測定氨基酸態氮有哪些方法

㈠ 用甲醛法測定醬油中氨基酸態氮的操作方法

醬油測的應該是氨基態氮的含量吧。方法如下：
1 校正PH計。
2 吸取試樣5ml於容量瓶中，定容100ml。
3 吸取稀釋液20ml於燒杯瓶中,將燒杯置於電磁攪拌器上,電極插入燒杯內試樣中適當位置。
4 開動電磁攪拌器,先用0.1mol/L氫氧化鈉溶液慢慢中和試樣中的有機酸，當pH達到8.2左 右時,記錄消耗0.1mol/L氫氧化鈉標准滴定溶液的毫升數。然後慢慢加入10mL中性甲醛溶液，至PH值穩定，再用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調至pH9.2,並保持1min不變。記錄消耗0.1mol/L氫氧化鈉標准滴定溶液的毫升數。
4 結果表示 測定結果表示見公式:
c·V·K×14
X = ———————-×100
m
式中：X--每100g(或100mL)試樣中氨基態氮的毫克數,mg/100g(或mg/100mL);
c--氫氧化鈉標准滴定溶液的濃度,mol/L;
V--加入中性甲醛溶液後,滴定試樣消耗0.1mol/L氫氧化鈉標准滴定溶液的體積,mL;
m--試樣的質量,g(或體積mL);
K--稀釋倍數；
14--1 mL 1N氫氧化鈉標准滴定溶液相當於氮的毫克數。

㈡ 食品中氨基酸態氮測定的方法有哪些

凱氏定氮法、全自動凱氏定氮儀、液相、紅外

㈢ 醬油中氨基酸態氮含量的測定是什麼

食品中的氨基酸組成十分復雜，在一般的常規檢驗中，多測定食品中氨基酸的總量，即氨基酸態氮的總量，通常採用鹼滴定法進行簡易測定。

氨基酸含有羧基和氨基，利用氨基酸的兩性作用，加入甲醛固定氨基的鹼性，使羧基顯示出酸性，用氫氧化鈉標准溶液滴定後進行定量，用酸度計測定終點。

蛋白質是一類含氮的高分子化合物，基本組成單位是氨基酸。參加蛋白質合成的氨基酸共有二十多種，其中有9種（賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、組氨酸、蛋氨酸和緬氨酸）人體自身不能合成，必須由食物中供給。

否則人體就不能維持正常代謝的進行，稱為必需氨基酸。蛋白質是生命的基礎，生命現象是通過蛋白質來體現的。蛋白質是人體組織細胞的重要組成部分，人體重量的18%由蛋白質構成。

試驗：

准確吸取醬油5.0ml置於100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度後搖勻吸取20.0ml置於100ml燒杯中，加水60ml，插入酸度計的指示電極作為參比電極。

開動磁力攪拌器（若是冬季需加熱到二十攝氏度左右），再用0.05mol/LNaOH標准溶液滴定酸度計指示Ph-8.2，記錄用去氫氧化鈉標准使用液的體積（ml）（按總酸計算公式可以計算出醬油的總算含量）。

向上述溶液中准確加入甲醛溶液10ml，搖勻，繼續用0.05m01/LNaOH標准溶液滴定滴定至Ph-9.2，記錄用去氫氧化鈉標准使用液的體積（ml），供計算氨基酸態氮含量用。

醬油中的氨基酸態氮是氨基酸含量的特徵指標，含量越高醬油的鮮味越強，質量越好。醬油分兩種：

1、釀造醬油（Fermented soy sauce）：以大豆和/或脫脂大豆、小麥和/或麩皮為原料，經微生物發酵製成的具有特殊色、香、味的液體調味品。按GB18186-2000要求其理化指標應符合規定。

2、配製醬油（Blended soy sauce）以釀造醬油為主體，與酸水解植物蛋白調味液、食品添加劑等配製而成的液體調味品。按SB10336-2000（國家國內貿易局行業標准）要求其理化指標應符合規定。

㈣ 檢驗氨基酸用什麼方法

你若是問蛋白質，我可以直接告訴你又雙縮脲試劑（中學階段），但氨基酸的檢驗比蛋白質麻煩多了。 一、氨基酸的分離和檢測氨基酸的分離和檢測手段，以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。隨著高效液相色譜及填料的發展，HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優越性。但大多數氨基酸無紫外吸收和熒光發射特性，為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性，通常將氨基酸衍生，衍生方式有柱前衍生法與柱後衍生法。HPLC與各種衍生相結合的氨基酸分析技術，構成了具有廣泛適用性的現代氨基酸分析技術。
二、鑒定是哪種氨基酸，不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反應 （ninhydrin reaction） 茚三酮（弱酸環境加熱） 紫色（脯氨酸、羥脯氨酸為黃色） （檢驗α－氨基）
2、坂口反應 （Sakaguchi reaction） 丙氨酸
α-萘酚+鹼性次溴酸鈉 紅色 （檢驗胍基 精氨酸有此反應）
3、米隆反應（又稱米倫氏反應） HgNO3+HNO3+熱 紅色 （檢驗酚基 酪氨酸有此反應，未加熱則為白色）
4、Folin-Ciocalteau反應（酚試劑反應） 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 （檢驗酚基 酪氨酸有此反應）
5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 （檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應）
6、Hopkin-Cole反應（乙醛酸反應） 加入乙醛酸混合後徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 （檢驗吲哚基 色氨酸有此反應）
7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 （檢驗吲哚基 色氨酸有此反應）
8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 （檢驗巰基 半胱氨酸有此反應）
9、Sulliwan反應 1，2萘醌、4磺酸鈉+Na2SO3 紅色 （檢驗巰基 半胱氨酸有此反應）
10、Folin反應 1，2萘醌、4磺酸鈉在鹼性溶液 深紅色 （檢驗α－氨基酸）
三、關於氨基酸態氮的測定：（定量分析）1.雙指示劑甲醛滴定法2.電位滴定法 另請參閱： http://www.docin.com/p-69133358.html

㈤ 調味料中氨基酸態氮檢測具體步驟急！！！

電位甲醛滴定法【醬油衛生標準的分析方法Method for analysis of hygienic standard of soybean sauce】（第一法甲醛值法）
（一）原理
氨基酸有氨基及羧基兩性基團，它們相互作用形成中性內鹽，利用氨基酸的兩性作用，加入甲醛以固定氨基的鹼性，使羧基顯示出來酸性，用氫氧化鈉標准溶液滴定後定量，根據酸度計指示pH值，控制終點。
R—CH—COOH——→R—C—C=O
∣ ∣ ∣
NH2 H3N—O

R—CH—COOH+HCHO——→R—CH—COOH
∣ ∣
NH2 NH—CH2OH

R—CH—COOH +NaOH=R—CH—COONa
∣ ∣
NH—CH2OH NH—CH2OH
（二）試劑
1、甲醛（36%）：應不含有聚合物。
2、氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]
（三）儀器
1、pHS—25型酸度計：包括標准緩沖溶液和KCL飽和溶液；
2、20mL移液管；3、10mL微量滴定管；4、100mL容量瓶；
5、250mL燒杯；

（四）測定方法
1、吸取5.0mL試樣，置於100mL容量瓶中，加水至刻度，混勻，備用。
2、吸取上述稀釋液20.00mL置於200mL燒杯中，加水60mL水，插入電極，開動磁力攪拌器，用氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH)=0.050mol/L]滴定至酸度計指示pH8.2，記錄消耗氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升數，（可計算總酸含量）。
3、向上述溶液中准確加入10.0mL甲醛溶液，混勻。再用氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]繼續滴定至pH9.2，記錄加入甲醛後滴定所消耗氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升數。
4、取80mL水，先用氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至酸度計指示pH8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，混勻,再用氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至pH9.2，記錄加入甲醛後滴定所消耗氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升數。

（五）結果計算
試樣中氨基酸態氮的含量為：

式中：X—試樣中氨基酸態氮的含量，g/100Ml；
V1—測定用試樣稀釋液加入甲醛後消耗標准鹼液的體積，mL；
V2—測定空白試驗加入甲醛後消耗標准鹼液的體積，mL；
C—氫氧化鈉標准溶液的濃度，mol/L；
0.014—與1.00 mL氫氧化鈉標准滴定溶液[c(NaOH )=1.000mol/L]相當的氮的質量，g；
（六）注意事項
1、加入甲醛後放置時間不宜過長，應立即滴定，以免甲醛聚合，影響測定結果。
2、由於銨離子能與甲醛作用，樣品中若含有銨鹽，將會使測定結果偏高。
3、計算結果保留兩位有效數字。精密度:在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%

㈥ 氨態氮的測定方法

一、目的與原理：

1、了解掌握單指示劑與雙指示劑甲醛滴定法測氨態氮總量的方法與原理：

二、單指示劑甲醛滴定法：

(一)原理：氨基酸具有酸、鹼兩重性質，因為氨基酸含有-COOH基顯示酸性，又含有-NH2基顯示鹼性。由於這二個基的相互作用，使氨基酸成為中性的內鹽。當加入甲醛溶液時，-NH2與甲醛結合，其鹼性消失，破壞內鹽的存在，就可用鹼來滴定-COOH基，以間接方法測定氨基酸的量，反應式可能以下面三種形式存在。

（二）試劑

(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞為指示劑，用1N NaOH溶液中和。

(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液。

(3)0.100N氫氧化鈉標准溶液。

(三)操作步驟：

稱取一定量樣品(約含20毫克左右的氨基酸)於燒杯中(如為固體加水50毫升)，加2-3滴指示劑，用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。加入中性甲醛20毫升，搖勻，靜置1分鍾，此時藍色應消失。再用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。記錄兩次滴定所消耗的鹼液毫升數，用下述公式計算

計算：

氨基酸態氮(％)=( N V×0.014×100)/W

式中：

N：NaOH標准溶液當量濃渡。

V：NaOH標准溶液消耗的總量(m1)

W：樣品溶液相當樣品重量(克)。

0.014：氮的毫克當量。

三、雙指示劑甲醛滴定法：

(一)原理：

與單色法相同，只是在此法中使用了兩種指示劑。從分析結果看，雙指示劑甲醛滴定法與亞硝酸氮氣容量法(此法操作復雜，不作介紹)相近單色滴定法稍偏低，主要因為單指示劑甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作為麝香草酚酞的終點。PH值在9.2，而雙指示劑是以氨基酸溶液的PH值作為中性紅的終點，PH值為7.0，從理論計算看，雙色滴定法較為准確。

(二)試劑：

(1)三種試劑同單指示劑法

(2)0.1％中性紅(50％乙醇溶液)

(三)操作步驟：

取相同的兩份樣品，分別注入100毫升三角燒瓶中， 一份加入中性紅指示劑2-3滴，用0.100N NaOH溶液滴定終點(由紅變琥珀色)，記錄用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，搖勻，以0.100NNaOH准溶液滴定至淡藍色。按下述公式計算。

計算：

氨基酸態氮(％)=( N(V2-V1)×0.014)/W×100

式中：

V2：用麝香草酚酞為指示劑時標准鹼液消耗量(毫升)

V1：用中性紅作指示劑時鹼液的消耗量(m1)。

N：標准鹼液當量濃度。

W：樣品的重量(克)。．

0.014：氮的毫克當量。

注意事項：

測定時樣品的顏色較深，應加活性炭脫色之後再滴定．

㈦ 氨基酸態氮的測定

氨基酸態氮的測定：

1概述2氨基酸態氮的測定一、概述=蛋白質可以被酶、酸或鹼水解，其水解的最終產物為氨基酸。二、氨基酸態氮的測定