『壹』 發酵液分離的方法主要有哪些
發酵液分離的方法主要有以下幾種：
加熱法；
調節懸浮液的PH值；
凝聚和絮凝
（1）凝聚
凝聚是指向膠體懸浮液中加入某種電解質，在電解質異電離子作用下，膠體粒子的雙電層電位降低，從而使膠體失去穩定性並使粒子相互凝聚成1mm左右大小的塊狀凝聚體的過程。
（2）絮凝
絮凝是指使用絮凝劑將膠體粒子交聯成網，形成10mm左右大小的絮凝團的過程。其中絮凝劑主要起架橋作用。
添加助濾劑；
添加反應劑；
其他方法
(1)添加草酸鹽除去高價無機離子（主要是Ca2+、Mg2+和Fe2+等）
(2)去除雜蛋白的主要方法
①沉澱法：Pro是兩性物質，在酸性溶液中，能與一些陰離子如三氯乙酸鹽、水楊酸鹽、苦味酸鹽等形成沉澱，在鹼性溶液中，能與一些陽離子如Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+和Pb2+等形成沉澱；
② 變性法：其中最常用的是加熱法，還有大幅度調節PH，加酒精、丙酮等有機溶劑或一些表面活性劑等方法；
③吸附法：加入某些吸附劑吸附雜蛋白而將其除去。
『貳』 除去發酵液中雜蛋白質的常用方法
加熱
調pH (草酸，無機酸或鹼)
有機溶劑,表面活性劑
蛋白沉澱劑
『叄』 發酵液預處理的方法有哪些
1.離心 離心是一種常見的固液分離方法, 可以很好的除去菌體和蛋白質等大分子物質, 但由於需要較高的轉速, 而且樣品處理量較小, 導致設備投資和能耗很高, 不適合工業化生產。2.膜過濾 該法是利用具有一定選擇透過性的過濾介質對目標物質進行分離, 常見的有微濾、超濾、納濾, 可根據各物質分子量的不同進行分離。發酵液的預處理一般可以利用超濾膜過濾
『肆』 生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些
① 鹽析法
一般來說，所有固體溶質都可以在溶液中加入中性鹽而沉澱析出，這一過程叫鹽析。在生化制備中,許多物質都可以用鹽析法進行沉澱分離，如蛋白質、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白質沉澱最為常見，特別是在粗提階段。
鹽析法分為兩類，第一類叫Ks分段鹽析法，在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現，用於早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法，在一定離子強度下通過改變PH和溫度來實現，用於後期進一步分離純化和結晶。
② 有機溶劑沉澱法
有機溶劑的沉澱機理是降低水的介電常數，導致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最後析出。該法優點在於：1）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉澱；2）沉澱不用脫鹽，過濾較為容易；3）在生化制備中應用比鹽析法廣泛。其缺點是對具有生物活性的大分子容易引起變性失活，操作要求在低溫下進行。總體來說，蛋白質和酶的有機溶劑沉澱法不如鹽析法普遍。
有機溶劑的選擇首先是能和水混溶，使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮，還有二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。
③ 其他沉澱法
一．等電點沉澱法
兩性電解質分子上的凈電荷為零時溶解度最低，不同的兩性電解質具有不同的等電點，以此為基礎可進行分離。如工業上生產胰島素時，在粗提液中先調PH8.0去除鹼性蛋白質，再調PH3.0去除酸性蛋白質。
利用等電點除雜蛋白時必須了解制備物對酸鹼的穩定性，不然盲目使用十分危險。 不少蛋白質與金屬離子結合後，等電點會發生偏移，故溶液中含有金屬離子時，必須注意調整PH值。 等電點法常與鹽析法、有機溶劑沉澱法或其他沉澱方法聯合使用，以提高其沉澱能力。
二．生成鹽復合物沉澱法
1．金屬復合鹽法
許多有機物質包括蛋白在內，在鹼性溶液中帶負電荷，能與金屬離子形成沉澱。根據有機物與它們之間的作用機制，可分為羧酸、胺及雜環等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如概鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。 蛋白質-金屬離子復合物的重要性質是它們的溶解度對溶液的介電常數非常敏感，調整水溶液的介電常數（如加入有機溶劑），即可沉澱多種蛋白。
2． 有機鹽法
含氮有機酸如苦味酸、苦酮酸、鞣酸等能與有機分子的鹼性功能團形成復合物而沉澱析出。但此法常發生不可逆的沉澱反應，故用於制備蛋白質時，需採用較溫和的條件，有時還需加入一定的穩定劑。
3．無機復合鹽法
如磷鎢酸鹽、磷鉬酸鹽等。
以上鹽類復合物都具有很低的溶解度，極易沉澱析出。若沉澱為金屬復合鹽，可通以H2S使金屬變成 硫化物而除去，若為有機酸鹽或磷鎢酸鹽，則加入無機酸並用乙醚萃取，把有機酸和磷鎢酸等移入乙醚中除去，或用離子交換法除去。值得注意的是此類方法常使蛋白質發生不可逆沉澱，應用時必須謹慎。
三． 選擇性變性沉澱
其原理是利用蛋白質、酶和核酸等生物大分子對某些物理或化學因素敏感性不同，有選擇地使之變性沉澱，以達到分離提純的目的。
此方法可分為：1）利用表面活性劑(三氯乙酸)或有機溶劑引起變性；2）利用對熱的不穩定性,加熱破壞某些組分，而保存另一些組分；3）酸鹼變性。
四．非離子多聚物沉澱法
非離子多聚物是六十年代發展起來的一類重要沉澱劑，最早用於提純免疫球蛋白、沉澱一些細菌和病毒，近年來逐漸廣泛應用於核酸和酶的分離提純。這類非離子多聚物包括不同分子量的聚乙二醇、NPEO、葡聚糖、右旋糖酐硫酸鈉等，其中應用最多的是聚乙二醇。
用非離子多聚物沉澱生物大分子和微粒，一般有兩種方法：1）選用兩種水溶性非離子多聚物組成液液兩相體系，不等量分配，而造成分離。此方法基於不同生物分子表面結構不同，有不同分配系數。並外加離子強度、PH值和溫度等影響，從而擴大分離效果。2）選用一種水溶性非離子多聚物，使生物大分子在同一液相中，由於被排斥相互凝聚而沉澱析出。該方法操作時先離心除去大懸浮顆粒，調整溶液PH值和溫度至適度，然後加入中性鹽和多聚物至一定濃度，冷貯一段時間，即形成沉澱。