細胞破碎的非機械方法有哪些

『壹』 細胞破碎的方法有哪些

博凌科為解答:1、高速組織搗碎
:將材料配成稀糊狀液，放置於筒內約1/3體積，蓋緊筒蓋，將調速器先撥至最慢處，開動開關後，逐步加速至所需速度。此法適用於動物內臟組織、植物肉質種
子等。2、玻璃勻漿器勻漿
:先將剪碎的組織置於管中，再套入研桿來回研磨，上下移動，即可將細胞研碎，此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高，適用於量少和動物臟器組織。3、超聲波處理法
:用一定功率的超聲波處理細胞懸液，使細胞急劇震盪破裂，此法多適用於微生物材料，用大腸桿菌制備各種酶，常選用50-100毫克菌體/毫升濃度，在
1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾，此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱，應採取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。4、反復凍融法:
將細胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復幾次，由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細胞結構破碎。5、化學處理法:
有些動物細胞，例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞，細菌細胞壁較厚，可採用溶菌酶處理效果更好。無論用哪一種方法破碎組織細胞，都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中，使大分子生物降解，導致天然物質量的減少，加入二異丙基氟磷酸
(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺醯氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活
力，但不是全部，還可通過選擇pH、溫度或離子強度等，使這些條件都要適合於目的物質的提取。

『貳』 細胞破碎方法

很多，可以用滲透原理，讓細胞吸水漲大而達到細胞膜破碎的目的。
例：用純化水稀釋血液
也用離心的原理讓細胞破碎，如將血液放入離心機中在4000轉/分的轉速下離心3分鍾。
需注意的是細胞破碎用的是細胞而不是組織或其他。

『叄』 實驗室常用哪些細胞破碎方法

一般用物理或者化學方法來使得細胞裂解
物理法：
（1）反復凍融：將細胞反復放置於-20℃冷凍以及25-30℃環境下，反復冷凍溶解10次-20次。適用於例如血細胞等大部分哺乳動物細胞。
（2）煮沸法：與凍融法相反，將細胞放置於100℃沸水煮沸5-10分鍾，適用於大部分微生物細胞。
（3）超聲法：將細胞放置於超聲破碎儀中，以一定頻率的超聲破碎細胞，適用於絕大部分微生物細胞。
（4）滲透壓法：將血細胞等細胞膜較為薄弱的細胞放置於純水等低滲溶液，細胞吸收大量水分破解。
（5）液氮法：植物細胞一般採用液氮捻磨的方法破解細胞。
化學法:
（1）強酸、強鹼溶液：一般應用0.5N NaOH溶液可以裂解絕大部分動物細胞和微生物細胞。
（2）生物酶：一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物細胞。

『肆』 細胞破碎方法有哪些

博凌科為解答：1、高速組織搗碎 ：將材料配成稀糊狀液，放置於筒內約1/3體積，蓋緊筒蓋，將調速器先撥至最慢處，開動開關後，逐步加速至所需速度。此法適用於動物內臟組織、植物肉質種 子等。2、玻璃勻漿器勻漿 ：先將剪碎的組織置於管中，再套入研桿來回研磨，上下移動，即可將細胞研碎，此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高，適用於量少和動物臟器組織。3、超聲波處理法 ：用一定功率的超聲波處理細胞懸液，使細胞急劇震盪破裂，此法多適用於微生物材料，用大腸桿菌制備各種酶，常選用50-100毫克菌體/毫升濃度，在 1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾，此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱，應採取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。4、反復凍融法： 將細胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復幾次，由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細胞結構破碎。5、化學處理法： 有些動物細胞，例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞，細菌細胞壁較厚，可採用溶菌酶處理效果更好。無論用哪一種方法破碎組織細胞，都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中，使大分子生物降解，導致天然物質量的減少，加入二異丙基氟磷酸 （DFP）可以抑制或減慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺醯氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活 力，但不是全部，還可通過選擇pH、溫度或離子強度等，使這些條件都要適合於目的物質的提取。

『伍』 我想知道細胞破碎的方法及各種方法的原理和優缺點

機械法：主要通過機械切力的作用使組織細胞破碎的方法，常用的器械有組織搗碎機、勻漿器、研缽和研磨、壓榨器等。

常用的細胞破碎方法有反復凍融法、超聲破碎法、酶處理法、自溶法和表面活性劑處理法 。

細胞破碎是提取胞內產物的關鍵步驟，破碎方法的得當與否，直接影響到所提取產品的產量、質量和生產成本。實驗室對組織細胞的破碎方法很多，有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。

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細胞破碎條件

在破碎前，材料常需要預處理，如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織，脂肪組織和血污等，植物種子需要除殼，微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。

對同一實驗材料，由於實驗要求不同，採用的破碎方式也存在一定差異，如提取中的核酸和提取其中的核苷酸，前者必須保持十分溫和的條件，以保持分子的完整性;後者可採用強烈手段。

不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求，使用的破碎方法和條件也不同。一些堅韌組織，如肌肉、植物的根莖等，常需要強烈的攪拌或研磨作用，才能把其組織細胞破壞。而比較柔軟的組織如肝、腦等，用普通的玻璃勻漿器即可達到完全破壞細胞的目的。

『陸』 破碎酵母細胞的方法

酵母細胞破碎方法很多。有化學、生化、超聲波、機械研磨，使用果汁勻漿機勻漿破碎，以及近幾年誕生的納米級微生物細胞破碎機的廣泛應用。1、化學法破碎酵母細胞
使用NaOH水解酵母細胞。細胞濃度10%，水90%，鹼解24h，50·C，pH值為鹼性，結果見表1。當酵母細胞濃度10%，水90%，溫度為50%，pH2（3、4）時見表2。
由表1、表2可以看出，鹼解、酸解酵母細胞在啤酒、醬油生產上影響物理化學指標，啤酒輔料可以增加，但口味變壞，雖說醬油發酵周期可縮短但氯化物含量超標。
2 生化法破碎酵母細胞，一是自溶，二是酶解 自溶法破碎酵母細胞，表面上看很經濟，但保濕操作需要保濕設備而且作用時間長，條件要求高。試驗結果見表3。
由於破碎率低總氮低，在啤酒、醬油生產上應用沒有好的效果，氯化完全、硫酸鹽不高，經濟效益不明顯，再加上自溶時間長，很難與生產同步
生產方法2 主要是使用酶制劑破碎酵母細胞。在水、酵母中加0.1%的A酶，0.1%的F酶，0.05%。A+0.05%。F分別做試驗。此時酵母濃度10%，水90%，pH7.0，溫度68·C，作用時間2h，結果見表4。
從表4可知，酶解時間較長，破液對啤酒、醬油質量沒有影響，需較高保濕條件，否則很難在生產中應用
3 珠磨機與超聲波破碎酵母細胞試驗
珠磨機破碎率較低，在12h～24h內研磨，破碎率最高可達80%，產量小很難工業化生產，超聲波破碎只能在試驗室內進行，不能用於生產，兩者均屬試驗室設備
4 高壓勻漿機與納米級微生物細胞破碎機破碎 高壓勻漿機結構如圖1所示
高壓液流夾帶酵母進到噴嘴3碰撞到勻漿閥1後折彎，碰撞到耐磨壁2上，酵母細胞發生破碎。在酵母破碎後，胞內粘和物符到閥1和耐磨壁，呈現較大緩沖作用，影響細胞破碎，這種機械需多次反復破碎才會有較好的效果，破碎率不會超過80%。
納米級微生物細胞破碎機結構如圖2。
1 對撞室，2 振盪片，3 左噴嘴，4 右噴嘴
圖2 納米級微生物細胞破碎機結構圖
當高壓液流夾帶酵母細胞進入左右噴嘴3和4，在對撞室1中相撞，之後碰撞到震盪片2上，使酵母細胞在對撞室和發出2x10 4HZ頻率的震盪片上實現兩級瞬時破碎，破碎率可達97.8%，對撞室和震盪片上不存在粘稠物，有利酵母細胞破碎
在勻漿機工作中，假設有一質點，附著閥1上，受到沖力
該質點質量，1g,即0.001kg
流體速度，