。 如發生此類事件，請用清水反復洗滌口收集小棍後方可再用。

④ 口腔拭子DNA提取的方法

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式：酶法。根據核酸分離純化方式的不同有；硅質材料、陰離子交換樹脂等。

提取DNA總的原則:

1.保證核酸一級結構的完整性；

2.核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；

3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；

4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。

例如 : 用酶法提取

DNA提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。

工具/原料: 研磨棒、研磨儀或者組織破碎儀 , 氯仿：異戊醇（24:1）或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱

方法/步驟 :

• 使用研磨儀、研磨棒或者使用超聲破碎細胞的方法破碎細胞，加入去污劑，如sds等，除去膜脂。

• 去除細胞內的蛋白質，包括與DNA結合的組蛋白，通過加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚／氯仿抽提等方法去除。

• 加入RNA酶去除RNA，如實驗不嚴密，可省略此步。

• 沉澱DNA，需在冷乙醇或異丙醇中沉澱，放在冰箱-20℃沉澱30分鍾以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起發生沉澱。

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總結: DNA提取方法有下面⑦種

一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb

二.甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。

三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。

四.異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）

五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。

六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。

七.鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。

⑤ 刮取口腔黏膜基因檢測不成功

是不是刮取的方法不正確呀，可以採用唾液進行檢驗，只需要2ml,方法如下：(中源-協和基因)

⑥ 一般做親子鑒定取空腔黏膜需要注意哪些事項

用於親子鑒定的樣本口腔拭子的採集方法：用干凈的棉簽在口腔內壁上下檫拭旋轉，讓口腔粘膜細胞充分附著在棉簽的棉花上，這種帶有口腔粘膜細胞的棉簽就是口腔拭子。採集口腔拭子需要注意的事項有：
1、如有吃母乳的小孩，需要在吃完母乳半小時後採集。因母親乳汁中含有母親的DNA信息，吃完半小時後採集，是以防採集到母親的乳汁，使得檢測出的DNA信息是兩者間的混合DNA信息。
2、採集的時候不能涑口，涑口會稀釋口腔黏膜細胞的溶度，使得棉簽的棉花頭吸附不到用於親子鑒定足夠的DNA量。
3、吸煙者不建議採集口腔拭子，有些吸煙者口腔很乾燥，棉簽的棉花頭部吸附不到足夠多的用於親子鑒定的DNA量。
4、數量上，最好採集五根口腔拭子。一般一根棉簽是可以做一次實驗，但是根據親子鑒定的標准：肯定的是需要做兩次實驗，則需要兩根口腔拭子，否定的需要做四次實驗，則需要四根口腔拭子。五根口腔拭子一般能滿足實驗以及重復實驗的需要，補充樣本的可能性較少。

⑦ 家庭如何使用口腔拭子採集

在吐唾液之前，放鬆臉頰，輕揉30秒以產生唾液。 唾液DNA樣本採集管 採集方法
1，向唾液收集器的橢圓形收集口中輕輕吐入口腔內分泌的唾液，收集唾液時應注意盡量避免出現過多的泡沫。
2，收集唾液直至收集管中的唾液與上層泡沫之間的分層界面達到2ml所示的刻度線。
3，將裝有保存液的收集器蓋子均勻的扣到橢圓形收集口上，扣下時有輕微的喀塔聲，同時保存液均勻的流入收集管，則表明蓋子已扣好，否則，需要輕輕的打開收集器的蓋子，然後再次均勻的扣上，直至保存液均勻流入收集管。
4，輕輕甩動唾液收集器，使保存液更加完全的流入收集管。
5，確認收集管中液體與上層泡沫之間的分層界面達到4ml所示的刻度線。

⑧ 基因檢測唾液采樣方法是怎樣的

唾液采樣檢測法，更加方便快捷，容易操作。流程如下：

1、唾液採集前30分鍾內不得進食、飲水、吸煙、飲酒或嚼口香糖等，用飲用水漱口。

2、取出采樣管，打開漏斗蓋，通過漏斗將唾液收集到采樣管中，直至采樣管上標簽所示位置。
3、蓋上漏斗蓋，讓漏斗蓋里的保存液充分流到收集管。
4、旋下漏斗，蓋上小蓋子，上下顛倒搖勻，使唾液與保存液充分混勻。
5、將采樣管和填好的資料放回盒子中，寄回基因檢測中心。