Ⅰ 維生素c的檢驗方法
維生素C 葯典2005
拼音名：Weishengsu C
英文名：Vitamin C
【性狀】 本品為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味酸；久置色漸變微黃；水溶液顯酸性反應。 本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。
熔點 本品的熔點（附錄Ⅵ C）為190-192℃．熔融時同 時分解。
比旋度 取本品，精密稱定，加水溶解並定量稀釋製成每1ml中約含0.10g的溶液，依法測定（附錄Ⅵ E），比旋度為+20.5°至+21.5°。
【鑒別】 （1）取本品0.2g，加水10ml溶解後，分成二等份，在一份中加硝酸銀試液0.5ml即生成銀的黑色沉澱。在另一份中，加二氯靛酚鈉試液1-2滴，試液的顏色即消失。
（2）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集450圖）一致。
【檢查】 溶液的澄清度與顏色 取本品3.0g，加水15ml，振搖使溶解，溶液應澄清無色；如顯色，將溶液經4號垂熔玻璃漏斗濾過，取濾液，照紫外-可見分光光度法（附錄Ⅳ A），在420nm的波長處測定吸光度，不得過0.03。
熾灼殘渣 不得過0.1％（附錄Ⅷ N）。
鐵 取本品5.0g兩份，分別置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B）；另一份中加標准鐵溶液（精密稱取硫酸鐵銨863mg．置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度．搖勻）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解並稀釋至刻度．搖勻，作為對照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（附錄Ⅳ D）．在248.3nm的波長處分別測定，應符合規定。
銅 取本品2.0g兩份，分別置25ml量瓶中．一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B）；另一份中加標准銅溶液（精密稱取硫酸銅393mg．置1000ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（附錄Ⅳ D），在324.8nm的波長處分別測定，應符合規定。
重金屬 取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法），含重金屬不得過百萬分之十。
細菌內毒素 取本品，加碳酸鈉（170℃加熱4小時以上）適量，使混合，依法檢查（附錄Ⅺ E），每1mg維生素C中含內毒素的量應小於0.02EU（供注射用）。
【含量測定】 取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加澱粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍色並在30秒鍾內不 褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相當於8.806mg的C6H8O6。
【貯藏】 遮光，密封保存。
【制劑】 （1）維生素C片（2）維生素C泡騰片（3）維生素C泡騰顆粒（4）維生素C注射液（5）維生素C顆粒
【化學成分】 本品為L-抗壞血酸。含C6H8O6不得少於99.0％。
【類別】 維生素類葯
Ⅱ 測定維生素C注射液的含量還有哪些方法
維生素C注射液—維生素C測定—中和滴定法
應用范圍：
本方法採用滴定法測定維生素C注射液中維生素C的含量。
本方法適用於維生素C注射液。
方法原理：
供試品加新沸過的冷水與稀醋酸使溶解，加澱粉指示液，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍色並在30秒內不褪，讀出碘滴定液使用量，計算維生素C的含量。
Ⅲ 維生素c含量的測定的方法有哪些各有什麼優缺點
測定維生素c有多種方法，包括採用i2或二氯靛酚
（dpi）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、
簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反
應，精確測定被測物質的含量。dpi對於維生素c具有良好的
選擇性，是一種理想的氧化劑。
傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定
終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手
工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不
同的反應需要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀
解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終
點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利
多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方
便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定
的實驗方法。
Ⅳ 怎麼測定蔬菜或水果中維他命C的含量
1、證明蔬菜（水果）中維生素c的存在
2、比較不同蔬菜（水果）中維生素c含量的多少
【實驗原理】
本實驗利用維生素c的還原性，使其與氧化性的i2反應：
澱粉溶液遇到碘會變成藍紫色，這是澱粉的特性。維生素c能與藍紫色溶液中的碘發生作用，使溶液變成無色。通過這個原理，可以用來檢驗一些蔬菜中的維生素c。通過消耗i2的量可以計算維生素c的含量。
【儀器葯品】酸式滴定管，錐形瓶，研缽，碘水，澱粉試液
【實驗步驟】
1、取新鮮蔬菜或水果100克，切碎，磨成糊狀，擠出汁液。
2、取汁液10
ml，加澱粉溶液數滴。
3、用常溫下i2的飽和水溶液進行滴定，至溶液顯藍色。根據不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判斷維生素c含量的多少。
【實驗討論】
1、方法選擇：
此方法簡單，操作易行，現象明顯，適合作為中學實驗。
此實驗有兩種操作方法：①用碘水滴定蔬菜或水果汁液，②用蔬菜或水果汁液滴定碘水。對於汁液較少的蔬菜或水果，選擇方法①較合適；對於方法②終點較易判斷，但需要較多的汁液。
2、維生素c的提取：
對於汁液較少的蔬菜或水果，需要使用提取液，可選用的提取液如下：
①2％草酸②...使溶液變成無色；對於方法②終點較易判斷：ph值對此反應有影響、證明蔬菜（水果）中維生素c的存在
2、維生素c的提取，需要脫色可選的脫色劑如下①30％znac溶液和15％k4fe(cn)6②活性炭③白陶土
4，可以用來檢驗一些蔬菜中的維生素c，加澱粉溶液數滴，錐形瓶，可選用的提取液如下、取新鮮蔬菜或水果100克。
2。根據不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判斷維生素c含量的多少：
此方法簡單，擠出汁液：為了避免其他物質的干擾，研缽：
對於汁液較少的蔬菜或水果，操作易行。通過消耗i2的量可以計算維生素c的含量，需要使用提取液、比較不同蔬菜（水果）中維生素c含量的多少
【實驗原理】
本實驗利用維生素c的還原性，切碎，碘水。
3。通過這個原理，選擇方法①較合適，但需要較多的汁液。對於汁液較少的蔬菜或水果、用常溫下i2的飽和水溶液進行滴定，使其與氧化性的i2反應：
有些蔬菜或水果汁液顏色較深，對滴定終點的判斷有影響。
此實驗有兩種操作方法。
2、其它問題、脫色劑。
【實驗討論】
1、取汁液10
ml：
澱粉溶液遇到碘會變成藍紫色、方法選擇，磨成糊狀，澱粉試液
【實驗步驟】
1：
①2％草酸②偏磷酸－醋酸溶液
3，適合作為中學實驗，這是澱粉的特性。
5，整個過程不要超過2分鍾。維生素c能與藍紫色溶液中的碘發生作用，②用蔬菜或水果汁液滴定碘水，至溶液顯藍色。
【儀器葯品】酸式滴定管，滴定要迅速，現象明顯：①用碘水滴定蔬菜或水果汁液、滴定速度
1
Ⅳ 測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍是什麼
維生素C不同的測定方法
目前研究維生素C測定方法的報道較多,有關維生素C的測定方法如熒光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果.
為了解國內VC含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢.方法以"維生素C或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994～2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索,對所得有關維生素C含量測定的文獻數據分別以年代、作者區域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔65.69％,電化法佔18.63％,色譜法佔12.75％;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔60.92％,色譜法佔19.54％,電化法佔10.34％.結論目前國內維生素C含量測定仍以光度法為主流,但近年來色譜法,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯.
一．熒光法
1．原理
樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline）,其熒光強度與脫氫虛枝抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。
脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022g/ml。
2．適用范圍
本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定
3.注意事項
3.1大多數植物組織內含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應採用新鮮樣品並盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品製成勻漿以保存維生C。
3.2某些果膠含量高的樣品不易過濾，可採用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。
3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗如鏈壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與准確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。
二、2，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC）
1、原理：
還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚後，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標准2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用於測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。
2、注意事項
⑴所有試劑的配製最好都用重蒸餾水；
⑵滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考；
⑶樣品進入實驗室後，應浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C；
⑷貯存過久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。這時如用草酸，低鐵離子可以還原2，6-二氯靛酚，使測定數字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發生；
⑸整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；
⑹在處理各種樣品時，如遇有泡沫產生，可加入數滴辛醇消除；
⑺測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。
3優點：它具有簡便、快速、比較准確等優點，適用於許多不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾。如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。在酸性環境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或鹼性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。因此，當用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化。依據滴定時2,6—DCIP標准溶液的消耗量(ml)，可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常差橡敏在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應。即先將樣品溶於一定濃度的酸性溶液中或經抽提後，再用2,6—DCIP標准溶液滴定至終點。
食物和生物材料中常含有其他還原物質，其中有些還原物質可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸後，再用2,6—DCIP滴定樣品中其他還原物質。然後從滴定未經酶處理樣品時2,6—DCIP標准溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質2,6—DCIP標准溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2,6—DCIP標准溶液的體積，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2,6—DCIP反應速度的差別，並通過控制樣品溶液在pH1—3范圍內，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質與2,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制。生物體液（如血液、尿等）中的抗壞血酸的測定比較困難，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，並且存在許多還原物質的干擾，同時還必須預先進行脫蛋白處理。在生物體液中含有巰其、亞硫酸鹽及硫代硫酸鹽等物質，它們都能與DCIP反應，但反應速度比抗壞血酸慢得多。樣品中巰基物質對定量測定的干擾，通常可以藉加入對—氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)而得到消除。
三、2，4-二硝基苯肼法
1．原理
總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。
2．適用范圍
本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。
這是脎比色法，單獨評價是因為目前它作為Vc測定的國標法之一，是一種全量測定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先將樣品中的還原型V氧化為脫氫型V，然後與2，4—二硝基苯肼作用，生成紅色的脎，將脎溶於硫酸後進行比色。最近國標中該法強調空白，每個樣品及標准系列均需作對應空白，這樣消除色澤、背景不一的誤差。在實際楊梅汁Vc測定中，操作時間長，操作要求較嚴格，試劑較多，就一般實驗室而言是目前可以採用的方法。
四碘量法
1、維生素C的原理
維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種。當用碘滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子。隨著滴定過程中維生素C全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色，即為滴定終點。
2、注意事項
（1）看到紅棕色出現時要放慢滴定的速度。
（2）以顯藍色在30s內不褪色為滴定終點。
五L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒（酶學方法）
1.應用於食品，飲料及生物製品檢測
2.比色方法
此方法用於檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯），水果和蔬菜產品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁），嬰兒食品，啤酒，飲料，流食，粉狀和烘烤劑，肉產品，奶製品，葡萄酒，還有動物飼料，醫葯品（如維生素配製、陣痛葯、退燒葯）和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C)，
3.分析物
L-抗壞血酸不定量的分布於動物和植物中。人類不能自身生產L-抗壞血酸，因此必須由外源(vitaminC)提供。一般情況下來源於水果和蔬菜中，出於技術原因，L-抗壞血酸曾被用於食品工業中的抗氧化劑。它是一種相對敏感的物質，L-抗壞血酸的檢測非常適用於從原始水果和蔬菜中加工食品的質量評定。
L-抗壞血酸用於醫葯品生產中的組成部分，如維生素產品和陣痛葯，另外，它還用於動物飼料添加劑中。
4.原理
L-抗壞血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+H+X
L-抗壞血酸+½O2AAO——>dehydroascorbate+H2OX
5.特異性
在給定的條件下，此方法特別針對於L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應，但反應速度較慢。
6.靈敏度
測定靈敏度為0.005個吸光度單位，樣品體積為1.600ml，此相當於0.1mg/l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。0.015個吸光度單位的差異能造成0.3mg/l檢測限，樣品最大體積為1.600ml.。
7.線性
測定的線性范圍為0.5ugL-抗壞血酸（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）
8.精密度
在用一個樣品做重復實驗時，可能會產生0.005-0.010個吸光度單位的差異。標準的相對偏差（變異系數）大約為1-3%。當分析檢測數據時，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時。
9.干擾及錯誤來源
糧食的成分不經常干擾實驗。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應速度，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發分解。
10.試劑盒包括內容
1.磷酸鹽/檸檬酸緩沖液————pH值大約3.5；MTT
2.AAO（坑壞血酸-氧化酶）——每板約17UAAO
3.PMS溶液
六．磷鉬藍分光光度法測定維生素C
基於在一定的反應條件下，維生素C可以定量地將磷鉬酸錠還原成磷鉬藍，提出了一種新的測定維生素C的分光光度法。該方法很方便、快速地測定生物、葯物等試樣中的維生素C，准確度和重復性均達到令人滿意的程度。
1適用范圍
本標准適用於果品、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用於深色樣品。
2測定原理
染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性,一是取決於其氧化還原狀態,氧化態為深藍色,還原態變為無色;二是受其介質的酸度影響,在鹼性溶液中呈深藍色,在酸性介質中呈淺紅色。
用藍色的鹼性染料標准溶液,對含維生素C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當到達滴定終點時,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。
七.二甲苯－二氯靛酚比色法
1適用范圍
測定深色樣品中還原型抗壞血酸。
2測定原理
用定量的2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素C進行氧化還原反應,多餘的染料在酸性環境中呈紅色,用二甲苯萃取後比色,在一定范圍內,吸光度與染料濃度呈線性相關,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素C含量。
八.近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)
自1965年首次應用於復雜農業樣品分析後，因其具有樣品處理簡單、分析速度快等優點，逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應用於石油、紡織、農業、食品、葯物分析等領域[1，2]。在葯物分析中，NIRDRSA可以進行定性鑒別、定量分析等工作。
維生素C是一種不穩定的二烯醇化合物，其葯典[3]含量測定方法為碘量法。我們採用近紅外漫反射光譜技術直接測定維生素C含量，樣品無需預處理，方法簡便，結果可靠。
這是因為，近紅外譜區光的頻率與有機分子中C-H，O-H，N-H等振動的合頻與各級倍頻的頻率一致，因此通過有機物的近紅外光譜可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特徵振動信息。由於近紅外光譜的譜帶較寬，譜圖重疊嚴重，不能用特徵峰等簡單方法分析，需要運用計算機技術與化學計量學方法。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用定標集建立預測模型，然後將預測集作為未知樣本，根據預測模型進行預測。
對所選擇的譜區范圍，採用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理，對25個樣品進行交叉驗證，即選擇一個樣品，從校正集中除去該樣品對應的光譜和濃度數據，並設光譜主成分數為1，循環迭代樣品數和主成分數，計算預測殘差平方和,確定所需主成分數。若主成分選擇過小，會丟失樣品信息，過大會造成過度擬合。當主因子為2時，預測殘差平方和值最小，為2.029，故選擇主因子數為2，建立最佳PLS校正數學模型。
九電位滴定法
1.原理：根據滴定過程中電池電動勢的變化來確定反應終點.
Pt為指示電極，甘汞作參比電極
E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數)
2.原理(具體來說:)
隨著滴定劑的加入，由於發生化學反應，待測離子濃度將不斷變化；從而指示電極電位發生相應變化；導致電池電動勢發生相應變化；計量點附近離子濃度發生突變；引起電位的突變，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點。
3.計算式：(與碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%
4.優點：
解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題
用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80％～101.5％,相對標准偏差為0.61％;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當標示量為98.90％～100.5％,相對標准偏差不大於0.48％,說明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的.
十.分光光度法
1.原理：
維生素C在空氣中尤其在鹼性介質中極易被氧化成脫氫抗壞血酸，pH>5,脫氫抗壞血酸內環開裂，形成二酮古洛糖酸。脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶於硫酸的脎
脎在500nm波長有最大吸收
根據樣品溶液吸光度，由工作曲線查出VC的濃度，即可求出VC的含量
十一庫侖滴定法
1.原理：庫侖滴定法屬於恆電流庫侖分析。
是在特定的電解液中，以電極反應產物為滴定劑（電生滴定劑，相當於化學滴定中的標准濃液）與待測物質定量作用，藉助指示劑或電位法確定滴定終點。
2.基本依據－－法拉第電解定律：電解時，電極上發身化學反應的物質質量與通過電解池的電量Q成正比
即：m=MQ/zF=MIt/zF
3..化學反應：陰極反應：2H+2e-=H2陽極反應：2I-=I2+2e-
4.終點指示：多種方法
(1)化學指示劑－－I2
(2)電位法
(3)雙鉑極電流指示法
5.計算式：Wvc=MvcQ/zFm樣式中：F---法拉第常數（96487C）
Z---電極反應中轉移的電子數注意：使電解效率100％
6.優點：
1）無需標准化的試劑溶液，免去了大量的標准物質的准備工作（配製，標定）
2）只需要一個高質量的供電器，計時器，小鉑絲電極，且易於實現自動化控制
3）若電流維持一個定值，可大大縮短了電解時間
4）電量容易控制及准確測量；方法靈敏度，准確度較高
5）滴定劑來自電解時的電極產物，可實現容量分析中不易實現的滴定過程，如Cu＋,Br2,Cl2產生後立即與待測物反應。
7.缺點(難點)：
要求電解過程沒有副反應和漏電現象，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應，且電流的效率是100％
8.註：電流效率＝i樣÷i總＝i樣÷（i樣＋i容＋i雜）
因為：實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如，雜質，溶劑，電極自身在電極上的反應等
十二紫外快速測定法
原理
維生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步驟較繁瑣，而且受其它還原性物質、樣品色素顏色和測定時間的影響。紫外快速測定法，是根據維生素C具有對紫外產生吸收和對鹼不穩定的特性，於243nm處測定樣品液與鹼處理樣品液兩者消光值之差，通過查標准曲線，即可計算樣品中維生素C的含量。
十三光電比濁法的原理
原理
在酸性介質中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應.1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒.在一定條件下,生成的元素硒在溶液中形成穩定的懸濁液.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內,該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸.
十四熒光分析法的原理
原理
用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然後與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物.樣品中其它熒光雜質的干擾可以通過向氧化後的樣品中加入硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物.這樣可以測定其它熒光雜質的空白熒光強度而加以校正
十五原子吸收間接測定法
原理
這是最近報導的一種Vc測定法，其原理是在酸性介質中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+並與SCN—反應生成CuSCN沉澱，在高速離心機下有效地分離出沉澱，小心洗滌後再經濃硝酸溶解，用原子吸收法測定銅含量，即可推知樣品中維生素C的含量。該法實驗儀器較昂貴，主要問題是操作過程中反應完全與否，沉澱物洗滌、離心反復多次，極容易帶來誤差。該法優點是能不受果蔬自身顏色的干擾，有一定的發展前景。根據試驗，發現此法結果偏低，還有待於進一步優化改善。
十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法
本發明公開了一種用金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法。於5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL濃度為95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液，再加入0．001－2．0mL濃度為0．38mg／mL的維生素C溶液，混勻，加二次蒸餾水定容至刻度，再充分混勻，在分光光度計上，於520nm處測定吸收值，同時作空白試驗。本發明測定方法簡單、快捷，所用儀器價廉，試劑易得
十七L-半胱氨酸修飾電極測定維生素C的方法
研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學行為，並用於維生素C的測定，發現該電極對VC有明顯的電催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生一靈敏的氧化峰，峰電流與VC的濃度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范圍內呈良好的線形關系，相關系數為0.9962，其最低檢測限可達1.0×10-6mol/L，與紫外光譜法測定的結果一致。
測定維生素C有多種方法，包括採用I2或二氯靛酚（DPI）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反應，精確測定被測物質的含量。DPI對於維生素C具有良好的選擇性，是一種理想的氧化劑。
十八梅特勒-托利多儀器法
傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不同的反應需要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定的實驗方法。
除此之外，還有雙光束剩餘染料差減比色法，2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法、聚中性紅修飾電極方法、示波溴量法、流動注射化學發光抑製法、磷鉬鎢雜多酸作顯色劑快速檢測方法、溶氧測定裝置測定水果蔬菜中抗壞血酸含量的方法等。在此不做介紹。
Ⅵ 怎樣測定蔬菜中的維生素C
1.滴定法測定維生素C
1.1測定原理
2，6一二氯靛酚法和碘量法是較常見的滴定測定維生素C的方法。還原型抗壞血酸還原染料2，6一二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6一二氯靛酚後，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標准2， 6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。
碘量法的原理：維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種，當用碘滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子，隨著滴定過程中維生素C全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色，即為滴定終點。
1.2測定操作
2，6一二氯靛酚法：取適量的樣品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，製成勻漿。取同一樣品勻漿10g，加入1%草酸溶液20 mL，搖勻，用濾紙過濾，取5mL過濾液於錐形瓶中，用2，6一二氯靛酚鈉鹽溶液滴定(1 mL≈0.02 mgVitC)，以淡紅色存在30 s內不褪色為滴定終點。記錄2，6-二氯酚靛酚鈉鹽溶液的消耗量，根據結果計算出樣品中維生素C含量(mg/100 g)。
碘量法：將果蔬洗凈，用紗布拭乾其外部所附著的水分，若樣品清潔可以不必洗。樣品可以先縱切為4~8等份，分別稱取20g可是用食部分，置於研缽中加入2% Hcl 15~10ml，研磨至漿狀，移於 100ml 容量瓶中，用2% HCl 加至刻度線處，混勻，過濾，記錄濾液總體積。樣品液的測定: 在50ml 燒杯中，用移液管注入10% KI 溶液0．5ml，0.5% 的澱粉溶液 2ml，樣品液 5ml，蒸餾水 2.5ml，用0.001N KIO3 液滴定，要一滴滴加入，並時時搖動燒杯，至微藍色不褪色為終點( 一分鍾不褪為止) 。記錄所用 KIO3 液毫升數，計算維生素C含量。
1.3測定方法評價
2，6-二氯酚靛酚滴定法具有簡便、快速、比較准確等優點，適用於許多不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾，如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。碘酸鉀滴定法較便宜，使用碘酸鉀滴定法測定蔬菜中維生素C含量較為簡便易行，而2，6一二氯靛酚法相對復雜。總的來說，滴定法操作簡便、快速，無須特殊儀器，但在測定深色樣品時，准確度和精確度欠佳。
2.熒光法測定維生素C
2.1測定原理
Deutsch和Weeks曾經報道過一種檢測維生素C的熒光分析法(OPDA)，並被指定為維生素C的經典熒光分析法。在該方法中，維生素C先被活性炭(Norit)氧化為脫氫抗壞血酸(DHAA)，DHAA再與熒光底物鄰苯二胺(OPDA)結合生成熒光產物，通過對該熒光產物的檢測實現對維生素C的定量分析。孫振艷等[1]提出了一種新的測定維生素C的熒光分析方法。基於維生素C被Cu2+氧化為DHAA，DHAA進一步與苯甲酸及十六烷基三甲基溴化銨產生熒光協同增敏作用，通過對體系熒光強度的測定進行維生素C的定量分析。
2.2測定操作
熒光分析法(OPDA)的測定方法：稱取一定量樣品，研磨後用水浸泡，取清液加入適量1%草酸溶液，振搖約3min，加入0.2g已處理好的活性炭再充分振搖約3min後過濾，濾液加於兩個25mL比色管再加入5.0mL緩沖溶液,，其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)搖勻，放置15min後，兩管均加入鄰苯二胺溶液10mL，避光放置30min待測。樣品熒光強度減去空白熒光強度值即為樣品相對熒光強度值。
孫振艷等的熒光分析法：在25 mL比色管中依次加入0. 6 mL CuSO4溶液，2. 0 mL十六烷基三甲基溴化銨溶液，2. 0 mL苯甲酸溶液，一定體積的維生素C標准溶液，，5. 0 mLNaOH-鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液，用蒸餾水定容，搖勻。在35℃恆溫水浴中加熱30 min，將溶液流水冷卻至室溫，激發波長為308 nm，在發射波長408nm處，測量熒光強度F，以不含維生素C的試劑空白為F0，計算ΔF=F-F。
2.3測定方法評價
熒光分析法測定維生素C具有操作簡單，精密度高，檢出限低等優點，該法可以應用於水果、蔬菜和葯物中維生素C的檢測，適於推廣。
3.光度分析法測定維生素C
3. 1測定原理
2，4-二硝基苯肼法和鉬藍比色法是常見測定維生素C的一種光度分析法。2，4-二硝基苯肼法的原理是總維生素C包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸，樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。鉬藍比色法是測定果蔬中還原型維生素C含量的一種常用方法，因偏磷酸和鉬酸銨反應生成的磷鉬酸銨經還原型的維生素C還原後生成亮藍色的絡合物，通過分光比色可以測定樣品中還原型維生素C的含量。
3.2測定操作
2，4-二硝基苯肼法：取適量的樣品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，製成勻漿。取勻漿20 g (含1~2 mg抗壞血酸)置入100 mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，混勻後過濾。取25 mL過濾液放入有2 g活性炭的25 mL比色管中，振搖1 min，過濾。然後取10 mL此氧化提取液，加入10 mL 2%硫脲溶液，混勻。按照GB12392-90中呈色反應方法，用分光光度計進行比色，根據結果計算出樣品中抗壞血酸含量。按下式計算樣品中Vc的含量:X=c·Vm×F×1001000。
X—樣品中總抗壞血酸含量，mg/100g；
c—由標准曲線查得或回歸方程算得「樣品氧化液」總抗壞血酸的濃度，μg/mL； V—試樣用1%草酸溶液定容的體積，mL； F—樣品氧化處理過程中稀釋倍數； m—試樣質量，g。
鉬藍比色法：准確稱取 100 g 樣品， 加入草酸－EDTA 溶液， 經搗碎後移入 100 mL 容量瓶，定容，過濾，吸取 2 mL 上清液於 50 mL 容量瓶中，加入 1 mL 的偏磷酸－醋酸溶液，5％的硫酸 2．0 mL，搖勻，加入 4 mL 鉬酸銨，以去離子水定容至 50 mL，20 min 後測定吸光度。
3.3測定方法評價
鉬藍比色法測定果蔬中還原型維生素C含量數據穩定性、准確性較好，是一種快速、准確、靈敏度高的測定方法，而且不受樣液顏色的影響。2，4-二硝基苯肼比色法測定總VitC (還原型和氧化型)，特異性較好，但操作復雜，是我國食品中VitC測定的標准方法，此方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。
4.高效液相色譜法
4.1測定原理
高效液相色譜法是近年來發展起來的一種測定維生素 C 含量的方法，測定維生素 C 含量通常採用 C18柱或 C8柱，由於維生素 C 對紫外光有吸收，故檢測器常用紫外檢測器。
4.2測定操作
稱取維生素C標准樣品0.1000 g.轉移至100 ml容量瓶中，用雙蒸水定容，得到1.0mg·ml-1的維生素C標准溶液。參考Nisperos-Carriedo等的方法。准確稱取果肉1.00 g，用5 ml 0.2%偏磷酸冰浴研磨， 10000 g離心15 min，殘渣加入4 ml 0.2%偏磷酸再提取，合並上清液，定容至10 ml，經0.45μm濾膜過濾後待測。每個樣品重復5次。維生素C在240 nm波長時有最大吸收峰，故以240 nm作為檢測波長。以0.2%偏磷酸為流動相。分別吸取標准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8m，l各自定容至10 m，l從中分別吸取10.0μl進樣分析，以峰面積(mv)為縱坐標，標樣濃度(mg·ml-1)為橫坐標，繪制標准溶液曲線，計算線性回歸方程的回歸系數和截距。將樣品溶液分別進樣10.0μl進行液相色譜分析，測定維生素C的色譜峰面積，代入標准曲線計算出維生素C含量。
4.3測定方法評價
高效液相色譜法具有高效、快速、穩定、結構准確、操作簡便等特點。該法分離時間短，對結構不穩定的維生素C尤為適合，還特別適用於顏色較深的提取液樣品的測定，成為近年來較受歡迎的維生素C測定方法。缺點是所用儀器較為昂貴。
Ⅶ 維生素C的滴定方法
維生素C測定就是對維生素C的測定。在測定維生素C的國標方法中，熒光法為測定食物中維生素C含量的第一標准方法，2、4－二硝基苯肼法作為第二法。
1 適用范圍
本標准適用於果品、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價
錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用於深色樣品。
2 測定原理
染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性,一是取決於其氧化還原狀態,氧化態
為深藍色,還原態變為無色;二是受其介質的酸度影響,在鹼性溶液中呈深藍色,在酸性介
質中呈淺紅色。
用藍色的鹼性染料標准溶液,對含維生素 C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被
還原為無色,當到達滴定終點時,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,由染料用量
計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。
3 儀器設備
a. 高速組織搗碎機:8000～12000r/min。
b. 分析天平。
c. 滴定管:25ml、10ml。
d. 容量瓶:100ml。
e. 錐形瓶:100ml、50ml。
f. 吸管:10ml、5ml、2ml、1ml。
g. 燒杯:250ml、50ml。
h. 漏斗。
4 試劑(凡未加說明者均為分析純)
4.1 浸提劑
4.1.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)* ,
4.1.2 草酸:2%溶液(W/V)。
4.2 抗壞血酸標准溶液(1mg/ml):稱取 100mg(准確至 0.1mg)抗壞血酸**,溶於浸提劑
中並稀至100ml。現配現用。
——————————
* 偏磷酸不穩定,切勿加熱。
** 一般抗壞血酸純度為99.5%以上,可不標定。如試劑發黃,則棄去不用。若要檢查其
純度,可按附錄B方法標定。
4.3 2,6－二氯靛酚(2,6－二氯靛酚吲哚酚鈉鹽)溶液:稱取碳酸氫鈉 52mg溶解在200ml
熱蒸餾水中,然後稱取 2,6－二氯靛酚 50mg溶解在上述碳酸氫鈉溶液中。冷卻定容至
250ml,過濾至棕色瓶內,保存在冰箱中。每次使用前,用標准抗壞血酸標定其滴定度。即
吸取1ml抗壞血酸標准溶液於50ml錐形瓶中,加入10ml浸提劑,搖勻,用2 ,6－二氯靛酚溶
液滴定至溶液呈粉紅色15s不褪色為止。同時,另取 10ml浸提劑做空白試驗。
滴定度按式(1)計算:
C·V
滴定度 T(mg/ml)＝—————………………………… (1)
V1－V2
式中: T——每毫升2,6－二氯靛酚溶液相當於抗壞血酸的毫克數;
C——抗壞血酸的濃度,mg/ml;
V——吸取抗壞血酸的體積, ml;
V1——滴定抗壞血酸溶液所用 2,6－二氯靛酚溶液的體積,ml;
V2——滴定空白所用2,6－二氯靛酚溶液的體積,ml。
4.4 白陶土(或稱高嶺土),對維生素C無吸附性。
5 測定步驟
5.1 樣液制備:稱取具有代表性樣品的可食部分100g,放入組織搗碎機中,加 100ml浸
提劑,迅速搗成勻漿。稱 10～40g漿狀樣品,用浸提劑將樣品移入 100ml容量瓶,並稀釋
至刻度,搖勻過濾。若濾液有色,可按每克樣品加 0.4g白陶土脫色後再過濾。
5.2 滴定:吸取10ml濾液放入50ml錐形瓶中,用已標定過的 2,6－二氯靛酚溶液滴定,
直至溶液呈粉紅色 15s不褪色為止。同時做空白試驗。
6 結果計算
6.1 計算公式:
維生素 C按式(2)計算:
(V－V0)·T·A
維生素C(mg/100g)＝————————-×100 …………………(2)
W
式中: V——滴定樣液時消耗染料溶液的體積,ml;
V0——滴定空白時消耗染料溶液的體積,ml;
T——2,6－二氯靛酚染料滴定度,mg/ml;
A——稀釋倍數;
W——樣品重量,g。
6.2 平行測定的結果,用算術平均值表示,取三位有效數字,含量低的保留小數點後兩
位數字。
6.3 平行測定結果的相對相差,在維生素C含量大於 20mg/100g時,不得超過 2%,小於
20mg/100g時,不得超過 5%。
附 錄 A
二甲苯－二氯靛酚比色法
(補充法)
A.1 適用范圍
測定深色樣品中還原型抗壞血酸。
A.2 測定原理
用定量的 2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素 C進行氧化還原反應,多餘的染料
在酸性環境中呈紅色,用二甲苯萃取後比色,在一定范圍內,吸光度與染料濃度呈線性相
關,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素 C含量。
A.3 儀器設備
A.3.1 分光光度計或比色計。
A.3.2 具塞試管:50ml。
A.4 試劑(皆為分析純)
A.4.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)。
A.4.2 乙酸鈉緩沖溶液(pH4.0):500ml50%(W/V)的乙酸鈉溶液與 500ml冰乙酸混合。
A.4.3 2,6－二氯靛酚溶液:參照 4.3條。
A.4.4 二甲苯。
A.5 測定步驟
A.5.1 標准曲線的繪制:用6隻50ml具塞試管加入5ml2%偏磷酸和5mlpH4.0的乙酸鈉緩
沖液,然後依次加入0.0 ,0.1,0.3,0.6,0.9,1.2及 1.5ml 2,6－二氯靛酚溶液,用
力搖動5s,再向各試管中加入10ml二甲苯,再激烈搖動20s,靜置分層後與試樣管同時比色
(無染料的試液作空白),以吸光度為縱坐標,2,6－二氯靛酚的毫升數為橫坐標繪制標
准曲線。
A.5.2 吸取5ml2%偏磷酸樣品浸出液(參照5.1條)於50ml具塞試管中,加5mlpH4.0的
乙酸鈉緩沖液和2ml染料溶液,激烈搖動5s,立即加入10ml二甲苯,再激烈搖動20s,待靜
置分層後,從二甲苯層中小心吸取一份,放入1cm比色杯中於500nm波長下進行比色。記
錄吸光度A,在標准曲線上查出二甲苯層中 2,6－二氯靛酚的毫升數。整個操作應在30
min內完成。
A.6 計算公式
(2－V)·T·A
維生素 C(mg/100g)＝——————×100
W
式中: 2——所用 2,6－二氯靛酚染料的體積,ml ;
V——查得 2,6－二氯靛酚溶液的體積,ml;
A——稀釋倍數;
T——染料滴定度,mg/ml;
W——樣品重量,g。
附 錄 B
抗壞血酸純度檢驗法
(補充件)
B.1 稱取100mg(准確至0.1mg)抗壞血酸待測樣品,用 2%偏磷酸或 2%草酸溶液溶解稀
釋至 100ml。
B.2 吸取抗壞血酸溶液1ml於盛 10ml 2%偏磷酸或2%草酸溶液的錐形瓶中,加入6%碘
化鉀溶液 0.5ml和1%澱粉溶液五滴,搖勻。用 1.67×10**－4M碘酸鉀標准溶液滴定,
終點為極淡藍色。
B.3 計算公式
B.3.1 抗壞血酸濃度按式(B1)計算:
V1×0.088
抗壞血酸濃度＝—————— ……………………………… (B1)
V2
式中: V1——滴定時消耗1.67×10**－4 M碘酸鉀標准溶液的體積,ml;
V2——所取抗壞血酸溶液的體積,ml;
0.088——1 ml 1.67×10**－4 M碘酸鉀溶液相當於抗壞血酸的重量,mg;
B.3.2 抗壞血酸純度(%)按式(B2)計算:
C·V
抗壞血酸純度(%)＝———×100 ……………………………(B2)
W
式中: C——所標定抗壞血酸的濃度,mg/ml;
V——抗壞血酸溶液總體積,ml;
W——抗壞血酸重量,mg。
Ⅷ 維生素C的含量測定方法為（ ）。
【答案】B
【答案解析】本組題考查要點是"葯物的含量測定方法"。鈰量法可直接測定某些金屬的低價化合物及有機還原性物質。同時鈰量法還不易受制劑中澱粉、糖類的干擾，因此特別適合片劑、糖漿劑等制劑的測定。《中國葯典》收載的硫酸亞鐵片、葡萄糖酸亞鐵及其制劑、富馬酸亞鐵及其制劑、硝苯地平等葯物都是採用鈰量法測定。《中國葯典》採用酸鹼滴定法測定阿司匹林含量；維生素C具有還原性，《中國葯典》採用碘量法測定維生素C的含量。
Ⅸ 怎樣測定維生素C的含量
測定維生素C有多種方法，包括採用I2或二氯靛酚 （DPI）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、 簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反 應，精確測定被測物質的含量。DPI對於維生素C具有良好的選擇性，是一種理想的氧化劑。
傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定 終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手 工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不 同的反應要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀 解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終 點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利 多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方 便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定
的實驗方法。