平板塗布方法有哪些

1. 高中生物……什麼是塗布平板法具體操作

一種常用接種細菌的方法。字面意思就是把細菌塗抹在平板培養基上。
具體操作：1.吸取含細菌的原液進行梯度稀釋處理；
2.取對應數量的無菌牛肉膏蛋白腖培養基（常用）；
3.用吸管或移液槍按照由低濃度向高濃度的順序分別吸取菌液滴在培養基表面，然後用平板抹勻（∟形的玻璃棒）
4.倒轉平板，培養。
（注意每一步的無菌操作。大概就是這么個流程，細致的要具體實驗具體弄。）

2. 稀釋倒平板法，稀釋塗布平板法，平板劃線法，都是什麼啊我有點混

1. 平板劃線分離法
   由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線,微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少,並逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養後,可在平板表面得到單菌落.

2. 稀釋倒平板法
   先將待分離的材料用無菌水作一系列的梯度稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …）,然後分別取不同稀釋液少許,與已溶化並冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻後,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固後,製成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出出菌落.如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的.隨後挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養.

3. 稀釋塗布法：

   先將待分離的材料用無菌水作一系列的梯度稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …）,讓後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基表面進行培養當稀釋倍數夠高時可獲得單個細菌形成的菌落。
   
   
   

3. 塗布平板法的實驗方法

1．樣品稀釋液的制備 准確稱取待測樣品l0g，放入裝有90ml無菌水並放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置搖床上振盪20min，使微生物細胞分散，靜置20-30s，即成10-1稀釋液；再用1ml無菌吸管，吸取10-1稀釋液lml，移入裝有9ml無菌水的試管中，吹吸3次，讓菌液混合均勻，即成10-2稀釋液；再換一支無菌吸管吸取10-2稀釋液1ml，移入裝有9ml無菌水的試管中，也吹吸三次，即成l0-3稀釋液；以此類推，連續稀釋，製成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀釋菌液。
用稀釋平板計數時，待測菌稀釋度的選擇應根據樣品確定。樣品中所含待測菌的數量多時，稀釋度應高，反之則低。通常測定細菌菌劑含菌數時，採用10-7、10-8、10-9稀釋度，測定土壤細菌數量時，採用10-4、10-5、10-6稀釋度，測定放線菌數量時，採用l0-3、10-4、10-5稀釋度，測定真菌數量時，採用10-2、10-3、10-4稀釋度。
2．平板接種培養 平板接種培養有混合平板培養法和塗抹平板培養法兩種方法。
（1）混合平板培養法 將無菌平板編上10-7、10-8、10-9號碼，每一號碼設置三個重復，用無菌吸管按無菌操作要求吸取10-9稀釋液各1ml放入編號10-9的3個平板中，同法吸取10-8稀釋液各lml放入編號10-8的3個平板中，再吸取10-7稀釋液各lml放入編號10-7的3個平板中（由低濃度向高濃度時，吸管可不必更換）。然後在9個平板中分別倒入已融化並冷卻至45—50℃的細菌培養基，輕輕轉動平板，使菌液與培養基混合均勻，冷疑後倒置，適溫培養。至長出菌落後即可計數。
（2）塗抹平板計數法 塗抹平板計數法與混合法基本相同，所不同的是先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中，待凝固後編號，然後用無菌吸管吸取0.1ml菌液對號接種在不同稀釋度編號的瓊脂平板上（每個編號設三個重復）。再用無菌刮鏟將菌液在平板上塗抹均勻，每個稀釋度用一個滅菌刮鏟，更換稀釋度時需將刮鏟灼燒滅菌。在由低濃度向高濃度塗抹時，也可以不更換刮鏟。將塗抹好的平板平放於桌上20—30min，使菌液滲透入培養基內，然後將平板倒轉，保溫培養，至長出菌落後即可計數。

4. 澆注平板法與塗布平板法有什麼區別

澆注平板法又稱為稀釋倒平板法，與塗布平板法的主要區別如下：

一、方法不同

1、稀釋倒平板法：先將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。

2、塗布平板法：首先將待測樣品製成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布於平板中的培養基內。經培養後，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。

二、優勢不同

1、稀釋倒平板法：便於計數，便於觀察菌落特徵。

2、塗布平板法：便於觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。

三、劣勢不同

1、稀釋倒平板法：吸收量較少，平板不幹燥效果不好，易蔓延。

2、塗布平板法：不能准確計數。

5. 稀釋塗布平板法是什麼

該法是將已熔化並冷卻至約50℃(減少冷凝水)的瓊脂培養基，先倒入無菌培養皿中，製成無菌平板。待充分冷卻凝固後，將一定量(約0.1 ml)的某一稀釋度的樣品懸液滴加在平板表面，再用三角形無菌玻璃塗棒塗布，使菌液均勻分散在整個平板表面，倒置溫箱培養後挑取單個菌落。

計數時，首先將待測樣品製成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布於平板中的培養基內。

微生物平板塗布法有以下注意事項：

1、整個過程需要保證在無菌條件下進行。試管、槍頭等儀器設備都需要提前經過滅菌環節才可以使用。

2、接種環使用前應當在酒精燈上灼燒至紅熱，以保證灼燒充分。

3、蘸取少量菌液,先在培養皿上劃第一條,注意不要轉動接種環。

4、在稀釋過程中要充分混勻，吸取100ul到平板上，然後用燒好的塗布棒均勻塗抹開，各個方向都可以塗布，塗布完灼燒。

6. 什麼是稀釋塗布平板法

稀釋塗布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落。

7. 稀釋塗布平板法的步驟

稀釋操作：1、將分別盛有9ml水的6支試管滅菌,並按10^1到10^6的順序進行編號.2、用移液試管吸取1ml培養的菌夜,注入10^1倍稀釋的試管中.用手指輕壓移夜管上的橡皮,吹吸三次,使菌液與水充分混勻.3、從10^1倍稀釋的試管中吸取1ml稀釋液,注入10^2倍稀釋的試管中,重復第二步的混勻操作.以此類推,直到完成最後一支試管的稀釋.注意：移夜管需要經過滅菌.操作時,試管口和移夜管應在離火焰1~2cm處
塗布操作：1、將塗布器浸在盛有酒精的燒杯中.2、取少量菌夜（不超過0.1ml）滴加到培養基表面.3、將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃,待酒精燃盡後,冷卻8~10s.4、用塗布器將菌液均勻地塗布在培養基表面,塗布時可轉動培養皿,使菌液分布均勻.
注意：1.將塗布器末端浸在盛有體積分數為百分之七十的酒精的燒杯中.取出時,要讓多餘的酒精在燒杯中滴盡,然後將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃.

8. 倒平板、劃平板、塗布操作步驟

倒平板、劃平板、塗布操作步驟

一、無菌准備：

1、提前1個小時打開無菌室紫外燈消毒滅菌

1、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；

2、將用於微生物培養的器皿、接種的用具和培養基等進行滅菌；

3、所有無菌操作都需在酒精燈旁操作。

二、配置培養基：

1、LB肉湯：肉湯粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸餾水；

2、營養瓊脂培養基：瓊脂培養基粉300g、5g葡萄糖、1000ml 蒸餾水。

三、倒平板操作：

1、將滅菌過的培養皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養基的錐形瓶，左手拔出棉塞。

右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰；

2、用左手將培養皿打開一條稍大於瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養基（約10～20ml）倒入培養皿，左手立即蓋上培養皿的皿蓋，輕輕搖勻。

3、等待平板冷卻凝固（大約需5～10min）後，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上。

四、平板劃線操作：

1、將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅；

2、在火焰旁冷卻接種環，並打開盛有菌液的試管的棉塞；

3、將試管口通過火焰；將已冷卻的接種環伸入菌液中，沾取一環菌液；將試管口通過火焰，並塞上棉塞；

4、左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養基。

5、灼燒接種環，待其冷卻後，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三區域內劃線。注意不要將最後一區域的劃線與第一區相連。

6、將平板倒置，放入培養箱中培養。

五、塗布平板操作：

1、將塗布器浸在盛有酒精的燒杯中；

2、取少量菌液（不超過0.1ml），滴加到培養基表面；

3、將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃，待酒精燃盡後，冷卻8～10s；

4、用塗布器將菌液均勻地塗布在培養基表面。塗布時可轉動培養皿，使塗布均勻。

注意：1、將塗布器末端浸在盛有體積分數為70%的酒精的燒杯中。取出時，要讓多餘的酒精在燒杯中滴盡，然後將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃。

2、操作中一定要注意防火！不要將過熱的塗布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。

9. 稀釋塗布平板法包括哪兩種操作

（1）分析圖解可知，圖示流程的主要操作包括梯度稀釋和塗布平板．
（2）一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數，結果比較准確．
（3）當培養基中纖維素成為唯一碳源時，可篩選出分解纖維素的細菌．要證明其有選擇作用，可以用牛肉膏蛋白腖培養基作對照，比較菌落數目，還可以在培養基中加入剛果紅染料，如果所有菌落周圍均出現明顯的透明圈，也證明其選擇作用．
故答案為：
（1）梯度稀釋 塗布平板
（2）30-300
（3）用牛肉膏蛋白腖培養基 所有菌落周圍均出現明顯的透明圈

10. 平板劃線法和稀釋塗布平板法各有什麼優缺點

平板劃線法的優點：便於觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。缺點：不能准確計數。
稀釋塗布平板法的優點：便於計數，便於觀察菌落特徵。缺點：吸收量較少，平板不幹燥效果不好，易蔓延。
稀釋塗布平板法一般多用於篩選菌株，而平板劃線法一般多用於純化菌株，二者目的不完全相同。
平板劃線法的原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作「由點到線」稀釋而達到分離目的，而稀釋塗布平板法一般用於某些成品檢定（如殺蟲菌劑等）、生物製品檢驗、土壤含菌量測定及食品、水源的污染程度的檢驗。
(10)平板塗布方法有哪些擴展閱讀：
平板劃線法由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，並逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養後，可在平板表面得到單菌落。
稀釋塗布平板法先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋
，然後分別取不同稀釋液少許，與已溶化並冷卻至
45
℃左右的瓊脂培養基混合，搖勻後，傾入滅過菌的培養皿中，待瓊脂凝固後，製成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養一定時間即可出出菌落。
參考資料來源：網路-平板劃線法
參考資料來源：網路-塗布平板法