1. 急求微生物細菌的培養方式
1.固體培養法:對好氧菌,有試管斜面法、培養皿瓊脂平板法等平板培養法差鍵;對厭氧菌,有高層瓊脂柱和厭氧培養皿等.
2.液體培養法:試管液態培養;三角瓶虛盯巧淺層液體培養;搖瓶培養(即振盪培養)則薯
希望對你有用!
2. 培養細菌的四個步驟
(1)配置培養基,首先要配置含有營養物質的培養基,原因細菌的生活需要營養物質,而不是瓊脂,瓊脂是一種沸騰冷卻後能膠化成固體的物質.(2)高溫滅菌,對配置的培養基和培養皿進行滅菌,防止其他細菌侵入影響實驗.(3)冷卻後為它接種.(4)在恆溫箱中培養,細菌在溫度適宜的地方繁殖速度比較快. 注意:定期觀察並組詳細記錄.所以在實驗室培養細菌和真菌的一般步驟是:配製培養基-高溫滅菌冷卻-接種--培養.故答案為:配製培養基;高溫滅菌;冷卻接種;恆溫培養
3. 簡述細菌的人工培養程序並列舉常用的人工培養方法
細菌的人工培養程序為:
1、標本(估計菌量少的標本,先增菌培養)
2、根據培養目的,接種於適當的培養基
3、適宜的培養環境,35℃-37℃,18-24h
4、觀察細菌的生長情況,選擇可疑菌落進行分離、鑒定。
根據對氣體的需求,細菌的人工培養方法可分為:
1、需氧培養(需氧菌與兼性厭氧菌):置於空氣中即可,適於大多數細菌;
2、厭氧培養(專性厭氧菌):需在無游離氧的環境中培養;
3、二氧化碳培養(少數細菌如腦膜炎奈瑟菌、布魯菌、空腸彎麴菌等):需在含5%-10%C02環境中培養;4微需氧環境(僅在5%左右的低氧壓環境中才能生長的細菌的培養)。
4. 怎麼做細菌培養
細菌培養是一種用人工方法使細菌生長繁殖的技術。大多數細菌可用人工方法培養,即將其接種於培養基上,使其生長繁殖。培養出來的細菌用於研究、鑒定和應用。
具體培養步驟:
以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法,按次序分為容器、工具的消毒,培養基的制備,接種和培養管理四個步驟。
(一)容器、工具的消毒參考、此處從略。
(二)培養基的制備
1.培養用水
如果培養的光合細菌是淡水種,菌種培養可用蒸餾水,生產培養可用消毒的自來水(或井水)配製。如果培養的光合細菌是海水種,則用天然海水配製培養基,注意在海水中加入磷元素時,不能用磷酸氫二鉀,應用磷酸二氫鉀,不然會產生大量沉澱。
2.滅菌和消毒菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產性培養則把經沉澱砂濾後的水用漂白粉(或漂白液)消毒後使用。
3.培養基配製根據所培養種類的營養需要選擇合適的培養基配方。按培養基配方把所需物質稱量,逐一溶解,混合,配成培養基。也可先配成母液,使用時按比例加入一定的量即可。
(三)接種培養基配好後,應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高,一般為20%~50%,即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4~1∶1,不應低於20%,尤其是微氣培養,接種量更應高些,否則光合細菌在培養液中很難占絕對優勢,影響培養的最終產量和質量。
(四)培養管理光合細菌的培養過程中,管理工作包括日常管理操作和測試,生長情況的觀察、檢查以及出現問題的分析處理等三個方面。
日常管理和測試:
(1)攪拌和充氣:光合細菌培養過程中必須充氣或攪拌,作用是幫助沉澱的光合細菌上浮獲得光照,保持菌細胞的良好生長。小型厭氣培養常用人工搖動培養容器的方法使菌細胞上浮,每天至少搖動三次,定時進行。大型厭氣培養則用機械攪拌器或使用小水泵使水緩慢循環運轉,保持菌體懸浮。微氣培養是通過充氣幫助菌體上浮,因為培養液中溶解氧含量增加,光合細菌繁殖受到抑制,產量下降,所以必須嚴格控制充氣量。一般採用定時斷續充氣,充氣量控制在1~1.5升/(升·h)之間,溶解氧量保持在1×10-6以下。
(2)調節光照度:培養光合細菌需要連續進行照明。在日常管理工作中,應根據需要經常調整光照度。白天可利用太陽光培養,晚上則需要人工光源照明,或完全利用人工光源培養。人工光源一般使用碘鎢燈或白熾燈泡。不同的培養方式所要求的光照強度有所不同。一般培養光照強度應控制在2000~5000lx之間。如果光合細菌生長繁殖快,細胞密度高,則光照強度應提高到5000~10000lx。光照強度可通過調整培養容器與光源的距離或使用可控電源箱調節。
(3)調節溫度:光合細菌對溫度的適應范圍很廣,一船在23~39℃的范圍內均能正常生長繁殖,可不必調整溫度。在常溫下培養也可通過調整,將溫度控制在光合細菌生長繁殖最適宜的范圍內,使光合細菌更好地生長。
(4)酸鹼度的測定和調整:在培養光合細菌的過程中,必須注意酸鹼度的變化。由於光合細菌的大量繁殖,菌液的pH值上升,這意味著光合細菌正處於指數生長期。但當pH值超過最適范圍甚至生長的適應范圍時,光合細菌的生長達到頂點,隨後生長下降。如果能及時調整菌液的酸鹼度,使pH值保持在最適范圍,則光合細菌能繼續生長繁殖。為了延長光合細菌的指數生長期,提高培養基的利用率和單位水體的產量,測定和調整PH值是非常重要的。一船採用加酸的辦法來降低菌液的酸鹼度,醋酸、乳酸和鹽酸部可使用,最常用的是醋酸。在日常的管理工作中,必須每天或隔天測定菌液的pH值,當pH值上升超出最適范圍,即加酸調整。如果在培養過程中不測定、調整酸鹼度,當光合細菌的生長達到一定密度後pH值也上升到9以上,細菌生長受阻,此時應採收或再擴大培養。在培養過程中不調整PH值,獲得的最終產量低。
5. 細菌連續培養有哪些培養方式
細菌連續培養有哪些培養方式
分批培養(Batch Culture)分批培養是指在一個密閉系統內投入有限數量的營養物質後,接入少量微生物菌種進行培養,使微生物生長繁殖,在特定條件下完成一個生長周期的微生物培養方法。補料分批培養(Fed-batch Culture)分批補料式培養是指先將一定量的培養液裝入反應器,在適宜的條件下接種細胞,進行培養,使細胞不斷生長,產物不斷形成,而在此過程中隨著營養物質的不斷消耗,不斷地向系統中補充新的營養成分,使細胞進一步生長代謝,直到整個培養結束後取出產物。分
批補料式培養的特點就是能夠調節培養環境中營養物質的濃度:一方面,它可以避免在某種營養成分的初始濃度過
高時影響細胞的生長代謝以及產物的形成;另一方面,它還能防止某些限制性營養成分在培養過程中被耗盡而影響細胞的生長和產物的形成。同時在分批補料式培養
過程中,由於新鮮培養液的加入,整個過程的反應體積是變化的。根據分批補料控制方式
不同,有兩種分批補料式培養方式:無反饋控制流加和有反饋控制流加。無反饋控制流加包括定流量流加和間斷流加等;有反饋控制流加一般
是連續或間斷地測定系統中限制性營養物質的濃度,並以此為控制指標來調節流加速率或流加液中營養物質的濃度等。分批補料式培養的反應體積不斷變化。連續培養(Continuous Culture)連續培養又叫開放培養,是相對分批培養或密閉培養而言的。連續培養是採用有效的措施讓微生物在某特定的環境中保持旺盛生長狀態的培養方法。具
體地說,當微生物以單批培養的方式培養到指數期的後期時,一方面以一定速度連續流入新鮮培養基和通入無菌空氣,並立即攪拌均勻;另一方面,利用溢流的方
式,以同樣的流速不斷流出培養物。於是容器內的培養物就可達到動態平衡,其中的微生物可長期在指數期的平衡生長狀態和衡定的生長速率上,於是形成了連續生
長。微生物在一定條件下,如果不斷補充營養物質和排除有害的代謝產物,理論上,微生物都可保持恆定的對數生長.通常採用兩種方式:(1)恆濁培養,當微生物在恆濁器中培養進入對數期時,不斷從外界加入新鮮培養基,而同時又流出培養物,用光電池信號控制濁度,以維持恆定的細胞密度.(2)恆化培養,微生物在恆化器中培養,通過控制恆化器中微生物生長所必需營養物的濃度,以保證微生物持續生長.連續培養應用於工業發酵中稱連續發酵,並已實際應用,例如,連續發酵法生產酒精,半連續發酵法生產丙酮、丁醇等。
6. 微生物的培養方法
1.平板劃線分離培養法
對混有多種細菌,採用劃線分離和培養,使原來混雜在一起的細菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:
①分區劃線分離法:此法常用於含菌量較多的細菌的分離。先用接種環挑取標本塗布於瓊脂平板1區(占培養基總面積的¼)並作數條劃線,再於2、3、4區依次劃線。每劃完一個區域,均將接種環燒灼滅菌1次,冷後再劃下一區域,每一區域的劃線均與上一區域的劃線交接1~3次。一個成功分區劃線的平板,培養後分別觀察1區形成菌苔,2區菌落連成線,3區和4區可分離到單個菌落。
②連續劃線分離法:此法常用於含菌量不多的標本或培養物中的細菌分離培養。方法是先將接種物在瓊脂平板上1/5處輕輕塗抹,然後再用接種環或拭子在平板表面曲線連續劃線接種,直至劃滿瓊脂平板表面。
2.瓊脂斜面接種法
主要用於菌落的移種,以獲得純種進行鑒定和保存菌種等。用接種環(針)挑取單個菌落或培養物,從培養基斜面底部向上劃一條直線,然後再從底部沿直線向上曲折連續劃線,直至斜面近頂端處止。生化鑒定培養基斜面接種,用接種針挑取待鑒定細菌的菌落,從斜面中央垂直刺入底部,抽出後在斜面上由下至上曲折劃線接種。
3.穿刺接種法
此法多用於半固體培養基或雙糖鐵、明膠等具有高層的培養基接種,半固體培養基的穿刺接種可用於觀察細菌的動力。接種時用接種針挑取菌落,由培養基中央垂直刺入至距管底0.4cm處,再沿穿刺線退出接種針。雙糖鐵等有高層及斜面之分的培養基,穿刺高層部分,退出接種針後直接劃線接種斜面部分。
4.液體培養基接種法
用於各種液體培養基如肉湯、蛋白腖水、糖發酵管等的接種。用接種環挑取單個菌落,傾斜液體培養管,在液面與管壁交界處研磨接種物(以試管直立後液體淹沒接種物為准)。此接種法應避免接種環與液體過多接觸,更不應在液體中混勻、攪拌,以免形成氣溶膠,造成實驗室污染。
5.傾注平板法
本法主要用於飲水、飲料、牛乳等標本中的細菌計數。取純培養物的稀釋或原標本1ml至無菌培養皿內,再將已融化並冷卻至45~50℃左右的瓊脂培養基15~20ml傾注入該無菌培養皿內,混勻,待凝固後置37℃培養,長出菌落後進行菌落計數,以求出每毫升標本中所含菌數。先數6個方格(每格為1cm2)中菌落數,求出每格的平均菌落數,並算出平皿直徑,然後按下列公式計數,求出每毫升標本中的細菌數。
全平板菌落數=每方格的平均菌落數×лr2
每ml標本中的細菌數=全平板菌落數×稀釋倍數
6.塗布接種法
本法多用於紙片擴散法葯敏試驗的細菌接種。將一定量或適量的菌液加到瓊脂培養基表面,然後用滅菌的L型玻璃棒或棉拭子於不同的角度反復塗布,使被接種液均勻分布於瓊脂表面,然後貼上葯敏紙片,或直接培養,本法經培養後細菌形成菌苔。