1. DNA測序方法有哪些
第1 代測序技術——熒游標記的Sanger 法
第一代就不說了。
第2 代測序技術——循環陣列合成測序法
述第2 代測序技術中, 序列都是在熒光
或者化學發光物質的協助下, 通過讀取DNA 聚合酶
或DNA 連接酶將鹼基連接到DNA 鏈上過程中釋放
出的光學信號而間接確定的. 除了需要昂貴的光學
監測系統, 還要記錄、存儲並分析大量的光學圖像.
這都使儀器的復雜性和成本增加. 依賴生物化學反
應讀取鹼基序列更增加了試劑、耗材的使用, 在目前
測序成本中比例相當大. 直接讀取序列信息, 不使用
化學試劑, 對於進一步降低測序成本是非常可取的.
在一個正在發生突破瓶頸巨變的領域內, 很難准確
預測未來將發生什麼.
第3 代測序技術——直接測序
將基因組DNA 隨機切割成大約100 kb 左右的片段,
製成單鏈並與六寡聚核苷酸探針雜交. 然後驅動結
合了探針的基因組文庫片段通過可定址的納米孔陣
列. 通過每個孔的離子電流均可獨立測量. 追蹤電流
的變化確定探針雜交在每個基因組片段上的精確位
置. 利用基因組片段上雜交探針的重疊區域將基因
組片段文庫排列起來, 建立一組完整的基因組探針
圖. 利用計算機演算法, 獲得完整的基因組序列.