❶ 膠體金是怎麼標記的
膠體金法是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用於抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。
膠體金法是由氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等還原劑的作用下,聚合成相應大小的金顆粒,並由於靜電作用而使金顆粒成為一種穩定的膠體狀態,形成攜帶著負電的疏水膠溶液,因為成為了穩定的膠體狀態,所以被稱為膠體金。
膠體金法有其獨特的優點,近年已在各種生物學研究中廣泛使用.在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。
(1)膠體金有哪些方法擴展閱讀:
膠體金法的方法原理介紹:
1、雙抗體夾心法原理,主要用於較大分子量的蛋白(抗原)的檢測。要求兩株抗體針對一個抗原的不同位點才可以。
2、競爭法原理,主要用於小分子抗原(毒品、農葯、肽鏈德國)的檢測。由於抗原分子量小不能直接固定於NC膜上,常常用化學方法把小分子偶聯到BSA等大分子物質上再固定於NC膜上。
3、間接法原理,主要用於血清中抗體檢測,純化或者重組的抗原固定於NC膜上,標記多為蛋白A。
❷ 膠體金檢測方法
膠體金檢測方法如下:
膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,並由於靜電作用成為一賀孝種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,由於靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱膠體金。
在檢測時,如樣本中沒有嗎啡或其代謝產物存在,膠體金標記的特異性抗體與膜區抗原結合形成兩條紅線(一條反應線T,一條質控線C),表明檢測結果為陰性;
如樣本中存在嗎啡或其代謝產物,而且濃度高於檢測水平(300ng/ml)時,毒品分子就與膠體金標記的抗體競爭結合,從而阻止膠體金標記的抗體與膜區抗原結合,使其對應的紅色反應線消失,僅出現一條紅色的質控線,表明檢測結果為陽性。