① 石蠟切片的製作方法
腸道的石蠟切片的製作
（1）
取材：用鋒利的刀切取羅非魚的一小段前腸（據胃5cm左右位置的前腸），組織塊的規格為
3～5mm×3～5mm×10～15mm。
（2）
固定：採用Bouin氏固定液裝瓶固定，固定液用量一般為組織塊體積的10～20倍。
（3）
沖洗：固定12～24h後，將材料自固定液中取出後，在70%酒精中換洗幾次，可在酒精中加幾滴氨水至洗去黃色為止。
（4）
脫水：70%酒精（1h）→80%酒精（1h）→90%酒精（1h）→95%酒精（1h）→無水乙醇Ⅰ（1h）→無水乙醇Ⅱ（1h）
（5）
透明：無水乙醇與二甲苯溶液（1:1）（1h）→二甲苯Ⅰ（1h）→二甲苯Ⅱ
（1h）
（6）
浸蠟：浸蠟的全過程應在恆溫設備中進行，將恆溫箱調至58℃。
二甲苯與石蠟混合液（1:1）（1h）→石蠟Ⅰ（1h）→石蠟Ⅱ（1h）
浸蠟必須徹底，否則組織內殘留透明劑會造成切片過程的困難和影響切片
的質量。
（7）
包埋：在小紙盒內注入溶化的石蠟，將已浸蠟的組織塊置入其內，使蠟塊迅速冷卻硬固，組織塊在蠟塊中可長期保存。
（8）
切片：包埋後的組織塊經修整後，用切片機切成5~7μm的石蠟帶。
（9）
粘片：將組織石蠟帶在50攝氏度的溫水中展片，然後用經1%HCl溶液處理干凈的載玻片撈片，組織帶即可粘在載玻片上。
（10）
烤片：將粘好的載玻片置於35℃左右的溫箱中烤乾，待2~3小時後，即可取下編號。
（11）
蘇木精—伊紅染色：將烤乾的片進行染色。
①脫蠟：將烤乾的切片放入二甲苯(I)10min→二甲苯(Ⅱ)10rain。
②復水：將脫蠟後的切片移入100％酒精5min→95％酒精5min→85％酒精5min→70％酒精5min→蒸餾水5min
③HE染色顯示腸道黏膜上皮內淋巴細胞：將蒸餾水洗滌後的切片移入Harris蘇木精液中，10min，使細胞核著色；用自來水洗去切片上殘余染液；用1％的鹽酸酒精分色3秒；用自來水浸洗3h，顯微鏡下觀察，直到胞核藍化為止；然後切片入曙紅溶液中染色5min，使細胞質著色。經95％酒精與100％酒精脫水，二甲苯透明後，中性樹膠封片。
④奧新蘭一沙黃染色顯示腸道內肥大細胞：切片常規脫蠟下行至蒸餾水→奧新蘭一沙黃液染色15～20min→蒸餾水速洗，鏡檢→95％和100％酒精分色脫水1—2min→二甲苯透明→中性樹膠封片。
⑤阿利新蘭醋酸染色顯示腸道內杯狀細胞：切片經脫蠟下行入蒸餾水→阿利新蘭醋酸染色10min→蒸餾水洗→1％高碘酸水液氧化5min→蒸餾水略洗一Schiff試劑染色（37℃恆溫箱）30min→普通水洗3次→蒸餾水2min→Ehrlich蘇木精染色5min→95％酒精和100％酒精脫水→二甲苯透明，中性樹膠封片。
切片經脫蠟下行入水：二甲苯(30
min)一二甲苯(10
min)一無水乙醇(5
min)一無水乙醇(5
min)一
95％
乙醇(5
min)一85％乙醇(5
min)一70％
乙醇(5
min)一流水沖洗(20
min)。人Ehrlich蘇木精染
色12
min，蒸餾水速洗。鹽酸酒精分色，鏡檢控制時間。入伊紅染色2
min，蒸餾水略洗。鹽酸酒精分色，鏡檢控制時間。經95％酒精與無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。
阿利新蘭—番紅復合染色液的方法稱Scaba法
阿利新蘭—番紅分別染色的方法稱Spicer法
② 現代生物學研究中石蠟製片技術的應用有哪些
熒游標記法、細胞培養、細胞雜交技術、石蠟切片技術、製片技術（包括臨時裝片和永久裝片）等等。希望對你有幫助。
③ 誰能告訴我石蠟封片怎樣操作
是經典的石蠟切片還是石蠟封片呢？
石蠟切片的最後一步就是封片
我們做的步驟是用中性樹膠封片
封片的過程中最應該注意的就是中性樹膠不要過多也不要過少，過多會溢出來，過少會出現空隙；詳細的量就要自己經驗掌握了。
另一個就是在放蓋玻片的時候動作要慢，不要有氣泡，如果有少量的氣泡，可以用解剖針較粗的那頭輕輕按壓蓋玻片趕出氣泡，如果氣泡過多，那就沒辦法了。