Ⅰ 轉基因植物有哪些分析鑒定方法
分析、確定了75個品種的轉基因構建成分,為開展轉基因檢測奠定了基礎。
2、不同類型的植物提取基因組DNA的方法略有差異,該研究優化了CTAB、SDS快速提取法,並選擇了磁珠吸附試劑盒法,成功提取了適合於PCR反應的植物基因組DNA。
3、以植物內源基因18SrRNA為靶標,設計、優化後篩選出特異性引物和探針,建立了以18SrRNA為目標的檢測植物基因組DNA提取質量的PCR與熒光PCR鑒定體系。
4、首次以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物,優化實驗參數,建立了轉基因植物PCR定性檢測方法體系,靈敏度達0。
1﹪。
5、克隆了CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb的陽性質粒作為轉基因植物檢測的陽性對照。
6、於反應體系中引入UNG酶,建立了無污染的熒光PCR擴增體系。
7、首次以FAM熒光素標記探針5端作為發光基團,以TARMA標記探針3端為淬滅基團,以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物和探針,優化實驗參數,建立了轉基因植物通用性熒光PCR定性檢測方法體系。
8、以FAM和TET兩種熒光素標記外源基因和內源基因,建立了轉基因大豆抗除草劑基因EPSPS和轉基因玉米抗蟲基因CryIAb的熒光PCR定量檢測體系,兩體系的靈敏度均達到0。
1﹪以上。
9、首次利用反向PCR技術擴增出華番1號基因組未知DNA序列,並通過DNA測序,利用BLAST軟體進行同源性比較,找出載體與基因組整合位點DNA序列。
10、利用熒光PCR技術,設計出特異性引物與探針,優化實驗參數,建立了一種靈敏、精確、定量和鑒定華番1號品種特異性的高效檢測體系。
這在國內為首次利用整合位點進行轉基因植物檢測和品種特異性鑒定的方法……
Ⅱ 植物的轉基因有哪些方法
目前已發展了許多用於植物基因轉化的方法,這些方法可分為三大類:一類是載體介導的轉化方法,即將目的基因插入到農桿菌的質粒或病毒的DNA等載體分子上,隨著載體DNA的轉移而將目的基因導入到植物基因組中,農桿菌介導和病毒介導法就屬於這種方法;
第二類為基因直接導入法,是指通過物理或化學的方法直接將外源目的基因導入植物的基因組中,物理方法包括基因槍轉化法、電激轉化法、超聲波法、顯微注射法和激光微束法等;化學方法有PEG介導轉化方法和脂質體法等;
第三類為種質系統法,這包括花粉管通道法、生殖細胞侵染法、胚囊和子房注射法等。
Ⅲ 如何分辨轉基因植物
可以從以下幾個方面分辨轉基因黑豆:
1、轉基因的大豆通常形態整潔,幾乎看不到任何蟲蛀痕跡,轉基因大豆,培育目的就是抗蟲,抗葯。
2、轉基因大豆沒有活性,泡在水裡不能發芽,容易發出臭味。
(3)鑒定轉基因植株的常用方法有哪些擴展閱讀
轉基因大豆可以抵抗殺草劑——草甘膦(毒滴混劑)。草甘膦會把普通大豆植株與雜草一起殺死。 這種大豆被稱為轉基因大豆。而這種轉基因技術終於走出實驗室和試驗田,進入像玉米、大豆和棉花作物的日常耕作。
轉基因大豆中的粗脂肪、粗蛋白、脂肪酸、黃酮和酚酸的含量都明顯高於非轉基因大豆。並且.這些物質均具有提高植物對物理環境的適應性.增強植物抵禦天敵侵襲及抵抗病害的能力。
Ⅳ 轉基因植株檢測方法和目的
這個檢測是要分兩個部分的
一個是檢測是否導入目的基因
篩選出已導入目的基因的植株後還要檢測目的基因是否表達
檢測目的基因是否導入的方法有DNA-RNA分子雜交技術等
分子雜交技術比較常用出現放射性雜交分子說明已導入
之後檢測目的基因是否表達
一般用抗原抗體特異性反應等
如果你的目的基因表達出來後是某種蛋白質就可以使用
不過前提你得有這種蛋白質過程你知道的
假如你是想抗蟲棉中導入毒蛋白基因
你還可以直接組培形成成熟的植株
置於棉鈴蟲的侵蝕下
如果棉鈴蟲掛了就是成功表達了
如果沒掛。。。那就重來吧
基因工程這里成功率很低的。。。
Ⅳ 如何鑒定轉基因植物
抗性基因篩選、報告基因篩選、目的基因的PCR、Southern、Northern或者Western雜交。
Ⅵ 轉基因植物怎麼分辨
轉基因植物或轉基因種子絕不可能通過外觀區分得出來的,因為到目前為止,只有轉入抗蟲抗除草劑抗寒抗某種病害的基因的,從來還沒有轉入顏色基因的。
只能老老實實通過基因檢測才可以判斷是不是轉基因的,而且目前只能確定是轉基因的,而無法確定不是轉基因的。比如如果在某種植物體內檢測到bt基因,則可以判斷是轉基因植物,但如果某種植物體內沒有檢測到bt基因,最多隻能確定沒有轉入bt基因,而不能排除轉入其他基因的可能性。而且即使同是bt基因,但也可以經過不同修飾而變得序列完全不同,檢測難度更大。
Ⅶ 轉基因植株的驗證必須具備哪些步驟(措施)
以植物轉基因為例:
載體構建;
包括目的基因擴增,表達載體構建。
遺傳轉化;
最簡單的花序浸染,常用的農桿菌轉化、基因槍轟擊,還有花粉管通道等。
陽性篩選;
標記基因篩選,陽性植株目的基因DNA水平PCR檢測、RNA水平PCR檢測、目的基因表達蛋白水平檢測。
功能驗證。
即表型分析。
Ⅷ 轉基因植物的篩選常用哪些方法
轉基因的方法很多 最常用的有農桿菌介導的遺傳轉化法和基因槍轉化法 無論哪種方法 轉化細胞與非轉化細胞相比都只佔少數 兩者存在競爭 而作為異種細胞的轉化細胞的競爭力很弱18。因此 必須對轉化細胞進行篩選18。再生植株有可能逃避選擇而成為假轉化體 另外 外源基因的整合 表達機制也非常復雜 因此 必須對轉基因植株中外源基因的特性進行檢測
Ⅸ 從DNA、RNA、蛋白水平上各寫出一種鑒定轉基因植株的方法
在分子水平上來檢驗的是na和DNA。
植物細胞經載體法間接或物化法直接轉化後,大部分細胞是沒有轉化的,這就需要將這些未轉化細胞與極少數轉化細胞區別開來,淘汰未轉化細胞,然後利用植物細胞的全能性在適宜的環境條件下,使轉化細胞再生成可育的轉基因植株。
(9)鑒定轉基因植株的常用方法有哪些擴展閱讀:
以植物作為生物技術的實驗材料有其特定的優點,那就是植物細胞大部分都有全能性,可以用單個細胞分化發育出整個植株。這樣,經過基因工程改造的單個植物細胞有可能再生成一棵完整的轉基因植株。
植物基因工程用作外源基因的轉化受體有許多種,包括胚性愈傷組織(cai—lus)、分生細胞、幼胚、成熟胚、受精胚珠、種子和原生質體等。從這些受體細胞都可獲得再生的轉基植株。