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高中生物分離方法有哪些

發布時間:2023-05-19 01:22:29

A. 高中生物,什麼情況下用平板劃線分離法,什麼情況下用稀釋塗布分離法

一、平板劃線分離法
由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線,微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少,並逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養後,可在平板表面得到單菌落.
二、稀釋倒平板法
先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然後分別取不同稀釋液少許,與已溶化並冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻後,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固後,製成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出出菌落.如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的.隨後挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養.稀釋塗布法:
優點:可以計數,可以觀察菌落特徵.
缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延.
一般用於平板培養基的回收率計數!
稀釋混合平板法:
優點:可以計數,吸收量為1ml,較方便.
優點:不能觀察菌落特徵.
一般用於菌落總數的計數!
平板劃線法:
優點:可以觀察菌落特徵,對混合菌進行分離!
缺點:不能計數
一般用於從菌種的分純!塗布法使用較多,但有時不均勻 稀釋倒平板法操作相對麻煩,不適合好氧和對熱敏感的細菌培養 應用范圍:塗布法適用於 好氧菌 稀釋倒平板法適用於厭氧,兼性厭氧 我找的,看看有用沒?

B. 高中生物,塗布分離法是指什麼,什麼情況下使用

學生問題:選修1《微生物的應用》教學中,什麼時候用平板劃線分離法?什麼時候用稀釋塗布法?
1.平板劃線分離法
把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,沒空陵經培養後生長繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。

優點:可以觀察菌落特徵,對混合菌進行分離。
缺點:不能計數,一般用於從菌種的分離純化。
例如:篩選大腸桿菌菌種。
2.稀釋塗布平板法
將菌液進行一系列的梯度稀釋,然後將不同稀釋度的菌液分別塗枯戚布到瓊脂固體培養基的表面,進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個的虧腔菌落。
優點:可以計數,可以觀察菌落特徵。
缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。一般用於平板培養基的回收率計數。
例如:測定純凈水中大腸桿菌的含量。

C. 高中生物實驗哪些用到差速離心法,哪些用到梯度離心法。

1、差速離心法:

分離不同密度的結構的實驗用到差速離心法,如線粒體、葉綠體等。差速離心主要是採取逐漸提高離心速度的方法分離不同大小的細胞器。

2、梯度離心法:

分離核酸、蛋白質、核糖體亞基的實驗用到梯度離心法。密度梯度液的制備用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度。

(3)高中生物分離方法有哪些擴展閱讀

差速離心法原理:

物體圍繞中心軸旋轉時會受到離心力F的作用。當物體的質量為 M、體積為V、密度為D、旋轉半徑為r、角速度為(弧度數/秒)時,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r (1) 上述表明:被離心物質所受到的離心力與該物質的質量、體積、密度、離心角速度以及旋轉半徑呈正比關系。

離心力越大,被離心物質沉降得越快。 在離心過程中,被離心物質還要克服浮力和摩擦力的阻礙作用。

梯度離心法原理:

不同顆粒之間存在沉降系數差時,在一定離心力作用下,顆粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同區域上形成區帶的方法。

D. 分離純化微生物的方法有哪些各方法適用分離什麼菌種

主要有:劃線法、倒平板法、塗布法,根據分離的菌種選擇不同的培養基。

稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設備,分離純化效果好。

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中,不僅需要通過分離。

分離技術

主要是稀釋和選擇培養,稀釋是在液體中或在固體表面上高度稀釋微生物群體,使單位體積或單位面積僅存留一個單細胞,並使此單細胞增殖為一個新的群體。最常用的為平板劃線法。

如果所要分離的微生物在混雜的微生物群體中數量極少或者增殖過慢而難以稀釋分離時,需要結合使用選擇培養法,即選用僅適合於所要分離的微生物生長繁殖的特殊培養條件來培養混雜菌體,改變群體中各類微生物的比例,以達到分離的目的。為保證分離到的微生物是純培養,分離時必須用。

以上內容參考:網路-微生物分離純化

E. 高中生物裡面,什麼用到了差速離心法什麼用到了梯度離心法

差速離心法(離心法):交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分的分離。
梯度離心法(濃度梯度):細胞內的物質具有一定的濃度,把細胞放入清水中,細胞吸水漲破。除去細胞內的其他物質,得到細胞膜。
密度梯度區帶離心法(簡稱區帶離心法),是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。此法的優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會擠壓變形,能保持顆粒活性,並防止已形成的區帶由於對流而引起混合。此法的缺點是:①離心時間較長;②需要制備惰性梯度介質溶液;③操作嚴格,不易掌握。

F. 物質的分離方法有很多種,分別是什麼,有什麼特點

物質的分離方法大多數都是在萃取、膜分離、過濾、層析、鹽析等分離方法的分支。
1、萃取
萃取,又稱溶劑萃取或液液萃取,亦稱抽提,是利用系統中組分在溶劑中有不同的溶解度來分離混合物的單元操作。即,是利用物質在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或分配系數的不同,使溶質物質從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中的方法。
萃取是有機化學實驗室中用來提純和純化化合物的手段之一。通過萃取,能從固體或液體混合物中提取出所需要的物質。
2、膜分離方法
一種利用薄膜的半滲透性而分離溶液混合物的化學分離方法,能從氣態或液態混合物中分離出某些組分。
所用的膜既可以是具有一定規格的微孔,有如分子篩,讓小分子通過微孔,而大分子則截流,從而使混合物得以分離;也可以是無微孔的高分子膜,混合物中的一些組分首先溶解在膜表面,然後擴散通過膜層,最後在另一側蒸發,從而達到分離的目的。
3、過濾
在推動力或者其他外力作用下懸浮液(或含固體顆粒發熱氣體)中的液體(或氣體)透過介質,固體顆粒及其他物質被過濾介質截留,從而使固體及其他物質與液體(或氣體)分離的操作。
4、層析
利用各組分物理性質的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法。有吸附層析、分配層析兩種。一般用於有機化合物、金屬離子、氨基酸等的分析。層析利用物質在固定相與流動相之間不同的分配比例,達到分離目的的技術。
層析對生物大分子如蛋白質和核酸等復雜的有機物的混合物的分離分析有極高的分辨力。
5、鹽析
向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液後,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析,是物理變化,可復原。
向某些蛋白質溶液中加入某些重金屬鹽,可以使蛋白質性質發生改變而凝聚,進而從溶液中析出,這種作用叫作變性,性質改變,是化學反應,無法復原。

G. 分離細胞器的方法高中生物

1、分離細胞器的方法為差速離心或密度梯度離心.
2、
線粒體:結構包括線粒體內膜、外膜(上分布有基粒)、線粒體基質.線粒體內膜和線粒體基質中含有氧.
葉綠體:結構包括葉綠體外被、類囊體和基質3部分組成,外被上分布著光合作用需要的色素,類囊體和基質上有光合作用需要的酶,含有少量的DNA和RNA.
內質網:功能是合成分泌蛋白質.
高爾基體:功能是將內質網合成的蛋白質進行加工、對比分類、與包裝,然後分門別類地送到細胞特定的部位或分泌到細胞外.
溶酶體:內部含有多種酸性水解酶,功能是溶解或消化,為細胞內的消化器官.
液泡:內有細胞液,其中含有糖類、無機鹽、色素和蛋白質等物質.
核糖體:成分包括蛋白質和核糖體RNA(rRNA),功能是:核糖體是合成蛋白質的地方.
中心體:分布在動物細胞和某些低等植物細胞,由兩個互相垂直的中心粒及周圍物質組成,與細胞的有絲分裂有關.

H. 微生物分離方法

微生物分離法是獲得微生物純培養物的一種分離方法。通過這個方法可實現一種微生物的培養,或獲得一個細胞的後代。其具體方法有:

1、稀釋倒平皿法。將待分離的材料作一系列稀釋,取不同稀釋度適量塗布於固體培養基平板上或與已熔化的固體培養基一起傾注入平板內,經過培養即有一個微生物細胞繁殖來的單個菌落。

2、劃線法。先將已熔化的固體培養基製成平板,待凝後,取分離材料在上面劃線,可作平行劃線、扇形劃線或其他形狀的連續劃線,使菌樣逐漸減少,最後得到單個孤立的菌落。

(8)高中生物分離方法有哪些擴展閱讀:

微生物分離技術的應用措施:

1、減少毒性氧物質的毒害作用:由於常規培養方法使用的高濃度營養基質不利於微生物生長,適當降低營養基質的濃度可以減弱這種不利影響。發現低濃度基質的培養基培養出的細菌在數量和種類上均多於高濃度基質的培養基,但營養濃度過低時會使培養出的微生物數量反而下降。

2、維持微生物間的相互作用:在培養基中加入微生物相互作用的信號分子就可簡單模擬微生物間的相互作用,滿足微生物生長繁殖的要求。

3、供應新型的電子供體和受體:不同微生物的代謝過程不同,因此對反應的底物要求也不盡相同。供應微生物需要的特有底物有助於新陳代謝反應的進行及微生物的正常生長。大量的研究表明,將新穎的電子供體和受體應用到微生物培養中,能夠發現未知的生理型微生物。

4、分散微生物細胞:自然界中很多微生物聚集生長,形成「絮體」和「顆粒」等,致使其內部的微生物不易被培養。對「絮體」和「顆粒」進行適度的超聲處理,將細胞分散再進行培養,可以使更多的微生物接觸培養基而得到培養。

5、延長培養時間:對「寡營養菌」的培養,可適當延長培養時間,使其能長至肉眼可見的尺度。當然培養時間不能無限增長,因為培養時間越長,對培養環境的無菌要求就越高[4]。

6、利用瓊脂替代物:瓊脂對某些微生物具有毒性作用,採用無害且凝結作用較好的替代物質作為培養基固化劑,可以增加微生物的可培養性。

I. 分離色素的方法高中生物

分離色素的方法為:用丙酮先提取出色素,後用濾紙根據濃度不同靜止分離。

分離方法簡述:

色素主要分為天然色素和人工色素兩種,天然色素常用的天然色素有胭脂樹紅、胭脂蟲紅、葉綠素、姜黃素和葉紅素等;而從化工合成製得的色素稱為「合成色素」。

把試樣點在濾紙的濾液細線位置上,當流動相溶劑在濾紙的廳銷毛細管的作用下,連續不斷地沿著濾紙前進通過濾液細線蘆伏薯時,試樣中各組份便隨著流動相溶劑向前移動,並在流動相和固定相溶劑之間連續一次又一次的分配。

結果分配比比較大的物質移動速度較快,移陪者動距離較遠;分配比較小的物質移動較慢,移動距離較近,試樣中各組分分別聚集在濾紙的不同的位置上,從而達到分離的目的。

J. 高中生物裡面,什麼用到了差速離心法什麼用到了梯度離心法

觀察線粒體、葉綠體、蛋白質的結構時用到了差速離心法。

利用同位素標記法觀察DNA時用到了毀虛梯度離心法。

密度梯度離心中單一樣品組份的分離是藉助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的;差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離。

密度梯度離心只用一個離心轉速,而差速離心用兩個甚至更多的轉速。密度梯度離心的物質是密度有一定差異的,而差速離心是適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分。

(10)高中生物分離方法有哪些擴展閱讀:

使用密度梯度離心法時,注意離心前將樣品小心鋪放在密度梯度溶液表面,離心形成區帶。離心後不同大小、不同形狀、有一定沉降系數差異的顆粒在備余悶密度梯度液中形成若干條界面清楚的不連續區帶。再通過虹吸、穿刺或切割離心管的方法將不同區帶中的顆粒分開收集,得到所需的物質。

注意事項:

1、梯度介仿彎質應具備足夠大的溶解度,以形成所需的密度梯度范圍。

2、梯度介質不會與樣品中的組分發生反應。

3、梯度介質也不會引起樣品中組分的凝集、變性或失活。

4、若離心時間過長由於顆粒的擴散作用,會使區帶越來越寬。為此,應適當增大離心力、縮短離心時間,可以減少由於擴散而導致的區帶擴寬現象。

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