接種有哪些常用的接種方法

A. 高中微生物常用的接種方法有哪些

一般是平板劃線法和稀釋塗布平板法，但是還有兩種也會考，一種是穿刺接種法，多用於厭氧菌接種，一種是斜面接種法，用於增大接種面積

B. 微生物接種方法有哪幾種

接種常見方法有：平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養法、穿刺接種法、液體接種法。

一、平板劃線分離法

平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。

二、斜面接種法

該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

三、穿刺接種法

穿刺培養，是指將帶有欲培養微生物的接種針深插至半固體培養基（瓊脂含量0.2%〜1.0%）中接種，並進行微生物固體深層培養的一種方法，主要用於厭氧或兼性厭氧微生物的培養。

四、液體接種法

液體培養，是指將微生物直接接種於液體培養基中，並不斷振盪或攪拌，使微生物均勻地在液體培養基中生長繁殖的一種培養方法。液體培養適用於好氧微生物和植物組織培養，以迅速得到大量繁殖體為目的。

五、塗布接種法

微生物學實驗中的一種操作方法。由於將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且採用稀釋倒平台法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是塗布平板法。

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接種注意事項

1、每次接種時間最長不得連續超過2小時。

2、操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具，種塊碰到外面物體則作廢。

3、一般用種量：每支試管母種可擴繁一級種100支左右；擴接原種6～8瓶。

C. 常用的免疫接種方法有哪些

預防免疫已成為家禽疾病防治中的重要環節，在生產實踐中常用的免疫接種方法有滴鼻、點眼免疫法，飲水免疫法，注射免疫法和噴霧免疫法，必須掌握正確的免疫接種方法及其注意事項。具體選用哪種接種方法應根據疫苗種類、日齡及免疫目的而定，一般應以疫苗的說明書為准。

（1）滴鼻、點眼免疫

滴鼻、點眼免疫能確保每隻鴨得到准確疫苗量，達到快速免疫，形成良好的局部免疫，抗體效果好，用於弱毒活疫苗的接種，適應於任何日齡，對於幼雛來說，這種方法可以避免或減少疫苗病毒被母源抗體的中和，免疫效果較好。這種免疫法可以產生整齊、均勻的免疫力，節省疫苗，但是逐只接種，比較費時費力。操作時應使用廠家配套的稀釋液和滴頭；配製疫苗時搖動不要太劇烈；疫苗要現配現用，2小時內用完；疫苗避免受熱和陽光照射；點眼時滴頭距離眼1厘米，以防戳傷眼；滴鼻時，用食指封住一側鼻孔，以便疫苗滴能快速吸入；滴鼻、點眼時，待疫苗在眼或鼻孔吸收後再放開鴨；免疫接種後的廢棄物應焚毀。

（2）飲水免疫

飲水免疫是一種便捷的接種方法，在生產中應用較多，將一定量疫苗放入水中讓鴨自由飲用，通過吞咽疫苗，病毒離子經齶裂、鼻腔、腸道，產生局部免疫及全身免疫。比個體免疫省時省力，但飲水免疫疫苗用量多，免疫不均勻，個體飲入疫苗量不準確。為保證免疫效果，必須注意用於飲水免疫的疫苗是高效價的，免疫前可加免疫增效劑；免疫前後3天不能飲水消毒；免疫前後1～2天禁止使用抗病毒葯物；免疫前視季節和舍溫情況限水2～3小時，以便及時飲水，並在短時間內飲完；在水中加入0.2%～0.3%的脫脂奶粉；不能使用金屬器皿，稀釋疫苗用水量要適當，使用清潔不含氯、鐵等離子的水稀釋。

（3）注射免疫

注射接種最常用的是皮下注射、皮內注射、肌內注射、靜脈注射等免疫方法。注射接種時，要注意油乳劑疫苗啟封後，要在當天用完，活疫苗在2小時內用完；接種過程中，注意搖勻疫苗；注射器要嚴格消毒，勤換針頭；接種前將油乳劑疫苗放置至溫度25℃左右，一般至室溫；疫苗使用時不要直接傾倒，以免污染，可以用干凈的連續注射器抽取；接種過程中注意調校注射器以保證劑量准確；油乳劑疫苗如有凍結破裂現象、異物或雜質存在不能使用；注射兩種油乳劑疫苗時，應避免兩種疫苗接種在同一點上。

（4）噴霧免疫

此方法是用壓縮空氣通過氣霧發生器，使稀釋的疫苗形成直徑1～10微米的霧化粒子，均勻的浮游於空氣中，隨呼吸而進入體內，以達到免疫的目的。免疫前後可使用抗應激的葯物，來增強免疫效果。操作時，應該注意使用高效價的疫苗，劑量加倍；用蒸餾水或去離子水稀釋疫苗；霧粒直徑以1～10微米為最佳；氣霧免疫時房舍應密閉，減少空氣流動，並應無直射陽光為好。這種方法省時省力，適宜大群的免疫接種，有時會誘發呼吸道疾病。

D. 疫苗的免疫接種方法有哪幾種

免疫必須做到注射部位準確，消毒嚴格，葯量准確，不能隨意改變免疫劑量，個個免疫，不漏針。採用注射途徑接種的疫苗，在瓶塞上固定一個消毒的針頭專供吸取葯液，吸液後不拔出，用酒精棉包裹，以便再次吸取。常用的免疫接種方法主要有以下幾種：

（1）皮下注射

皮下注射是目前使用最多的一種方法，大多數疫苗都是經這一途徑免疫。注射部位在豬的耳根或股內側。皮下組織吸收比較緩慢而均勻，如豬丹毒弱毒菌苗、豬丹毒氫氧化鋁甲醛菌苗、豬肺疫氫氧化鋁甲醛菌苗都可皮下注射。油類疫苗不宜皮下注射。

方法：注射部位先剪毛（無毛或少毛區也可不剪），用碘酊或酒精棉球消毒，用左手食指和中指捏起皮膚，食指壓住頂點，形成三角凹窩，右手持注射器，迅速將針頭刺入凹窩中心皮膚內2厘米深，放開皮膚，慢慢注入葯液，葯量大時應分點注射，注射完畢，拔出針頭後用棉球按住注射部位以消毒。

（2）肌肉注射

肌肉注射是將疫苗注射於肌肉內，注射部位在頸部兩側中1/3處，或臀部、股部肌肉較豐滿部位。剪毛，酒精或碘酊消毒，把針頭直刺入肌肉，注入葯物。如豬瘟、豬丹毒、豬肺疫三聯凍干弱毒苗。肌肉注射時如果葯量偏大可分點注射，但注射時不可打「飛針」。注射時注意針頭要足夠長，以保證疫苗確實注入肌肉里。

（3）滴鼻接種

滴鼻接種是屬於黏膜免疫的一種，黏膜是病原體侵入的最大門戶，有95%的感染發生在黏膜或由黏膜侵入機體，黏膜免疫接種可刺激產生局部免疫，能對有害抗原或病原體產生高效體液免疫反應和細胞免疫反應。目前使用比較廣泛的是豬偽狂犬病基因缺失疫苗的滴鼻接種。

（4）皮膚刺種

豬痘弱毒疫苗常用此法接種，選定無血管處，用刺種針或鋼筆尖蘸取疫苗刺入。

（5）口服

即是將疫苗混於飼料或飲水裡，或抹於母豬的乳頭上經口服下，而達到接種目的。必須注意，用於拌疫苗的飼料要新鮮，不宜用酸敗或發酵飼料拌。大小動物要分開喂，使其能均勻吃到含疫苗飼料。如豬肺疫弱毒菌苗用此方法免疫接種，飲水免疫先停水4小時左右，再飲水免疫接種，稀釋疫苗的水要純凈，尤其不能用含有消毒葯物的水稀釋疫苗。

（6）氣管內注射和肺內注射

這兩種方法多用在豬氣喘病的預防接種。但目前氣喘病疫苗已經生產出可用於肌肉注射的疫苗了。

（7）穴位注射

在注射疫苗時多採用後海穴注射，能誘導較好免疫反應。目前，在養豬生產中應用這種方法免疫的疫苗有傳染性胃腸炎疫苗、豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗。其中豬瘟兔化弱毒疫苗，後海穴比常規肌肉免疫注射更具有堅強的保護力。採用穴位注射要有確切的注射位點，進針有方向，下針有深度，劑量准確。

（8）超前免疫

超前免疫是指在仔豬未吃初乳時注射疫苗，注苗後1～2小時才給吃初乳，目的是避開母源抗體的干擾和使疫苗毒盡早佔領病毒復制的靶位，盡可能早刺激產生基礎免疫，這種方法常用在豬瘟的免疫。

E. 免疫接種方法有哪些在應用中如何確定

免疫接種方法根據其接種途徑可分為：滴鼻、滴眼、氣霧、飲水、刺種、皮下或肌肉注射等。採用哪種免疫接種方法，既要考慮疫（菌）苗的特性和免疫效果，又要考慮操作方便和經濟效益。

（1）滴眼滴鼻免疫。這種接種方法勞動強度大，時間長，對操作人員的責任心要求強。雖然禽群應激反應較大，但免疫效果確實，尤其適合預防呼吸道疾病的活疫苗。適用於雞新城疫Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ系疫苗，雞傳染性支氣管炎疫苗和雞傳染性喉氣管炎弱毒疫苗的接種。滴眼滴鼻的工具可用滴管或滴眼瓶。事先用1毫升水試一下，看能滴多少滴，按每羽1～2滴，根據疫苗包裝用生理鹽水稀釋，不宜用冷開水，以免其中的雜質殺死部分病毒，影響效果。此方法多用於雛雞，將稀釋好的疫苗點眼或滴入鼻孔內，滴眼的效果稍好於滴鼻。兩滴疫苗最好分別滴進眼和鼻孔內。其操作的關鍵是接種後稍等片刻，待疫苗液確已吸入眼或鼻內再放開雞只。

（2）飲水免疫。它能減輕勞動強度和雞群應激，適合建立消化道及呼吸道的局部免疫。但其影響因素較多，尤其對環境溫度、疫苗劑量、水質、飲水量、飲水器衛生等注意不夠時免疫效果將受到較大影響。可靠性差，主要是免疫水平不整齊。由於本方法要求使用活疫苗，所以在我國目前的條件下，不適宜過多地採用飲水免疫。飲水免疫是將疫苗溶於飲水中，讓雞群在1～2小時以內飲完。可用於新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病、禽腦脊髓炎等弱毒疫苗都可以採取飲水免疫。為了使飲水免疫達到一定的效果，必須注意如下幾點：①採用飲水免疫的疫苗必須是高效價的，用量加倍或再稍多一點。②為了使含有疫苗的飲水能在1～2小時以內飲完，先要停水2～5小時，依氣溫而定，溫度高停水時間短，反之則長。每隻雞的飲水量大約是：5～7日齡4～5毫升，10～14日齡8毫升，20日齡12毫升，28日齡17毫升，40～50日齡28毫升，開產前70毫升。飲疫苗後也要停止飲水1小時。③為了減少疫苗損失，最好能在稀釋疫苗的水中加入0.3%的脫脂奶粉或鮮牛奶。鮮牛奶應煮沸，靜置冷卻，濾除表層奶脂，再加入飲水中。④飲水免疫時，飲水器要充足，以保證所有的雞能在短時間內飲到足夠的免疫量。飲水器要清潔衛生，不要用金屬飲水器。⑤採用飲水免疫時，二次免疫間隔時間不宜過長。

（3）氣霧免疫。可以節省勞動力。若操作得當則效果甚好。很適合對呼吸道有親嗜性的弱毒疫苗。如新城疫Ⅳ系苗、雞傳染性支氣管炎疫苗。但本方法容易激發呼吸道感染，引起慢性呼吸道病的暴發。所以免疫前必須對氣霧機的性能進行測試，嚴格控制霧滴大小。一般雛雞用霧滴的直徑為30～50微米，成年雞為5～10微米。噴霧前後幾天應在飼料或飲水中添加適量抗菌葯。

（4）注射與刺種。這兩種方法均能使抗原完整迅速地到達淋巴結等免疫器官，所以適用於大多數疫苗的免疫，如果能保證劑量准確，則效果很好。其不足之處是費工費時，對雞群應激較大，操作時禁止使用未消毒的器具，尤其吸取疫苗的針頭與注射針頭要絕對分開。疫苗應隨用隨稀釋。有些場在接種上千甚至幾萬只雞前，一次將幾十瓶或上百瓶疫苗稀釋完，置於常溫下不斷使用，這樣越後用的疫苗效價越低，尤其是在稀釋液質量不好或環境溫度偏高的情況下，效果更差。另外，要經常核對注射器的實際注射量，以及刺種器內是否蘸滿疫苗也非常重要。

刺種適用於雞新城疫Ⅰ系疫苗、雞痘疫苗的接種。可用刺種針、蘸水筆或用大號縫衣針將針鼻磨去一半，蘸取稀釋好的疫苗，刺種在雞翅無血管處的皮下。每1000羽的疫苗可用25毫升生理鹽水稀釋，充分搖勻後進行刺種。

注射時用注射器將疫（菌）苗注射到肌肉或皮下。肌肉注射的部位可在肌肉豐滿處，如胸部肌肉或腿部肌肉。對小雞採用肌肉注射時，要特別注意，以免刺入太深，刺到肝臟或心臟，造成死亡。皮下注射的部位選擇雞的頸中部皮下，由上向下注射。它適用於各種油乳劑滅活苗的免疫。

F. 微生物學常用的接種技術有哪些各有何特點

細菌的接種方法有很多種，如劃線法、塗布法、傾注法、斜面接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等，其方法和應用各有不同。
一、劃線法：
此法主要用於菌種分純，獲得單菌落.

由接種環沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，並逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養後，可在平板表面得到單菌落。

優點：可以觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。

缺點：不能用於菌落計數。

二、塗布法：

此法主要用於菌落總數計數.

先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中，然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻，將塗抹好的平板平放於桌上20~30min，使菌液滲透入培養基內，然後將平板倒轉，保溫培養，至長出菌落後即可計數。

優點：可以計數，可以觀察菌落特徵。

缺點：接種前需梯度稀釋，吸收量較少，較麻煩，平板不幹燥效果不好，容易蔓延。

三、傾倒法：

此法主要用於菌落總數的計數.

吸取1ml 菌液加入平板中，倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基，輕輕轉動平板，使菌液與培養基混合均勻，冷疑後倒置，適溫培養。至長出菌落後即可計數。
優點：可以計數，較方便。

缺點：接種前需梯度稀釋，不能觀察菌落特徵，不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。

四、斜面接種法：

此法主要用於保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力.

用接種環或接種針伸入菌種管內，挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養管內，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之後，用火焰滅菌培養管口，並塞上棉塞，置於37℃培養。

五、液體培養基接種法：
此法主要用於菌液比濁實驗

用滅菌接種環挑取菌落或標本，在試管內壁與液面交界處輕輕研磨，使細菌均勻得散落在液體培養基中。

六、螺旋接種法：
此法主要用於菌落總數計數
可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種。對數減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉式培養基表面。培養基上每一點的容量可以被知曉和校準。菌液的濃度可以通過培養皿上一定區域的菌落數量除以同區域樣品分注量來計算。

優點：螺旋接種法菌液無需稀釋（其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數），自動化接種，效率高，可節省3/4 的耗材和時間。

缺點：產品成本高，適用於樣品量比較大的實驗。

G. 微生物接種技術有哪些

七、塗布接種

先倒好平板，讓其凝固，然後再將菌液倒入平板上面，迅速用塗布棒在表面作來回左右的塗布，讓菌液均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。

H. 接種細菌的三種方法各有什麼用途

接種細菌的方法各有什麼用途：

1、平面接種法：此方法主要用於鑒定或保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力。

2、菌落分純法：此方法主要用於分離瓊脂平板上的混合菌。

3、液體培養基接種法：此方法可用於比濁試驗中。

4、平板劃線接種法（又稱分離培養法）：平板劃線接種法為最常用的分離培養細菌的方法，通過平板劃線後，可使細菌分散生長，形成單個菌落，有利於從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法比較多，其中以分區劃線發育曲線劃線法較為重用。其目的都要時細菌呈現單個菌落生長，便於同雜菌菌落鑒別。

5、純培養細菌接種法：用於培養保存菌種及其實驗用。

6、半固體培養基穿刺培養法：用於保存菌種及間接觀察細菌之動力（無動力之細菌僅沿穿刺線生長，清晰可見；有動力的細菌使培養基呈現渾濁樣，穿刺線甚至難以看出。）

接種注意事項：

1、在超凈工作台上操作，工作台在使用前要紫外消毒，酒精消毒等。

2、應在酒精燈火焰前操作。

3、取菌種前灼燒接種針或接種環（要燒紅）。

4、燒紅的接種針（環）少使冷卻在取菌種，以免燒死菌種。

5、接種後應盡快塞上面塞。

I. 什麼是免疫接種常用的免疫接種方法有哪些

免疫接種是將疫苗或菌苗經一定途徑接種於雞體，使雞在不發病的情況下產生免疫應答，從而在一定時期內對某種傳染病具有抵抗力。

不同的疫苗，對接種方法有不同的要求，為了發揮疫苗的應有效力，接種的方法應盡量接近疾病自然的傳播方式。常用於免疫接種的方法有以下幾種。

（1）滴鼻與點眼 適用於新城疫Ⅱ系和Ⅳ系苗、「傳染性支氣管炎」弱毒苗等，優點是只要操作認真，則每隻雞的接種量比較均勻，缺點是比較費工。

滴鼻和點眼可用滴管、空眼葯水瓶或5毫升注射器（針尖磨禿），事前用1毫升水試一下，看有多少滴。2周齡以下的雛雞以每毫升50滴為好，每雞2滴，每毫升滴25隻雞，如果1瓶疫苗是用於250隻雞的，就稀釋成250/25＝10毫升。比較大的雞以每毫升25滴為好，上述1瓶疫苗就要稀釋成20毫升。疫苗應當用生理鹽水或注射用水稀釋，不宜用冷開水，以免其中的鹽鹼等雜質殺死一部分病毒，影響效果。

滴鼻與點眼的效果沒有明顯差別，每雞兩滴可以滴在一個鼻孔、兩個鼻孔或鼻眼各一滴，不過一隻眼內不能容納2滴。要看到每一滴疫苗確實被雞吸進鼻腔或在眼內耗下去，才能將雞放開。

（2）飲水法 是把疫苗混入水中讓雞自由飲用。它的優點是省工省時，適用於大群雞同時接種，應激反應小，缺點是由於飲水不均等以及其他因素的干擾，免疫效果不整齊，疫苗用量大，適於飲水的疫苗有新城疫疫苗、傳染性支氣管炎疫苗、傳染性法氏囊弱毒疫苗等。

飲水免疫的注意事項：

疫苗效價應高，要加大1.5～2倍用量。

配製疫苗的水中不能含有任何損害疫苗的物質，如氯、鐵、銅、鋅等離子和消毒劑，最好用冷開水。

飲水器要充分洗干凈，不含上述有害物質，數量要充足，保證雞同時都能飲到水。

飲水中應加0.2%的脫脂奶粉或2%的脫脂牛奶，以保護疫苗或病毒。

含有疫苗的飲水應在2小時之內飲完，要做到這一點，事先要停供飲水3～5小時（依不同季節酌定）。停水後，雞的渴欲較強，2小時的飲水量大約是：5～7日齡每雞4～5毫升，10～14日齡8毫升，20日齡12毫升，28日齡17毫升，40～45日齡28毫升，開產前80毫升。雞飲完後再停食1小時。

飲水免疫必須反復進行，至少應在2天內進行2次，以保證免疫效果。

（3）刺種法 此法適用於雞痘疫苗、新城疫疫苗等。刺種時按100頭份疫苗加1毫升生理鹽水、蒸餾水或冷開水，溶化均勻，用刺種針或鋼筆尖蘸取疫苗，在翅下無血管處刺種1～2下，要保證每隻雞得到小米粒大小的一滴疫苗。

（4）注射法 此方法是把疫苗注射到皮下或肌肉內，其劑量准確，效果確實，但費時費工。適用於雞馬立克氏病疫苗、新城疫Ⅱ系疫苗、雞霍亂苗和各種滅活苗，注射時凍干苗按每頭份加稀釋液0.5～1毫升溶勻後在頸部或胸部或其他部位的皮下或肌肉內注射0.5～1毫升。馬立克氏病苗必須用廠家指定的專用稀釋液，稀釋後每隻雛雞頸部皮下注射0.2毫升。各種滅活苗（鋁膠苗或油苗）按說明用量皮下或肌肉注射。

胸部肌肉注射時針頭不可垂直刺入或刺入過深，以免刺傷內臟引起死亡，腿部注射應在外側肌肉豐滿處注射，不可在內側注射以免刺傷血管和神經引起出血和跛行。

（5）氣霧 氣霧免疫的方法，是將雞置於密閉的室內，用專門的氣霧器將稀釋過的疫苗噴成極細的小滴，彌漫在空氣中，使雞吸入肺部深入及氣囊。此法適用於「傳支」弱毒苗等，免疫效果比較好，但對雞的呼吸器官刺激較大，常引起不良反應，故較少應用。