⑴ DNA怎麼提取
DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式：酶法。根據核酸分離純化方式的不同有；硅質材料、陰離子交換樹脂等。
提取DNA總的原則:
1.保證核酸一級結構的完整性；
2.核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；
3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；
4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。
例如 : 用酶法提取
DNA提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
工具/原料: 研磨棒、研磨儀或者組織破碎儀 , 氯仿：異戊醇（24:1）或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱
方法/步驟 :
使用研磨儀、研磨棒或者使用超聲破碎細胞的方法破碎細胞，加入去污劑，如sds等，除去膜脂。
去除細胞內的蛋白質，包括與DNA結合的組蛋白，通過加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚／氯仿抽提等方法去除。
加入RNA酶去除RNA，如實驗不嚴密，可省略此步。
沉澱DNA，需在冷乙醇或異丙醇中沉澱，放在冰箱-20℃沉澱30分鍾以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起發生沉澱。
總結: DNA提取方法有下面⑦種
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。
七.鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。
⑵ 植物DNA提取的原理和方法是什麼
原理就是去掉植物細胞壁
細胞膜
質體
線粒體
葉綠體
剩下細胞核了。就是DNA了。
通常採用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由於植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易於破碎，並減少研磨過程中各種酶類的作用。
十二烷基肌酸鈉(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化銨(hexadyltrimethyl
ammomum
bromide，簡稱為CTAB)、十二烷基硫酸鈉(sodium
dodecyl
sulfate，簡稱SDS)等離子型表面活性劑，能溶解細胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，從而使DNA得以游離出來。再加入苯酚和氯仿等有機溶劑，能使蛋白質變性，並使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很強，經離心後即可從抽提液中除去細胞碎片和大部分蛋白質。上清液中加入無水乙醇使DNA沉澱，沉澱DNA溶於TE溶液中，即得植物總DNA溶液
⑶ 對植物dna的提取最好的方法是哪種
CTAB快速提DNA法：
取植物材料少量,可用液氮冷凍,沒有的話不凍也可以,材料粉碎後快速加入CTAB 100微升,65度3-5min,加入相同體積的酚氯仿,混勻,12000轉10分鍾,取上清至另一管中(注意,一定不要帶入酚氯仿,否則殘留的酚會使TAQ酶失活而導致PCR結果假陰性),加入十分之一體積的醋酸鈉,再加入兩倍體積的無水乙醇,冰上沉澱10分鍾,離心,去上清,晾乾或DNA乾燥儀乾燥,加入水10-20微升,取1-3微升做PCR.
⑷ 植物DNA的提取方法
博凌科為新型快速
植物
基因組
DNA提取試劑盒
改進的CTAB植物DNA抽提液（添加多種針對植物
特點
的
多糖
、多酚去除成份）迅速裂解細胞和滅活細胞內
核酸酶
，氯仿抽提後通過離心清除多糖、多酚和
蛋白質
，
上清
加入異丙醇離心
沉澱
基因組DNA，進一步去除其它各種
雜質
，然後基因組DNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附於離心柱內硅基
質膜
，再通過一系列快速的漂洗－離心步驟,
進一步將多糖，多酚和細胞
代謝物
，蛋白等雜質去除，
最後低鹽的洗脫
緩沖液
將基因組DNA從硅基質膜上洗脫。
試劑盒特點:
◆
離心吸附柱內硅基質膜全部採用進口特製
吸附膜
，柱與柱之間
吸附量
差異極小，
可重復性
好。克服了國產
試劑盒
膜質量不穩定的弊端。
◆
不需要使用有毒的
苯酚
，氯仿等試劑。
◆
快速，簡捷，單個
樣品
操作一般可在1小時內完成。
⑸ 有什麼最簡單的方法提取植物的DNA
將植物放入研磨器中，加入洗滌劑研磨，然後倒入燒杯，加無水乙醇，用玻璃棒輕輕攪拌，會發現白色絲狀物纏繞在玻璃棒上，這就是DNA
⑹ 植物dna提取的原理和方法其中乙醇和氯仿一異成醇各起什麼作用
植物DNA提取方法是採用CTAB法。
CTAB，是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽(>0.7mol/L) 濃度下可溶,並穩定存在,但在低鹽濃度(0.1～0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸復合物就因溶解度降低而沉澱,而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解於溶液中。通過有機溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。經離心棄上清後,CTAB-核酸復合物再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB。
無水乙醇：沉澱DNA。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉澱劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易於聚合。
氯仿：克服酚的缺點；加速有機相與液相分層。
異戊醇：減少蛋白質變性操作過程中產生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產生。另外，異戊醇有助於分相，使離心後的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。
⑺ 植物的基因怎樣提取
植物DNA提取方法
方法一：
1.取兩片幼嫩新鮮葉片，置於預冷的研缽中，倒入適量液氮，迅速研磨成粉末狀，隨後加入3ml預熱的2%CTAB抽提緩沖液和50ul抗氧化劑2-巰基乙醇，繼續研磨成略有流動性的糊狀或粥狀，轉入1.5ml的離心管中，於65℃水浴鍋中保溫約60min。
2.待混合物冷卻至室溫後加入等600ul的CI（氯仿：異戊醇=24：1）溶液混勻，輕輕顛倒離心管幾次使管內混合物成乳濁液，常溫下10000rpm離心10min,取上清液轉入另一干凈的離心管中。
3.重復步驟（2）一次。
4.取步驟（3）上清液加入2.5倍體積無水乙醇，仔細混勻，-20冰箱30min以上，沉澱DNA 4℃，12000rpm離心10min。
5.棄去上層有機溶劑，加500ul75%乙醇洗滌沉澱，4℃下8000rpm離心5min,棄去上清，洗滌沉澱3次。
6.倒置或者37度培養箱烘乾。
7.加50ulTE緩沖液溶解DNA，於-20℃冷藏備用。
方法二：
1. 在50ml離心管中加入20ml提取緩沖液Ⅰ, 60℃水浴預熱。
2. 植物5-10g, 剪碎, 在研缽中加液氮磨成粉狀後立即倒入預熱的離心管中, 劇烈搖動混勻, 60℃水浴保溫30-60分鍾(時間長,DNA產量高), 不時搖動。
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 顛倒混勻(需帶手套, 防止損傷皮膚)，室溫下靜置5-10分鍾, 使水相和有機相分層(必要時可重新混勻)。
4. 室溫下5000rpm離心5分鍾。
5. 仔細移取上清液至另一50ml離心管,加入1倍體積異丙醇,混勻,室溫下放置片刻即出現絮狀DNA沉澱。
6. 在1.5mleppendorf中加入1ml TE。用鉤狀玻璃棒撈出DNA絮團,在干凈吸水紙上吸干,轉入含TE的離心管中,DNA很快溶解於TE。
7. 如DNA不形成絮狀沉澱,則可用5000rpm離心5分鍾, 再將沉澱移入TE管中。這樣收集的沉澱,往往難溶解於TE,可在60℃水浴放置15分鍾以上，以幫助溶解。
8. 將DNA溶液3000rpm離心5分鍾,上清液倒入干凈的5ml離心管。
9. 加入5μlRNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分鍾, 除去RNA(RNA對DNA的操作、分析一般無影響，可省略該步驟）。
10. 加入1/10體積的3mol/L NaAc及2×體積的冰乙醇,混勻,-20℃放置20分鍾左右,DNA形成絮狀沉澱。
11. 用玻棒撈出DNA沉澱,70%乙醇漂洗,再在干凈吸水紙上吸干。
12. 將DNA重溶解於1ml TE, -20貯存。
13. 取2μlDNA樣品在0.7% Agarose膠上電泳, 檢測DNA的分子大小。同時取15μl稀釋20倍, 測定OD260/OD280, 檢測DNA含量及質量。
方法三：
植物DNA的SDS提取法：
試驗試劑：
1、研磨緩沖液：稱取59.63gNaCl，13.25g檸檬酸三鈉，37.2gEDTA－Na分別溶解後合並為一，用0.2mol/L的NaOH調至pH7.0，並定容至1000ml。
2、10×SSC溶液：稱取87.66gNaCl和44.12g檸檬酸三鈉，分別溶解，一起定容至1000ml。
3、1×SSC溶液：用10×SSC溶液稀釋10倍。
4、0.1×SSC溶液：用1×SSC溶液稀釋10倍。
5、Rnase溶液：用0.14mol/LNaCl溶液配製成25mg/ml的酶液，用1mol/LHCl，pH至5.0，使用前經80℃水浴處理5min（以破壞可能存在的Dnase）。
6、氯仿－異戊醇：按24ml氯仿和1ml異戊醇混合。
7、5mol/L高氯酸鈉溶液：稱取NaClO4·H2O 70.23g，先加入少量蒸餾水溶解再容至100ml。
8、SDS（十二烷基硫酸鈉）化學試劑的重結晶：將SDS放入無水酒精中達到飽和為止，然後在70～80℃的水浴中溶解，趁熱過濾，冷卻之後即將濾液放入冰箱，待結晶出現再置室溫下涼干待用。
9、1mol/LHCl。
10、0.2mol/LNaOH。
11、二苯胺乙醛試劑：1.5g二苯胺溶於100ml冰醋酸中，添加1.5ml濃硫酸，裝入棕色瓶，貯存暗處，使用時加0.1ml乙醛液〔濃乙醛：H2O＝1：50（V／V）〕。
12、1.0mol/L高酸溶液（HClO4）。
13、0.05mol/LNaOH。
14、DNA標准液：取標准DNA25mg溶於少量0.05mol.L-1NaOH中，再用0.05mol/LNaOH定容至25ml，後用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中，加5.0ml1mol/LHClO4，混合冷卻後用0.5mol/LHClO4定容至刻度，則得100μg/ml的標准溶液。
⑻ 粗提取植物DNA的實驗步驟和原理
提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理：CTAB是一種陽離子去污劑,具有從低離子強度溶液中沉澱核酸與酸性多聚糖的特性。在高離子強度的溶液中(>0.7mol/L NaCl)，CTAB與蛋白質和多聚糖形成復合物，只是不能沉澱核酸。通過有機溶劑抽提，去除蛋白，多糖，酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。步驟如下：
1）取材料，加液氮研磨成粉末狀，迅速移入1.5 ml Eppendorf管中；
（2）加入800 μl的CTAB提取緩沖液，混勻（CTAB在65℃水浴預熱），每5min輕輕震盪幾次，20min後12000 r/min，離心15 min；
（3）小心吸取上清液，加入等體積的酚：氯仿（各400μl）溶液，混勻，4℃，12000 r/min，離心10 min；
（4）小心吸取上清液，加入等體積的氯仿，混勻，4℃，12000 r/min，離心10 min。
（5）重復步驟（4）1-2次，以蛋白層不出現為止；
（6）取上清，-20℃沉澱1h，4℃，12000 r/min，離心10 min；
（7）棄去上清液，用70%乙醇洗滌沉澱2次；
（8）室溫下乾燥後（一般乾燥5-15 min），溶於30-50 μl DEPC去離子水中，於-20℃或者-70℃下保存備用。