『壹』 請分別簡述，植物組織培養、植物細胞培養、植物原生質體培養的過程。
植物組織培養：
1
植物進行切割形成外植體（芽
莖
根尖等）
2
外植體離體培養脫分化形成愈傷組織（這里需要高濃度的生長素和細胞分裂素強烈促進形成愈傷組織，同時要暗培養，防止分化成其他組織）
3
愈傷組織在分化形成植株（要一定光照，細胞分裂素/生長素
比值高時，形成芽
，低時，形成根）
條件：整個過程中要確保無菌，且必須有植物生長所需營養：無機鹽，糖類等，尤其是激素）
原理：細胞全能性
植物細胞培養：目的與植物組織培養不同，前者要獲得植株，而細胞培養要獲得細胞次級代謝產物
1
2與組織培養相同
3
愈傷組織在液體培養基中形成懸浮細胞，過程中獲得代謝產物（懸浮細胞的特點是細胞質豐富，液泡小而細胞核大）
植物體細胞雜交：1去細胞壁，在0.5-0.6mol/l的甘露醇溶液，纖維素酶，果膠酶作用下，分解細胞壁，得到原生質體（一掘侍般都用纖維素酶）
2
利用物理方法：離心，震盪等，化學方法：聚二乙醇（一般都這個）得到雜交細胞
3
誘導細胞，形成植株，再生細胞壁（新植株生成標志）。注意，這里要進行篩選肆櫻，得到AA
BB
AB細胞，我們需要的是AB細胞！
條件：同上
原理：細胞膜裂散叢的流動性
優點：克服遠緣雜交不親和的障礙（這句話出現頻率很高的）
純手打！不懂私信
『貳』 原生質體是怎樣培養的
原生質體培養和其他組織培養一樣，培養基中需要氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫及鐵等大量元素，以及錳、鋅、鋁、鉛猜銅和鈷等微量元素營養源，同時還需要糖類物質和許多有機營養，添加適當濃度的激素。
與細胞培養相比，只去除了細胞壁，因此，原生質體培養基一般是改變的細胞培養基，用於培養植物細胞的礦質鹽成分已經被調彎激汪整到使之滿足培養原生質體的特殊需要。原生質體培養基通常含有一種或更多種的氨基酸。
最方便的方法是加入0.01%0.25%的不含維生素的酪蛋白氨基酸或酪蛋白水解物。另加入15mmolL的L-甘氨酸能提高生長速度。大部分原生質體培養基含有一種或多種植物生長素，另外還含有一種或多種細胞分裂素，以促進原生質體分裂和生長。
只有幾埋仔種原生質體的生長不需要在培養基中添加生長調解劑。一般來說，原生質體培養剛開始時用較高濃度的NAA（13mgL）和較低濃度的BAP或玉米素（0.11.0mgL）。原生質體培養基中應當去除銨（NHsuperscript+不能過多），因為它對原生質體的生存是有害的，而鐵、鋅等離子的量也應當減少。另外，鈣的濃度應當比通常培養細胞所需的濃度增加24倍，提高鈣的濃度能改善膜的穩定性。
『叄』 什麼是原生質體的微室培養法
有微室培養法和紙橋培養法。微室培養法（culture：in：a：microchamber）是指人工製造一個微室，消汪將原生質體培養在微室中的少量培養基中，使其分裂增殖形成細胞團的方法。這一方法是由Jones等人（1960）設計的，其中用條件培養基（廳橋賣conditioned：medium）代替了看護組織，將原生質體置於微室中進行培養。
這個方法的主要優點是：在培養過程中可以連續進行顯微觀察，將一個細胞的生長、分裂和形成細胞團的全過程記錄下來。
微室培養法的具體做法是先由懸浮培養物中取出一滴只含有一個原生質體的培養液，置於一張無菌載玻片上，在這滴培養液的四周與之隔一定距離加上一圈石蠟油，構成微室的「圍牆」，在「圍牆」左右兩側再各加一滴石蠟油，每滴之上置一張蓋玻片作為微室的「支柱」，然後將第三張蓋架在兩個「支柱」之間，構成微室的「屋頂」，於是那滴含有單細胞的培養液就被覆蓋於微室中。構成「圍牆」的石蠟油能阻止微室中水分的丟失，但不妨礙氣體的交換。
最後把上面築有微室的整張載玻片置於培養皿中進行培養。當細胞團長到一定大小後，揭掉蓋玻片，把細胞團轉移到新鮮的液體或半固體培養基上進行培養。在難以獲得足夠數量的細胞時，可採用微室培養法進行培養，以保證原生質體的培養成功。紙橋培養法（paper：wick：method）是植物莖尖分生組織培養常用的方法，有時也可用於原生質體培養。其具體做法是將濾紙的兩端浸入液體培養基中，使濾紙的中央部分露出培養基表面，將所要培養的細胞放置於濾紙上進行培養。
Bigot（1976）對扮逗該方法進行了改進，製作一特製三角瓶，使其底部一部分向上突起，在突起處放上濾紙，用這種方法的優點是培養物不易乾燥。
『肆』 原生質體怎麼培養成新植株
解析：原生質體指的是有細胞壁的細胞除去細胞壁以後燃宴做餘下的部分，稱原生質體。對於植物細胞而言，它的原生質體是高度分化的細胞，所以皮衡先脫分化或去分化形成愈傷組織，影響植物細胞脫分化產生愈傷組織的一個重要因素是植物激素（生長素和細胞分裂素）。愈傷組織再分化就能形成根芽的胚狀結構。再分化就形成植物體。所以原生體要培養成新祥納植株，怎個過程就得用到植物組織培養。
『伍』 木本植物原生質的體培養有哪些培養基
木本植物原生質體培養多採用液體淺層培養，基本培養基多用MS、改良MS和KM8P，所添加的外源激素依培養材料及培養時期而定，主要用細胞分裂素和生長素，一般原生質體培養形成微愈傷組織較愈傷組織增殖需較低的外源激素，如從棗胚性懸浮細胞獲得的原生質體在KM8P+NAA：0.3+ZT：0.2經70d液體淺層培養可獲得微愈傷組織，而增殖則在KM8P+NAA：3+ZT：0.2或12MS+NAA：3+ZT：2的瓊脂培養基上進行。原生質體的植板密度也是影響其培養成功的關鍵因素之一。
密度過大，原生質體再生細胞團小，影響生長；密度過小，原生質體內含物外滲。不同種類植物原生質體的最適培養密度不同，如蘋果上要求至少5×10superscript4superscript個mL，棗則為5×10superscript5superscript個mL，山杏為0.5×10superscript5superscript個mL，即使同一基因型、不同材料的原生質體，其最適的植板密度也不盡相同，如獼猴桃有的為1×10superscript6superscript個mL，有的為1×10superscript5superscript個mL，有的為5×10superscript4superscript個mL，蘋果莖原生質體較葉肉需較高的植板密度，具體操作時應因樹種、品種等材料類型不同而進行先行試驗。誘導原生質體融合普遍使用NaNOsubscript3subscript處理、高pH—高鈣處理、聚乙醇（PFG）處理和電融合方法，雖然融合頻率隨著融合技術的不斷改進有了很大提高，但由於融合是在原生和蘆質群體的條件下進行、所以不可避免地增加了同一親本的原生質體之間相互融合扒棚慎及多個原生質體融合篩選的難度。春敬
因此，發展一對一的原生質體融合技術將成為今後的發展方向，在落葉果樹上已獲成功的有獼猴桃及蘋果。
『陸』 原生質體要怎樣培養
將有生活力的原生質體在適當的培養基和培養條件下培養，很快就開始細胞壁再鎮枝液生和細胞分裂的過程。約12個月後搭讓，通過細胞的持續分裂，在培養基上出御物現肉眼可見的細胞團。細胞團長到24mm左右，即可轉移到分化培養基上，誘導芽和根長成完整的植株。
『柒』 原生質體的固體培養法有哪些步驟
固體培養的步驟為：原生質體團鍵世移入培養基→1體積含原生質體的培養基與1體積含瓊脂（40攝氏度）的培養基混合→倒轉培養皿在25攝氏度下培養→原生質體塌肢重新產生細胞壁並分裂成細胞團→細胞團於瓊脂糖基亮瞎質中傳代培養，培養基中減少滲壓劑以利於愈傷組織的形成→誘導分化成植物的根、莖。
『捌』 植物是怎樣進行原生質體培養與體細胞雜交的
植物原生質體是指植物細胞除去細胞壁後質膜包圍的裸露細胞原生質培養是給予游離原生質體適當的培養條件，使之重新形成細胞壁，並分裂增殖，直至分化形成再生植株的過程不同物種的原生質體融合多採用電融法和化學融合法在原生質體培養過程中更容易產生變異，其中包括抗病性變異，通過抗病體細胞突變體篩選，可獲得抗病新種質，用於抗病育種原生質體可作為基因工程的受體，通過脂質體介導法PEG(聚乙二醇)融合法等，將外源基因導入植物細胞
通過原生質體融合(protoplastfusion)創造雜種的方法稱為體細胞雜交(somatichybridization)由於不經過有性過程，避過了有性雜交不親和的生殖障礙，適於轉移遠緣種屬的抗病基因例如，可以利用體細胞雜交的方法，將野生歐白芥或亞麻芥對黑斑病(Alternariabrassicae)的抗病性導入甘藍，得到高度抗病的體細胞雜種(Hansen等，1997;Sigareva等，1999)用蕪菁和抗細菌性軟腐病的甘藍作親本，經原生質體融合，獲得了體細胞雜種，有的個體抗病性甚至高於抗病親本(Ren等，2000)連勇等(2004)應用原生質體電融合技術獲得了茄子近緣野生種與栽培種(六葉茄)的種間體細胞融合四倍體再生植株，帶有抗病基因，部分植株能正常結果
『玖』 制備原生質體的方法有哪些
該方法包括以下步驟：（1）用0．5－1m的甘露醇溶液處理植物細胞，然後收集細胞；（2）用酶解液酶解步驟（1）收集的細胞；（3）在經過步驟（2）處理的體系中加入a溶液，除去未酶解的細胞凝塊後進行離心處理，收集沉賀如蔽淀，即得到原生質體；所述a溶液為水溶液，溶質為橡判如下終濃度的物質：100－200mmnacl，100－150mmcacl↓［2］，2－10mmkcl，5－10mm葡萄糖，1－3mm脂肪酸甲酯磺酸鈉；所述a溶液的ph為5．5－5．8。該方法主要適用於by2懸浮細胞和擬南芥懸浮細胞原生質體的制備。用本發禪州明的方法分離的懸浮細胞原生質體得率高，細胞生長狀態好，結合peg介導的瞬時轉化可滿足對目的基因進行細胞學定位，免疫共沉澱，western雜交等多種研究目的。