1. 可以通過什麼辦法防止限制性內切核酸酶切割後的dna自身環化
Ⅰ（1）質粒分子經SmaⅠ切割前，為環狀DNA，無游離磷酸基團；切割後，會斷裂2個脫氧核苷酸（CG）之間的磷酸二酯鍵，露出2個游離磷酸基團．（2）插入的SmaⅠ酶切位點越多，鹼基對CG越多，氫鍵越多，故質粒的熱穩定性越高．（3）只使用EcoRI，質粒、外源DNA自身都只含有1對互補黏性末端，自身會發生連接成為環狀DNA，不利目的基因導入．故使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA，各自會有不同黏性末端，能防止自身環化．Ⅱ．原核生物（如大腸桿菌）是基因工程中較理想的受體細胞，具有一些其他生物沒有的特點：①繁殖快，能大量快速復制DNA；②多為單細胞，結構簡單，容易操作；③遺傳物質相對較少，不易對目的基因干擾．大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是：首先用Ca2+處理細胞，使之成為感受態細胞，然後完成轉化．Ⅲ．植物基因工程中將目的基因導入受體細胞最常用的方法是農桿菌轉化法．且一般將目的基因插入Ti質粒的T-DNA中形成重組Ti質粒，這樣可將目的基因整合到受體細胞的染色體上．移植入的目的基因為單個，故轉基因植株一般為雜合子．要避免基因污染，一般需將目的基因導入植物細胞的細胞質（線粒體、葉綠體），不會隨著花粉進行基因污染．故答案為：Ⅰ．（1）0 2 （2）高 （3）質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化Ⅱ．③遺傳物質相對較少 Ca2+ 感受態Ⅲ．農桿菌轉化法 T-DNA 雜合 細胞質（線粒體、葉綠體）
2. 在基因克隆中如何防止載體分子的自身環化作用
這個要看你是具體如何克隆的
如果你使用的是酶切連接，選擇不同黏末端的酶一般不會發生自身環化
如果是平端連接，則需要對載體去磷，也就是鹼性磷酸酶處理。此時需要注意你的插入片段兩邊要有磷酸基團（可以引物合成時添加，也可設計平端的酶如EcoRV自己回來切），否則是連不上的。
3. 都有哪幾種方法避免載體質粒的自環化
找切割位點時，讓兩端的黏性末端不同，我只知一種。幫你查過
具體可採用以下方法：
（1）用鹼性磷酸酶處理限制酶酶解產生的線性載體分子。鹼性磷酸酶可除去線性載體DNA 分子的5¹-磷酸，而留下3¹-羥基基團。經過鹼性磷酸酶處理的線性載體分子，除非插入外源DNA 片段，否則就不能重新環化為有功能的載體分子。
（2）採用同聚物加尾連接技術，可自動防止線性載體DNA 分子的自身環化作用，這是因為切割後形成的線性DNA 分子的兩個3¹-OH末端，此時都已被加上具有同樣鹼基結構的同聚物尾巴。
（3）應用柯斯質粒，也可防止質粒DNA 分子發生自身環化作用。需要指出的是，在連接反應中，正確配載入體DNA 與外源DNA 間的比例，是高效獲得重組體的一個重要因素。在應用λ噬菌體或柯斯質粒作載體時，如果配置高比值的載體DNA /外源DNA 的連接反應體系，就有利於重組體分子的形成；在應用質粒作載體時，因為其重組體分子是由一個載體分子和一個外源DNA 片段環化而成的，所以當載體DNA 與外源DNA 的比例為1時，最有利於重組體分子的形成。
4. 生物如何防止質粒自身環化
會的，因此用不同的限制性內切酶，和粘性末端可以防止自身環接，我記得做過這樣的題
5. 為防止載體與目的基因自身環化
不矛盾,用同一種限制酶目的是讓運載體的末端和目的基因的末端互補.所以為了防止環化,需要對運載體加以修飾改造,使運載體的兩個末端也不相同並且都剛好與目的基因的末端互補.
6. 基因工程中如何避免載體的自我環化和目的基因的雙向插入
雙酶切。
在基因兩端分別用不同的內切酶來酶切，載體上也用這兩種酶來酶切。這樣自己的酶切位點只能識別自己的位點，就不會發生基因方向的錯誤了。而且載體的兩個位點互相不識別，也不會自連接。
7. 基因工程中如何避免載體的自我環化和目的基因的雙向
避免自我環化可以考慮使用雙酶切位點和加CIAP處理
目的基因避免雙向接入的話通過設計雙酶切位點就能完美避開
8. 為避免自身環化可用什麼法鏈接
上保護基。自身環化也是因為官能團作用，將其中的官能團保護起來，它的這種作用力會改變，性質也相應會改變。但是不影響其他基團的作用。
9. 基因工程裡面有個自身環化。 1.什麼東西自身環化 2.如何防止自身環化
就是切下的DNA片段、兩端鹼基相同、剛好可以配對而連接成環狀DNA。兩端用不同的限制酶便可防止！！