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常用氨基酸分離方法有哪些

發布時間:2023-03-08 03:14:17

㈠ 氨基酸的分離分析方法常有有哪些

如果是兩個氨基酸的保留時間距離太近,那麼只能調整液相條件了。
比如調整流動相比例,或者是梯度比例,把兩個氨基酸拉開。
也可以適當調整衍生程序。
雖然衍生程序不會對氨基酸的保留時間有影響,不過會對它的信號產生影響。
如果這兩種氨基酸的峰高有所下降,或許分離度也可以達到要求。
還有就是注意峰型。
衍生化程序很容易損壞色譜柱,超高效色譜的壓力又高,色譜柱很容易損毀。
如果峰型不好,建議用純乙腈低流速反沖色譜柱。
或者是更換新色譜柱。

㈡ 從氨基酸混合物中分離鑒定氨基酸的方法有哪些

回復
落落wc
的帖子這個考察的就是氨基酸的分離方法,教材上都有。如根據電性,質量,大小等分離(電泳,離心,層析等方法)。書上寫得很詳細。

㈢ 氨基酸的檢測方法有哪些

1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。

㈣ 有機化學中氨基酸的分離和鑒定的思路是什麼

1.基礎知識(若學過氨基酸的酸鹼性,可直接pass)
氨基酸分子中的氨基是鹼性的,而羧基則是酸性的。但它們的酸鹼解離常數比一般的羧基-COOH和氨基-NH2低。
例如:甘氨酸:Ka=1.6×10-10,Kb=2.5×10-12
大多數的羧酸:Ka=10-5
這說明氨基酸在一般情況下不是以游離態的羧基和氨基存在的,而是以內鹽的形式存在(內鹽:偶極離子),H3N+ _CHRCOO - 。
可以把測得氨基酸的Ka值看成是氨基酸中銨離子的酸度:Ka~NH3+
把測得氨基酸的Kb值看成是氨基酸中羧酸根離子的鹼度:Kb~COO-
氨基酸即帶有氨基,又帶有羧基,所以是兩性化合物,既能和酸反應,也能和鹼反應。在強酸性溶液中,以正離子形式存在,在強鹼性溶液中以負離子形式存在。
若能水解的氨基個數少於能水解的羧基個數(溶液呈酸性),則為酸性氨基酸,包括:天冬氨酸,谷氨酸,天冬醯胺,谷氨醯胺四種;若能水解的氨基個數多於能水解的羧基個數(溶液呈鹼性),則為鹼性氨基酸,包括:賴氨酸,精氨酸,組氨酸,脯氨酸四種。

2.氨基酸的電泳
當氨基酸的溶液置於電場中時,所發生的變化取決於溶液的酸鹼度。

在相當鹼性的溶液中,陰離子Ⅱ超過陽離子Ⅲ,因此氨基酸向陽極遷移;在相當酸性的溶液中,陽離子Ⅲ是過量的,因此,氨基酸向陰極遷移,如果Ⅱ和Ⅲ完全相等,那麼,沒有凈遷移。在這樣的條件下,任何一個分子作為正離子和作為負離子存在的機會是完全相等的,向一個電極方向的任何微小移動,馬上就被一個相等的朝另一個電極的方向移動所抵消。當一個特定的氨基酸在電場的影響下不發生遷移時,這個氨基酸所在溶液的氫離子濃度叫做氨基酸的等電點,通常pI表示。凈電荷為零的氨基酸所在的溶液的pH值為pI。
氨基酸的pI值主要由其羧酸和氨基的電離常數來決定的,假如以pK1代表-COOH 基的電離常數,pK2代表-NH3+基團電離常數,則pI和它們的關系可用下式表示:見 圖片
在等電點時,氨基酸的溶解度最小,因而用調節等電點的方法可以從氨基酸的混合物中分離出某些氨基酸。
中性氨基酸pI =5.5~6.3 ,酸性氨基酸pI =2.8~3.2 ,鹼性氨基酸pI =7.6~10.6。一般來說,氨基酸含氨基,pI值較高,含羧基多者pH值較低 。當氨基酸中氨基多於一個時,當凈電荷為零時,氨基酸溶液鹼性強於氨基與羧基相等的溶液的pH值,故溶液pH值較高,pI值高。同理,氨基酸羧基多時,pI值較值小。
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這一部分是比較難理解,不清楚的地方還可以再問我。
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