免疫水針檢測igg的方法有哪些

1. IGE測定是什麼

病情分析:IGE測定即系免疫球蛋白測定,正常人的的血清當中僅含有少量的IGE球蛋白,當超過一定數量是,可以引起超敏反應,表現為各種各樣的皮膚病,如慢性濕疹意見建議:IGE測定是皮膚科常用的實驗室診斷項目,可以指導臨床用葯.建議遵循醫生建議,做個IGE測定生活護理:慢性皮膚病,如濕疹之類的~一定要戒口,魚蟹蝦盡量不要吃~還有居住環境,一定要乾燥涼爽~ 日常心情保持舒暢~注意休息 最重要的是堅持用葯,有規律用葯!

2. 體液免疫的檢測

臨床上一個反復發作的化膿感染，常使醫生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原發免疫缺陷發病年齡很小，而繼發免疫缺陷病人多在30歲以上。絕大多數免疫缺陷病人多表現為體液和細胞免疫同時受損，所以應全面檢查這兩方面的功能。遺憾的是，目前應用的檢測方法的局限性，其結果常難以得出明確結論。 1．血清免疫球蛋白的測定血清免疫球蛋白（Ig）的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法。由於目前還沒有發現由IgD和IgE缺陷所致疾病，所以通常檢測IgG、IgM、IgA，這三類Ig就可以代表血清Ig的水平（表20-2）。檢測發現三類Ig水平均明顯低下，就可考慮體液免疫缺陷。但在分析兒童Ig水平時，應注意Ig的水平隨年齡而變化。體液免疫功能缺陷首先考慮患者血清Ig水平，如果所有類別Ig水平均降低，即稱為一般性聯低丙種球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平極度低下，或IgG、IgM、IgA，三類Ig總量低於2mg/ml則稱為嚴重低丙種球蛋白血症或無丙種球蛋白血症（agammaglobulinemia）。如果只一種或兩種Ig水平降低，則稱為異常丙種球蛋白血症（dysgammaglobulinemia）。一般性低丙種球蛋白血症多見於繼發性免疫缺陷病。無丙種球蛋白血症常見於原發免疫缺陷病。但是常有約50%IgA缺陷病人無臨床症狀，伴有反復感染的IgA缺陷病人常同時有IgG的缺陷。常規的定量檢測血中Ig的方法是單向免疫擴散和免疫比濁法。
2．分泌型IgA(SIgA）的測定 SIgA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染還包括少量滲出的IgM和IgG，還有細胞免疫的作用。由SIgA缺陷病人常可檢測出針對牛奶或其他食物蛋白的沉澱抗體和自身抗體，說明機體對抗原蛋白質吸收異常，同時也存在免疫調節系統的功能紊亂。一般來說血清IgA缺陷病人常伴有SIgA缺陷，反之亦然。說明在機體中血清IgA和SIgA之間有某種生物相關性。最近也有報導少數SIgA缺陷病人的血清IgA水平正常，因而分別檢查血清中和分泌液中IgA水平還是有必要的。目前用免疫比濁法可較精確地測定分泌液中IgA時和IgM和IgC水平。在用單向免疫擴散和免疫比濁法定量IgA時，因抗血清是針對這兩型共有的α鏈的，故不能區分SIgA和血清來源的IgA。而應用抗分泌小體的抗體用酶免疫分析法，可區分血清IgA和分泌型IgA，並可對SIgA進行定量。常見抗體的測定檢測體液免疫功能的另一種方法是定量測定正常人體內的幾種常見的抗體水平。常見的抗體通常是指嗜異性凝集素、抗溶血素O抗體以及麻疹病毒、脊髓灰質炎病毒的抗體。
在嚴重免疫缺陷病人缺乏上述抗體，常見抗體的缺損可驗證或支持免疫蛋白測定的結果。然而對於比較復雜的免疫缺陷，由於這類抗體主要反映過去的免疫應答能力，此外這種初次應答能力持續期短，易於消退，所以對新近發生的繼發性免疫缺陷的診斷幫助不大。 原發性免疫缺陷和繼發性免疫缺陷均可導致體液免疫功能下降。原發性體液免疫功能缺陷可能由於B細胞分化障礙，細胞內合成Ig功能紊亂或由於抑制性細胞功能過強。繼發性體液免疫功能降低可能由於蛋白質大量丟失，蛋白質吸收障礙、營養不良、免疫抑制治療的副作用，病毒感染（艾滋病）等。在診斷原發性體液免疫功能缺損中可檢查B細胞的數目和功能以確定造成缺損的原因。
1．外周血B細胞數目的檢測首先進行常規的外周血白細胞總數和分類計數檢查，這些結果是評價病人免疫系統功能狀態的基本資料。由於在全血中淋巴細胞所佔比例很少，而T細胞和B細胞不能藉形態學特徵分類，所以外周血B細胞數檢測需先從全血分離出富含淋巴細胞的單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell,PBM）。再依靠B細胞表面有免疫球蛋白分子或其他特徵來檢查B細胞。常用的方法是將待檢者的PBM用FITC標記的免疫抗人Ig作直接免疫熒光染色，在熒光顯微鏡下顯熒光的細胞為帶有表面免疫球蛋白的B細胞。正常人B細胞的約佔PBM的10%。
2．外周血B細胞功能的檢測 分離受檢者血液PBM細胞，體外培養時加入B細胞刺激物如RWM（美洲商陸刺激素）或SAC（金黃色莆萄球菌來源的刺激物）後由B細胞變成Ig分泌細胞的數量。體液免疫功能缺損患者，其PBM對PWM和SACA刺激的反應降低，產生Ig分泌細胞數正常人顯著減少。在進一步檢查這種免疫缺損的原因，則應檢查是由B細胞或TH細胞缺損所致，還是由於TS細胞數量或活性增強引起的。
抗體形成細胞計數：檢查人類Ig分泌細胞是用反向溶血空斑檢測（reversed hemolyticplaque assay）法。將待檢人的PBM、用SPA包被的SRBC（SPA-SRBC）、兔抗人Ig抗體、補體四種成分混合，灌入用兩張玻片做成的小室，密封好，放入溫箱培養1-3小時，，在此期間，作為抗人Ig抗體的免疫IgG的FC段可與SRBC表面SPA結合，當Ig分細胞分泌出遊離的Ig分子時，這些人Ig分子與SRBC表面的抗人Ig抗體結合形成免疫復合物，即可活化補體，使SPA-SRBC溶解，因此在Ig分泌細胞周圍形成一個圓形的溶血區，稱為溶血空斑，每一個溶血的空斑就代表一個Ig分泌細胞。
檢查小鼠Ig分泌細胞應用的溶血空斑試驗比較簡單，即SRBC免疫注射小鼠，4天後取脾製成單個細胞懸液，加入一定量SRBC（靶細胞）混合，在補體參加下，產生抗體的細胞分泌出的Ig與SRBC（抗原）結合在補體作用下，溶血，表現肉眼可見的溶血空斑。計數空斑數代表分泌抗體的細胞數。

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4. 豬病常用的血清學診斷方法有哪些

抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應，這種反應稱為抗原抗體反應，習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應，體外的抗原抗體反應稱為血清學反應，因為抗體主要存在於血清中。

血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原，也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理，設計了許多血清學診斷方法，不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物，或其抗原性成分，而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時，可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統，使其變為可見或可測狀態。

目前已知的血清學診斷方法很多，現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法：

（1）凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種：

①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原（經分離培養後）的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原（丹毒桿菌的純培養液）測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下：

a.材料豬丹毒凝集抗原，玻片，9號針頭，酒精棉球，酒精燈，鉑耳（取血環）等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴，置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭，鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈，以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合，在2～3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集，為陽性反應。否則為陰性。

②試管凝集試驗是一種定量法，用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價，可做臨床的輔助診斷，或用於流行病學監測。在豬場中，本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。

A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原（1∶20倍稀釋），布氏桿菌病陽性血清、陰性血清（1∶25倍稀釋），稀釋液（0.5 %石炭酸生理鹽水），滅菌小試管，1毫升吸管，試管架，待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上，設陽性和陰性血清及抗原對照各1支，測定管4支，以後每增加1個樣品，只需增加4支測定管。

按表10示意稀釋血清，加抗原，完成後每支試管內應含1毫升液體。

5. 病毒的血清學技術有什麼作用

這是檢測病毒的有效辦法。血清學診斷和鑒定病毒的方法很多，常見的有ELISA（酶聯免疫吸附法）、免疫電鏡、瓊脂雙擴散、免疫電泳等。其中，ELISA（酶聯免疫吸附法）為世界公認的植物病毒檢測方法。應用抗血清鑒定植物病毒的親緣關系，檢測花卉的種子、鱗球莖和苗木中傳帶的病毒，是植物病毒檢疫和檢測上常用的快速鑒定和檢驗技術，經常和生物學、電鏡技術等配合使用。

血清學反應的原理是人或高等動物對於侵入自身的有些異體物質產生免疫反應，即異體物質刺激淋巴組織產生相應的球蛋白稱為抗體，能刺激機體產生抗體的異物稱為抗原，抗原與其相對應抗體可以在機體內或機體外進行特異性反應，這種反應可以被用來預防疾病（人或動物）、鑒定和檢測病原物。

抗原的分子具有許多化學活性基團，稱為抗原決定簇，它們的一定結構決定了抗原的特異性。一般來說，抗原決定簇數目愈多，抗原性就愈強。植物病毒是核蛋白，外殼由許多亞基組成，抗原決定簇位於亞基上。植物病毒是良好的抗原，其蛋白外殼，尤其是外殼的表面起著抗原的作用；單鏈核酸雖不能作為抗原，但它與外殼蛋白同時存在時，能增強外殼在動物體內的免疫反應；一般來說，植物病毒比其寄主的正常植物蛋白有更強的抗原性。

抗體是動物機體受到抗原刺激後，由動物機體的免疫活性細胞產生的免疫球蛋白，通常以「Ig」來表示。在抗體中至少含有5種免疫球蛋白，即IgG，IgM，IgD和IgE，其中以IgG最主要，約佔70%～90%。IgG為易彎曲的Y形分子。由4條多肽鏈（2條重鏈和2條輕鏈）借4個2硫鏈連接組成。鏈的一端為氨基端，另一端為羧基端，酶可以降解IgG成為斷片。常用木瓜酶和胃酶。前者將IgG降解成Fab和Fc兩種片段；後者降解為F（ab）2和FC兩種片段。Fab片段有抗體活性，1個Fab與1個抗原分子結合；F（ab）2為雙體，可與2個抗原分子結合。抗體存在於免疫動物的血清或體液中。

植物病毒的抗血清，是將病毒的提純液作為抗原，一般以家兔，有時也以小鼠或母雞等為免疫動物，通過靜脈、肌肉或腹腔等途徑，逐漸增加劑量，多次注射抗原。待抗體產生後，采血，取出其血清即為該病毒的抗血清。免疫家兔產生的抗血清稱為兔抗體；免疫小鼠產生含特異抗體的腹水，採收的腹水，內含「腹水抗體」；免疫母雞，產生含抗體的雞蛋，從蛋黃中提取的抗體稱為「蛋黃抗體」。運用細胞融合技術，將小鼠骨髓瘤細胞和小鼠脾細胞雜交，產生雜交瘤細胞，其增殖能力很強，可在體外連續培養產生抗體。選擇其中能產生某單一抗體的細胞株，所產抗體稱「單克隆抗體」。單克隆抗體開創了在動物體外產生抗體的新時代。

這里介紹幾種常用的血清學檢測技術。

1 免疫雙擴散法

又稱奧氏瓊脂雙擴散法。瓊脂在水中加熱溶解，冷卻時成為凝膠平板，在上打數孔，分別放入抗原和抗體，它們各自向凝膠中擴散，於抗原和抗體比例最適的位置上形成沉澱反應。

具體步驟：按每1～2g（一般用1.2g）瓊脂粉，於100ml生理鹽水中，置沸水浴或家用高壓鍋中溶化，配成1%～2%瓊脂，加0.1%疊氮化鈉，防腐，用吸管或其他物品，將瓊脂均勻地鋪於潔凈的玻璃平板（可用載玻片或裁製成的大小一致的玻板）上，以熱的瓊脂液剛鋪滿為限，約1.5～2mm厚，靜止待凝固，製成的瓊脂板置保濕器皿中待用。檢測時，瓊脂板下放一「孔排列圖」，用打孔器按圖樣打孔。孔的排列方式很多，有梅花形，有7孔，即中間1孔，四周6孔；方陣形，有5孔，即中間1孔，四周4孔（圖1）。打出孔後，用針或吸器將孔中凝膠圓片取出，在孔中加適宜稀釋度的抗原或抗體，抗原孔中應包括已知陽性抗原、待測抗原和健株對照，可以用病健株的汁液或提純病毒液。加滿各孔，持平放於保濕器中數小時或放置至次日，在有黑背景的散射或斜射燈光上方觀察沉澱線。抗原和抗體的適宜濃度是影響反應結果的主要因素，因此必須注意：第一，孔徑和孔距（相鄰兩孔邊的最短距離）要適宜，兩者之比以2∶1為宜，即孔距等於孔的半徑，孔距過大，沉澱線便不能出現或變模糊，並且反應時間拉長，不能很快見到結果；第二，掌握反應物的最適濃度，為此，對所用抗體或抗原，分別作倍比稀釋，先測知兩者反應的最適濃度後，再進行正式反應。

圖1 打孔圖樣