目前,檢測PCT的實驗室方法有很多,不僅可以定性,亦可以定量。常用的方法有如下幾種:
放射免疫學分析法
利用人工合成的多克隆抗體特異地識別和連接合成氨基酸降鈣素原。該方法能檢測正常人的血清PCT,可靠敏感度為4pm/mL,檢測的是游離PCT、結合型PCT和降鈣素基因相關肽前體的混合物,而不能區分上述三種物質。該法檢測耗時長(19~22h),而且有放射性元素的污染使用受到限制。
2.雙抗夾心免疫化學發光法(ILMA)
運用雙單克隆抗體,其中一個抗體為降鈣素抗體,另一個為抗鈣素抗體,分別結合到PCT分子的降鈣素和抗鈣素部位,可排除交叉反應。其中一個抗體是游標記的,另一個未標記的抗體固定在試管的內壁,反應過程中兩個抗體與PCT分子結合而形成三明治復合體,發光部位於反應管的表面。該法操作簡便,特異性強,敏感性高,測定的低限值為0.1ng/mL,2h可以出結果。
3.膠體金比色法(B.R.A.H.M.SPCT-Q-半定量快速實驗)
採用膠體金技術,包括膠體金標記的抗抗鈣素的單克隆抗體和用作包被的抗降鈣素多克隆抗體,當標本(血清或血漿)加人標本孔,金標單克隆抗體與標本中的PCT結合,形成金標記的抗原抗體復合物。該復合物在反應膜上移動,與固定在膜上的抗降鈣素抗體結合形成更大的復合物。當PCT濃度超過0.5ng/mL,該復合物顯示紅色,紅色的深淺與PCT的濃度成正比,與標准比色板比較即可得出PCT的濃度范圍。結果分為四級:正常<0.5ng/mL;輕度升高>0.5ng/mL;明顯升高>2ng/mL;顯著升高>10ng/mL。該法具有快速簡便,易觀察的特點。
4.透射免疫濁度法
樣品中的PCT與試劑中的PCT單克隆抗體發生抗原-抗體反應,使反應液濁度增加,並在一定范圍內反應液濁度與所加人抗原的量呈線性關系,可使用生化分析儀或其它光學檢測儀器在6O0nm波長處測定反應液吸光度值,反應液吸光度值與所測PCT濃度成正比。該測定方法簡便、快速,可自動化,適合於批量檢測。2005年國內已有研製開發的PCT免疫比濁試劑盒供應,為PCT的廣泛應用提供了方便條件。雖然免疫透射比濁的方法學及臨床應用尚需做進一步的驗證,但其應用前景非常看好。