Ⅰ 細胞增殖的方式有哪些
細胞增殖的方式是分裂。真核生物的分裂依據過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種最為普遍的分裂方式，是真核細胞增殖的主要方式。減數分裂是生殖細胞形成時的一種特殊旦模的有絲分裂。
增殖的方式有幾種
真核細胞
無絲分裂(蛙的血細胞的分裂方式)、有絲分裂（真核生物體的細胞的分裂方式 ）、減數分裂（真核生物生殖的細胞歲衫的分裂方式 ）
原核細胞
原核生物如細菌最主要的方式是以二分裂這種無性繁殖的方式
細胞增殖
細胞增殖是生物體的重要生命特徵，細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老或死亡的細胞。
多細胞生物可以由一個受精卵，經過細胞的分裂和分化，最終發育成一個新的多細胞個體。必須強調指出，通過細胞分裂，可以將復制的遺傳物質，平均地分配到兩個乎遲腔子細胞中去。可見，細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。
Ⅱ 動物細胞大規模培養的方法有哪些
動物細胞大規模培養常用方法
根據動物細胞的類型，可採用貼壁培養、懸浮培養和固定化培養等三種培養方法進行大規模培養。
一、動物細胞生長特性及培養溫度
1、細胞生長緩慢，易污染，培養需用抗生素
2、細胞大，無細胞壁，機械強度低，環境適應性差
3、需氧少，不耐受強力通風與攪拌
4、群體生長效應，貼壁生長（錨地依賴性）
5、培養過程產品分布細胞內外，成本高
6、原代培養細胞一般繁殖50代即退化死亡
依據在體外培養時對生長基質依賴性差異，動物細胞可分為兩類：
貼壁依賴型細胞：需要附著於帶適量電荷的固體或半固體表面才能生長，大多數動物細胞，包括非淋巴組織細胞和許多異倍體細胞均屬於這一類。
非貼壁依賴型細胞：無需附著於固相表面即可生長，包括血液、淋巴組織細胞、許多腫瘤細胞及某些轉化細胞。
培養細胞的最適溫度相當於各種細胞或組織取材機體的正常溫度。人和哺乳動物細胞培養的最適溫度為35~37℃。偏離這一溫度，細胞正常的代謝和生長將會受到影響，甚至死亡。總的來說，培養細胞對低溫的耐力比高溫高。溫度不超過39℃時，細胞代謝強度與溫度成正比；細胞培養置於39~40℃環境中1h，即受到一定損傷，但仍能恢復；當溫度達43℃以上時，許多細胞將死亡。當溫度下降到30~20℃時，細胞代謝降低，因而與培養基之間物質交換減少。首先看到的是細胞形態學的改變以及細胞從基質上脫落下來。當培養物恢復到初始的培養溫度時，它們原有的形態和代謝也隨之恢復到原有水平。
二、貼壁培養（attachment culture）
是指細胞貼附在一定的固相表面進行的培養。
1、生長特性：貼壁依賴型細胞在培養時要貼附於培養（瓶）器皿壁上，細胞一經貼壁就迅速鋪展，然後開始有絲分裂，並很快進入對數生長期。一般數天後就鋪滿培養表面，並形成緻密的細胞單層。
2、貼壁培養的優點：
容易更換培養液；細胞緊密黏附於固相表面，可直接傾去舊培養液，清洗後直接加入新培養液。
容易採用灌注培養，從而達到提高細胞密度的目的；因細胞固定表面，不需過濾系統。
當細胞貼壁於生長基質時，很多細胞將更有效的表達一種產品。
同一設備可採用不同的培養液/細胞的比例。
適用於所有類型細胞。
3、貼壁培養的缺點：與懸浮培養法相比
擴大培養比較困難，投資大；
佔地面積大；
不能有效監測細胞的生長；
4、細胞貼壁的表面：要求具有凈陽電荷和高度表面活性。對微載體而言還要求具一定電荷密度；若為有機物表面，必須具有親水性，並帶陽電荷。
5、貼壁培養系統：主要有轉瓶、中空纖維（後面專題介紹）、玻璃珠、微載體系統（後面介紹）等。
轉瓶培養系統：培養貼壁依賴型細胞最初採用轉瓶系統培養。轉瓶培養一般用於小量培養到大規模培養的過渡階段，或作為生物反應器接種細胞准備的一條途徑。細胞接種在旋轉的圓筒形培養器-轉瓶中，培養過程中轉瓶不斷旋轉，使細胞交替接觸培養液和空氣，從而提供較好的傳質和傳熱條件。
轉瓶培養具有結構簡單，投資少，技術成熟，重復性好，放大隻需簡單的增加轉瓶數量等優點。 但也有其缺點：勞動強度大，佔地空間大，單位體積提供細胞生長的表面積小，細胞生長密度低，培養時監測和控制環境條件受到限制等。 現在使用的轉瓶培養系統包括二氧化碳培養箱和轉瓶機兩類。
反應器貼壁培養 此種培養方式中，細胞貼附於固定的表面生長，不因為攪拌而跟隨培養液一起流動，因此比較容易更換培養液，不需要特殊的分離細胞和培養液的設備，可以採用灌流培養獲得高細胞密度，能有效地獲得一種產品；但擴大規模較難，不能直接監控細胞的生長情況，故多用於制備用量較小、價值高的生物葯品。
CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反應器是常用的貼壁培養式生物反應器，用於細胞貼壁培養時可用籃式攪拌系統和圓盤狀載體。此載體是直徑6毫米無紡聚酯纖維圓片，具很高表面積與體積比（1200cm2/g），利於獲得高細胞密度。籃式攪拌系統和載體培養是目前貼壁細胞培養使用最多方式，用於雜交瘤細胞、Hela細胞、293細胞、CHO細胞及其它細胞培養。此種方式培養細胞，細胞接種後貼壁快。
三、懸浮培養（suspension culture）
是指細胞在反應器中自由懸浮生長的過程。主要用於非貼壁依賴型細胞培養，如雜交瘤細胞等；是在微生物發酵的基礎上發通起來的。
無血清懸浮培養是用已知人源或動物來源的蛋白或激素代替動物血清的一種細胞培養方式，它能減少後期純化工作，提高產品質量，正逐漸成為動物細胞大規模培養的研究新方向。
四、固定化培養（immobilization culture）
是將動物細胞與水不溶性載體結合起來，再進行培養。上述兩大類細胞都適用，具有細胞生長密度高，抗剪切力和抗污染能力強等優點，細胞易於產物分開，有利於產物分離純化。制備方法很多，包括吸附法、共價貼附法、離子/共價交聯法、包埋法、微囊法等。
1、吸附法:用固體吸附劑將細胞吸附在其表面而使細胞固定化的方法稱為吸附法（adhesion）。操作操簡便、條件溫和、是動物細胞固定化中最早研究使用的方法。缺點是：載體的負荷能力低，細胞易脫落。微載體培養和中空纖維培養是該方法的代表，稍後專門介紹。
2、共價貼附法:利用共價鍵將動物細胞與固相載體結合的固定化方法稱為共價貼附法（attachment by covalent bonding）。此法可減少細胞的泄漏，但須引入化學試劑，對細胞活性有影響，且因貼附而導致擴散限制小，細胞得不到保護。
3、離子/共價交聯法:雙功能試劑處理細胞懸浮液，會在細胞間形成橋而絮結產生交交聯作用，此固定化細胞方法稱為離子/共價交聯法（cross-linking by covalent bonding）。交聯試劑會使一些細胞死亡，也會產生擴散限制。
4、包埋法:將細胞包埋在多孔載體內部製成固定化細胞的方法稱為包埋法（entrapment）。優點是：步驟簡便、條件溫和、負荷量大、細胞泄漏少，抗機械剪切。缺點是：擴散限制，並非所有細胞都處於最佳基質濃度，且大分子基質不能滲透到高聚物網路內部。一般適用於非貼壁依賴型細胞的固定化，常用載體為多孔凝膠，如瓊脂糖凝膠、海藻酸鈣凝膠和血纖維蛋白。
5、微囊法（microencapsulation）:是用一層親水的半透膜將細胞包圍在珠狀的微囊里，細胞不能逸出，但小分子物質及營養物質可自由出入半透膜；囊內是種微小培養環境，與液體培養相似，能保護細胞少受損傷，故細胞生長好、密度高。微囊直徑控制在200-400μm為宜。制備中應注意：
溫和、快速、不損傷細胞，盡量在液體和生理條件下操作；
所用試劑和膜材料對細胞無毒害；
膜的孔徑可控制，必須使營養物和代謝物自由通過；
膜應有足夠機械強度抵抗培養中攪拌。