⑴ 急,請問如何從土壤中分離出細菌、放線菌、黴菌、酵母菌、真菌
首先用滅菌水稀釋土壤,充分搖勻,就可以用玻棒蘸取土壤溶液,在經過滅菌的特製培養基培養皿上劃線,然後進行培養。一般我們培養細菌和酵母菌用LB培養基,青黴菌用PDA培養基,其他的沒坐過不太清楚。等培養出來後挑出單一菌落進行繼代培養,用顯微鏡觀察是什麼菌。
土壤里的細菌習性差別很大,生長條件要求也很不一樣,有固氮菌,硅酸鹽細菌,菌根菌,很多很多種,有很多種是很難在一般培養基中生長的,需要有特殊的環境,但也有很多種可以在普通的培養基上培養,生長比較快,可以培養出五彩斑斕的菌落。
對好氧菌培養相對容易一些,如果要培養厭氧菌條件特殊,需要加入特殊的葯品,或者採取深層培養或其他的厭氧條件。
土壤中微生物特別豐富,含有放線菌、真菌等,在培養過程中,可以使用選擇性培養基,加入一些抑制其生長的葯品,盡可能消除其干擾。
⑵ 菌種是怎麼分離的
從樣品中分離菌種一般使用劃線法和塗布平板法。劃線法是利用平板劃線的方法實現菌液的稀釋,最終獲得單菌落,該方法快速方便,容易操作;塗布平板的方法是先對樣品做稀釋梯度,然後選擇3個連續梯度塗板,該方法的優點是可以對菌落計數,獲得樣品中不同菌種的數量信息(該方法是我的大愛,長出的菌落很漂亮);對於特定類型的菌種還可以使用選擇培養基進行分離(如培養基加氯黴素可以抑制細菌生長,用於分離酵母和黴菌;加山梨酸鉀可以抑制真菌,用於分離生長較慢的細菌;加入氨苄的培養基只有含氨苄抗性的菌落能夠生長)。
希望對你有幫助。
⑶ 急急急~請問哪位高人知道植物內生真菌的分離方法
從元江仙人掌的莖中分離到一株產廣譜、高活性抑菌物質的內生真菌,經測定對細菌、植物病原真菌和皮膚致病真菌共21種病原微生物有較為明顯的抑製作用。形態特徵表明,該菌株與麴黴屬(Aspergillus)中的土生麴黴(Aspergillus terreus)的特徵基本一致,18SrDNA序列分析顯示本菌株與土生麴黴的同源性高於99%,但該菌株的分生孢子梗上有明顯的瘤狀突起,不同於模式菌株。因此認為該菌株為土生麴黴的一個變種,命名為土生麴黴雲南變種(Aspergillus terreus vat.yunnanensis)。並對其活性物質的生產條件進行了初步摸索,確定用查氏培養基為最佳種子培養基,PDA培養基為最佳發酵培養基,4d為最適發酵時間。