① 什麼是離心技術
離心機溫度製冷
當轉子高速旋轉時,空氣摩擦生熱,轉子溫度會上升,試管中的樣品溫度也會升高。由於生物學樣品對溫度敏感。一般要求離心實驗中溫度保持4℃。沒有電腦控制的智能化技術,是不可能做到±1℃的精度。因此,用製冷機對離心腔冷卻,而達到冷卻轉子、冷卻樣品溫度的目的。但測量旋轉中的轉子的實際溫度極為困難,國內外都採用在離心腔底部離轉子較近處理設溫度感測器,間接測量轉子溫度。這里T樣品=T腔+T補償。T補償又與轉子的類別、轉速及運行時間有關。
離心機無刷電機直接驅動
離心機是由電機帶轉子高速旋轉的。過去的電機是帶碳刷的直流電機,離心機運轉時碳刷磨損,帶來火花與雜訊甚至振動,且有壽命,屆時要更換碳刷萬能再行運轉。更嚴重的是碳刷的磨損帶來碳粉塵的污染,不僅污染離心機,還會污染周圍環境,這種污染對衛生行業是不合適的。
離心機顯示數字技術
模擬技術典型的表現形式為擰旋鈕選擇操作參數(如轉速、溫度與時間等),以表盤的指針來顯示數據。其缺點為:選擇參數與數據的讀數值受操作人與讀數人的人為干擾多,控制精度差。而且每次操作都要這樣,重復性差。有的離心機雖數字顯示(如旋鈕選值而數字顯示),雖在讀數上有改進,但取值原理未變仍屬模擬技術;數字顯示典型的表現形式為界面友好、鍵盤操作、數字化顯示、可編程操作的全電腦控制,其核心為智能化控制,是由電腦來實現的。離心機操作所需要一切參數(如轉速、溫度、時間、加減速率檔等),鍵盤操作輸入,並以數字顯示出來,因此選擇操作參數與讀取數誤差極小。又由於是可編程操作,可把一組操作參數編成號碼,可存取使用。
② 浙江省高中生物有哪幾種離心方法 急 明天就考試了
差速離心法、密度梯度離心法、分析性超速離心法。
差速離心主要是採取逐漸提高離心速度的方法分離不同大小的細胞器。起始的離心速度較低,讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。
收集沉澱,改用較高的離心速度離心懸浮液,將較小的顆粒沉降,以此類推,達到分離不同大小顆粒的目的。
以蛋白質為例:
溶液中的蛋白質在受到強大的離心作用時,如果蛋白質溶液的密度大於溶劑的密度,蛋白質分子就會下沉。
在離心場中,蛋白質分子所受到的凈離心力(離心力減去浮力)與溶劑的摩擦力平衡時,每單位離心場強度定值,這個定值即為沉降系數(sedimentation coefficient)。沉降速度用每單位時間內顆粒下沉的距離來表示。
③ 離心分離的三種方式
離心分離的三種方式:差速離心、差速區帶離心和等密度梯度離心。
常用的方法有3種。
具體方法如下:
1、過濾式的離心機。
2、平板式離心,採用翻蓋結構,外殼的上蓋可以開啟,在操作過程中起到密閉的作用,可以有效隔離有毒有害物質的外漏,便於日常清潔清洗。
3、全自動刮刀下卸料離心,能夠實現自動化操作,減少人工成本,還具有對物料適應性強的特點,能處理各種粒度、固體濃度范圍大的物料,並能實現全自動運行。
⑤ 化學里的離心法是什麼
密度梯度離心法 - 定義
密度梯度離心法 density gradient centrifugation method
〔1〕亦稱平衡密度梯度離心法。用超離心機對小分子物質溶液,長時間加一個離心力場達到沉降平衡,在沉降池內從液面到底部出現一定的密度梯度。若在該溶液里加入少量大分子溶液,則溶液內比溶劑密度大的部分就產生大分子沉降,比溶劑密度小的部分就會上浮,最後在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子帶狀物。利用這種現象,測定核酸或蛋白質等的浮游密度,或根據其差別進行分析的一種沉降平衡法。自1958年米西爾遜(M.Meselson),斯塔爾(F.W.Stahl),維諾格拉德(J.Vinograd)成功地分離了〔15N〕DNA和〔14N〕 DNA以來,該法取得許多成果。為得到必要的濃度梯度,多採用濃氯化銫溶液,所以有時也使用氯化銫濃度梯度離心法這個名稱,還可採用氯化銣、溴化銫等溶液。通常利用分析超離心機,但在將細胞顆粒成分進行分離等以純化為目的的情況,利用密度差,使用分離超離心機,採用預先制備好的蔗糖等的密度梯度。〔2〕採用蔗糖等一些小分子溶液,預先在分離超離心機的樣品地內制備出密度梯度,在其上面再加上一層少量的大分子溶液後,離心,大分子就形成層狀而沉降。若含有沉降系數不同的許多成分,就會出現許多層。這種情況採用適當的編排號碼,取出樣品池內的溶液,然後進行研究。這是與〔1〕不同的一種沉降速度法,除了以相同的目的被用於通常的沉降速度法外,在能取出分離物這點上是有優越性的。因多採用蔗糖密度梯度,所以亦稱為蔗糖密度梯度離心法。按同樣原理,也可使用分析超離心機進行測定。
區帶離心法 - 英文名稱
區帶離心法zonal centrifugation method
區帶離心法 - 概念解析
與歷來以移動界面法來測定沉降不同,而是用密度梯度離心法來觀測高分子物的層狀沉降。因此對密度梯度離心法都可稱為區帶離心法。但最近根據密度梯度離心法,對細胞顆粒等以大量分離提純為目的,而發明了稱為區帶旋轉體的特殊的分離用的轉動機(rotor)。狹義的區帶離心法就是指此法。
密度梯度離心法 - 定義
密度梯度離心法 density gradient centrifugation method
〔1〕亦稱平衡密度梯度離心法。用超離心機對小分子物質溶液,長時間加一個離心力場達到沉降平衡,在沉降池內從液面到底部出現一定的密度梯度。若在該溶液里加入少量大分子溶液,則溶液內比溶劑密度大的部分就產生大分子沉降,比溶劑密度小的部分就會上浮,最後在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子帶狀物。利用這種現象,測定核酸或蛋白質等的浮游密度,或根據其差別進行分析的一種沉降平衡法。自1958年米西爾遜(M.Meselson),斯塔爾(F.W.Stahl),維諾格拉德(J.Vinograd)成功地分離了〔15N〕DNA和〔14N〕 DNA以來,該法取得許多成果。為得到必要的濃度梯度,多採用濃氯化銫溶液,所以有時也使用氯化銫濃度梯度離心法這個名稱,還可採用氯化銣、溴化銫等溶液。通常利用分析超離心機,但在將細胞顆粒成分進行分離等以純化為目的的情況,利用密度差,使用分離超離心機,採用預先制備好的蔗糖等的密度梯度。〔2〕採用蔗糖等一些小分子溶液,預先在分離超離心機的樣品地內制備出密度梯度,在其上面再加上一層少量的大分子溶液後,離心,大分子就形成層狀而沉降。若含有沉降系數不同的許多成分,就會出現許多層。這種情況採用適當的編排號碼,取出樣品池內的溶液,然後進行研究。這是與〔1〕不同的一種沉降速度法,除了以相同的目的被用於通常的沉降速度法外,在能取出分離物這點上是有優越性的。因多採用蔗糖密度梯度,所以亦稱為蔗糖密度梯度離心法。按同樣原理,也可使用分析超離心機進行測定。
⑥ 高中生物裡面,什麼用到了差速離心法什麼用到了梯度離心法
差速離心法(離心法):交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分的分離。
梯度離心法(濃度梯度):細胞內的物質具有一定的濃度,把細胞放入清水中,細胞吸水漲破。除去細胞內的其他物質,得到細胞膜。
密度梯度區帶離心法(簡稱區帶離心法),是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。此法的優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會擠壓變形,能保持顆粒活性,並防止已形成的區帶由於對流而引起混合。此法的缺點是:①離心時間較長;②需要制備惰性梯度介質溶液;③操作嚴格,不易掌握。
⑦ 生物學離心方法
1.差速離心(differential centrifugation)
依據實際物系特點(目的物和其他組分性質和相互作用等)、分離目的和分離所需程度,調整離心力和時間,使得不同組分得以分離。
2.區帶離心(zonal centrifugation)
區帶離心又分為:差速區帶離心和平衡區帶離心.
其中
差速區帶離心:物質密度大於密度梯度最大密度
平衡區帶離心:物質密度小於密度梯度最大密度
具體例子記得學分離工程的時候課本上好像有,記不太清了,希望能幫到你。
⑧ 高中生物裡面,什麼用到了差速離心法什麼用到了梯度離心法
差速離心法(離心法):交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分的分離。
梯度離心法(濃度梯度):細胞內的物質具有一定的濃度,把細胞放入清水中,細胞吸水漲破。除去細胞內的其他物質,得到細胞膜。
密度梯度區帶離心法(簡稱區帶離心法),是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。此法的優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會擠壓變形,能保持顆粒活性,並防止已形成的區帶由於對流而引起混合。此法的缺點是:①離心時間較長;②需要制備惰性梯度介質溶液;③操作嚴格,不易掌握。
⑨ 差速離心法和密度梯度離心法的區別
一、密度梯度離心法和差速離心法的區別
1.
差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離,密度梯度離心中單一樣品組份的分離是藉助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的。
2.
差速離心用兩個甚至更多的轉速,而密度梯度離心只用一個離心轉速。
3.
差速離心是適用於混合樣品中各沉降系數差別較大的組分,而密度梯度離心的物質是密度有一定差異的。
二、差速離心法
差速離心法是交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分的分離。
1.
沉降系數
使用離心法時,大分子沉降速度的量度,等於每單位離心場的速度。或
s=v/ω2r,s
是沉降系數,
ω
是離心轉子的角速度(弧度
/
秒),
r
是到旋轉中心的距離,
v
是沉降速度。沉降系數以每單位重力的沉降時間表示,並且通常為
1
~
200×10-13
秒范圍,
10-13
這個因子叫做沉降單位
S
,即
1S=10-13 秒,如血紅蛋白的沉降系數約為
4×10
-13
秒或
4S
。大多數蛋白質和核酸的沉降系數在
4S
和
40S
之間,核糖體及其亞基在
30S
和
80S
之間,多核糖體在
100S
以上。
2.
差速離心法的優缺點
差速離心法的優點是樣品的處理量較大,可用於大量樣品的初分離。其缺點是分離復雜樣品和要求分離純度較高時,離心次數多,操作繁雜。由於沉澱的多次清洗、溶解、再沉澱,容易引起中間損失,所以離心分辨力差。實際分離時由於離心時的對流、擴散和收取沉澱時的污染,對於一些沉降系數相差不大的組分無法進行完全的分離提純。產品的純度和回收率都達不到上述理論值。因此差速離心法主要用於大量樣品的初步分離提純。
三、密度梯度離心法
密度梯度離心法又稱為區帶離心法,是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。
1.
分類
(
1
)差速區帶離心法:分離密度相差不大、重量和大小區分較大的樣品。
將樣品置於平緩的預先制好的密度梯度介質上,進行離心,較大的顆粒將比較小的顆粒更快地沉降。通過梯度介質,形成幾個明顯的區帶(條帶)。這種方法有時間限制,在任一區帶到達管底之前必須停止離心。大小相同、密度不同的顆粒(如溶酶體、線粒體和過氧化物酶體)不能用本法分離。
(
2
)等密度區帶離心法:用於樣品顆粒的浮力密度差,密度差越大的樣品分離效果越好,與顆粒大小和形狀無關。離心管中預先放置好梯度介質,樣品加在梯度液面上,或樣品預先與梯度介質溶液混合後裝入離心管,通過離心形成梯度。離心時,樣品的不同顆粒向上浮起,一直移動到與它們的密度相等的等密度點的特定梯度位置上,形成幾條不同的區帶,這就是等密度離心法。離心所需時間以最小顆粒到達等密度點(即平衡點)的時間為基準,有時長達數日。
等密度區帶離心法所用的梯度介質通常為氯化銫
C
S
Cl
,其密度可達
1.7
g/cm3 。此法可分離核酸、亞細胞器等,也可以分離復合蛋白質,但簡單蛋白質不適用。
2.
密度梯度離心法的優缺點
優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會擠壓變形,能保持顆粒活性。
缺點是:①離心時間較長;②需要制備惰性梯度介質溶液;③操作嚴格,不易掌握。
⑩ 高中生物實驗哪些用到差速離心法,哪些用到梯度離心法。
1、差速離心法:
分離不同密度的結構的實驗用到差速離心法,如線粒體、葉綠體等。差速離心主要是採取逐漸提高離心速度的方法分離不同大小的細胞器。
2、梯度離心法:
分離核酸、蛋白質、核糖體亞基的實驗用到梯度離心法。密度梯度液的制備用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度。
(10)常用的離心方法有哪些擴展閱讀
差速離心法原理:
物體圍繞中心軸旋轉時會受到離心力F的作用。當物體的質量為 M、體積為V、密度為D、旋轉半徑為r、角速度為(弧度數/秒)時,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r (1) 上述表明:被離心物質所受到的離心力與該物質的質量、體積、密度、離心角速度以及旋轉半徑呈正比關系。
離心力越大,被離心物質沉降得越快。 在離心過程中,被離心物質還要克服浮力和摩擦力的阻礙作用。
梯度離心法原理:
不同顆粒之間存在沉降系數差時,在一定離心力作用下,顆粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同區域上形成區帶的方法。