組織的分離方法有哪些

Ⅰ 什麼是組織分離法怎樣進行

組織分離法，也叫無性分離法，是利用子實體的組織塊，在適宜的培養基和生長條件下分離、培育純菌絲的一種簡易方法。這種分離法操作容易，後代能保持原菌株的優良性，不易發生變異。通常按以下步驟進行：
（1）種菇消毒將優選的標准種菇置於接種箱內，用75%的酒精對種菇表面進行擦洗消毒，並用無菌紗布吸干，置於消毒過的培育皿內備用。其種菇挑選、用具消毒同前。（2）切塊把種菇撕開，在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處，用滅菌過的接種刀，切取一小塊做接種塊。然後將其縱切成若干塊的小薄片備用。為了減少帶雜菌的機會，切取組織塊時盡量取小一些，以獲得純度高的菌種，而且小塊容易成活。松茸組織分離用接種針挑取菌褶小塊更好。（3）接種培養用接種針挑取一小塊接種塊，小心地接入斜面試管培養基的中央，置於25℃左右的培育室（箱）內培養。接種時注意無菌操作，千萬不可大意。經過5～7天的培養，當組織接種塊上長出白色的菌絲並向培養基上蔓延生長時，應選擇健壯、優良的菌絲體，進行提純選育，另管培育成一代母種。

Ⅱ 組織分離的常用分離方法

種菇要選朵大蓋厚，柄短，八九分成熟的優良品種。切去菇兩基部，在無菌箱內以0.1%的升汞水浸幾分鍾，再用無菌水沖洗並揩乾或用75%酒精棉球擦拭菌蓋與菌柄2次，進行表面消毒。
接種時，只要將種菇撕開，在萌蓋和菌柄交界處或菌褶處，挑取一小塊組織；移接 到PDA培養基上。置25℃左右溫度下培養3-5天，就可以看到組織上產生白色絨毛狀菌絲，轉管擴大即得到菌種。
如香菇、平菇等可以用此方法。 茯苓、豬苓、雷丸等菌的子實體不易採集。而常見的是它貯藏營養的菌核。用菌核分離，同樣可以獲得菌種。方法是將菌核表面洗凈，用酒精或升汞消毒後，切開菌核，取中間組織一小塊，約黃豆大小，接種在PDA 培養基斜面上，保溫培養。
應注重的是，菌核是貯藏器官，大部分是多糖類物質，只含有少量的菌絲，因此挑取的組織塊要大一些，假如組織塊過小，則不易分出菌種。 有一部分子實體不易找到，也沒有菌核，可以用菌素進行分離。如蜜環菌、假蜜環菌。
其操作方法是先用酒精或升汞將菌素表面黑色皮層輕輕擦拭2～3次， 然後去掉黑色外皮層（菌鞘），抽出白色菌髓部分；用無菌剪刀將菌髓剪一小段，接種在培養基上，保溫培養，即得該菌菌種。
菌素分離要注重：因菌素比較細小，分離素也比較細小，分離時極易污染雜菌，所以要嚴格操作。 1.著名的黑木耳菌種「菊三」、「冬梅1號」、「雪梅1號」、「雪梅3號」、「984」就是黑龍江省柴河食用菌學會冬梅食用菌廠，通過對野生木耳組織分離，馴化選育成功的。
2.香菇組織分離方法
選用的子實體先經0.1%開汞水或70%酒精表面消毒後。用無菌水沖洗並用無菌紗布擦去表面水分。
分離香菇時，用無菌解剖刀自菌柄處切開少許，再用手將子實體掰開為二，在菌蓋與菌褶交界處，切取0.3～0.4立方厘米的一小塊菌肉，移放在斜面培養基中央。如已開傘的種菇、則選菌蓋與菌柄交界處的菌肉。
分離草菇時，用無菌解剖刀把菌蕾縱切少許；再用手把菌蓋輕輕剝開，在菌柄上方和菌蓋交界處，切取1～5毫米的細塊，接在斜面培養基中。如種菇已受雨淋，吸水較多，應取菌褶作為接種材料。組織分離後將試管外面放在恆溫箱中培養。待組織塊周圍萌發出菌絲，並向 培養基蔓延生長後，再挑取生長健壯的菌絲進行轉管培養。
組織分離法操作簡便，又不易帶入雜菌，容易獲得純菌種。但對銀耳、黑木耳等膠質菌；因其子實體中菌絲的含量極少，如用組織分離培養，則往往不易成功。

Ⅲ 單細胞的分離方法有哪些

一、懸浮細胞的分離方法：利用離心方法對細胞進行分離。
二、實體組織材料的細胞分離方法：對於實體組織材料，由於細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可採用機械分散法( 物理裂解)和消化分離法。

Ⅳ 平菇組織分離的方法和步驟如下

平菇母種沒長滿能用，平菇母種繁殖技術。一、平菇組織分離技術組織分離是采菇體的部分組織進行繁殖母種的方法。盡管平菇的任何部分都能分離培養出母種，但是多年的實踐經驗表明，選用菌柄和菌褶交接處的菌肉最好。平菇組織分離的方法和步驟如下： 1、種菇選擇：一般選擇在適宜出菇期出菇早、出菇整齊、特徵典型、無病蟲害、產量高的栽培袋，從中選擇菌肉肥厚、大小適中、顏色正常、尚未散孢、長至七八分成熟的優質菇作種菇。 2、種菇消毒：用0.1%升汞溶液或75%酒精浸泡或擦拭，無菌水沖洗，吸干表面的水分。 3、切塊接種：將分離種菇沿菌柄中心縱向掰成兩半，用解剖刀在菌蓋和菌柄交界處劃成田字形，取黃豆粒大一小塊菌肉組織，接在PDA培養基上。 4、培養純化：溫度控制在22℃~25℃之間，培養1~2天，長出白色絨毛狀菌絲體，4~5天通過篩選，挑出菌絲潔白、清晰、生長整齊、健壯的試管母種繼續培養，將有雜菌、長勢纖弱的淘汰。7~10天菌絲長滿斜面。 二、平菇孢子簡易分離法筆者將多孢子分離與組織分離有機結台，使退化品種的優良特性得以恢復。現簡升如下，以供同行參考。制備培養基馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，VB1微量，瓊脂18g，水1000mL，pH值自然。按常規方法制試管斜面。選擇種菇選取生長健壯，八成熟，無病蟲害的平菇一朵，用鋒利小刀在其上切取菇形美觀的菇肉組織一片待用。收集孢於及培養純化在無菌條件下，撥出斜面試管口的棉塞，用試管口從菇種菌褶處頂穿菇種片，使一小片菇種陷入管口以內，迅速塞好棉塞。於24－26℃條件下恆溫培養6小時後取出。在酒精燈火焰附近去掉棉塞，用消毒小鉤鉤出管內的小片菇種，將棉塞連同試管口在火焰上灼燒後，迅速塞上棉塞，於24～26℃恆溫培養1周，待孢子萌發，井長成成片菌絲後，切取生長迅速、無雜菌污染的菌絲團轉管。待菌絲長滿管後備用。組織分離將孢子分離所得試管菌種，按常規方法接入棉子殼培養基的原種瓶中(750mL)，待菌絲長滿瓶後自然出菇。選取菇體健壯、菇形正常，無病蟲害的菇體組織分離後得純菌種，經栽培出菇試驗後便可用於生產。三、平菇菌種的復壯－組織分離使用組織分離復壯平菇菌種，簡便易行、效果明顯，很適宜一般種植戶。其操作技術要點是： 1.在菇床、菌牆或菌袋中選擇出菇早、無雜菌病毒侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇； 2.在種菇中部取最大的3-4張菇片，用70%的酒精輕擦表面後置於接種箱內消毒； 3.將菇片縱向撕開，在菇蓋與菇柄交界處取一米粒大小的菇肉組織接於PDA培養基上。每隻菇片可接數支試管，每次應多分離幾支試管，方便選優； 4.將試管置於適溫下培養； 5.培養期間每天都要檢查發菌情況，從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長速正常、無綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點的，表現最好的分離種轉接於木屑麩皮培養基上，於適溫下培養； 6.菌絲發滿後，在接種箱內去掉棉塞，用蠟封口，用黑膜包裹後於4-9℃的冰箱內保藏； 7.在下一個生產季節與原始保藏種作對比試驗，擇優作為生產用種。每季都如此復壯，能逐步提高菌種各方面的性狀，使發菌加快，抗逆抗雜性增強，質量明顯提高。 8.有條件的可以先採用孢子分離法進行分離培養，並栽培出菇，然後從中選擇較好的菇體（種菇選擇標准同上），再採用上述方法進行組織分離，其復壯效果更好。注意：孢子分離的母種不能直接應用到生產中。

Ⅳ 採用組織分離法培育菌種要經過哪些步驟

蘑菇、香菇、平菇、金針菇、猴頭菇、竹蓀等栽培食用菌，以及松乳菇、松茸等純化中的食用菌，均可採用組織分離法獲得菌種。現以香菇為例說明組織分離法的主要步驟。
（1）選擇種菇按上述標准挑選種菇，採收後裝入無菌紙袋內（忌用塑料袋）。（2）組織分離在無菌條件下，先用酒精棉球對菇體進行表面消毒，然後手持菌柄，將香菇撕成兩半，取手術刀經火焰滅菌、冷卻後，在菌蓋、菌柄交界處或菌柄的上部挑取一小塊（米粒般大小）菌肉，移植到PDA斜面上（事先配製並滅菌備用），即可轉入培養觀察階段。（3）培養觀察上述組織分離物在25℃條件下，經過3～5天即可看到分離物表面長出白色絨毛狀菌絲，呈星芒狀在培養基上生長。培養期間，應每隔1～2天檢查1次，隨時淘汰黴菌或細菌污染的培養物。培養10～15天後，再作1次轉管培養，即可得到香菇母種。然後經栽培試驗，確認其可以正常出菇後方可用於菌種生產和栽培。

Ⅵ 組織分離法的特性說明

組織分離法簡便，後代不易發生變異。組織分離最好採用正處於旺盛生長中的幼嫩子實體或菇蕾作為分離材料，採取菌蓋與菌柄交接處的組織進行分離，效果最好，對於那些有內或外菌幕保護的菇類來說，取在菌幕保護下的幼嫩菌褶接種，生活力更加旺盛。對於某些菌根菌，則取用靠近基部的菌柄組織才能成活。

Ⅶ 常用的分離方法有哪幾種

1、分液：分離兩種不互溶的液體，如分離油和水。

2、萃取：加入適當溶劑把混合物中某成分溶解及分離，如庚烷、取水溶液中的碘。

3、蒸餾：溶液中分離溶劑和非揮發性溶質，如海水中取得純水。

4、分餾：離兩種互溶而沸點差別較大的液體，如液態空氣中分離氧和氮、石油的精煉。

5、升華：離兩種固體,其中只有一種可以升華，如分離碘和沙。

6、吸附：去混合物中的氣態或固態雜質，活性炭除去黃糖中的有色雜質。

(7)組織的分離方法有哪些擴展閱讀：

分離的原則

1、引入的試劑一般只跟雜質反應。

2、後續的試劑應除去過量的前加的試劑。

3、不能引進新物質。

4、雜質與試劑反應生成的物質易與被提純物質分離。

5、過程簡單，現象明顯，純度要高。

6、盡可能將雜質轉化為所需物質。

7、除去多種雜質時要考慮加入試劑的合理順序。

8、如遇到極易溶於水的氣體時，要防止倒吸現象的發生。

Ⅷ 如何進行靈芝菌種的組織分離

靈芝菌種的組織分離法：是利用靈芝的子實體在適宜的條件下能生長出菌絲的特性，來分離獲得純菌種的方法。操作簡便，取材方便，在野外采種或室內分離純菌種時都可採用此法。組織分離是一種無性繁殖，菌絲的細胞是雙核細胞，雙核菌絲中的兩個核還未進行核配，即雙親染色體並沒有發生重組，所分離獲得的菌種是該靈芝的營養世代，容易產生變異。在適宜的營養和培養條件下，選擇典型的菌落進行培養，菌株則可保持其原菌種的優良品質，否則，其性狀往往會發生變異。

（1）分離材料的選擇與消毒

在野外採集野生靈芝時，應根據採集的目的要求選擇優良的個體進行分離。分離人工栽培的品種時，則應從優良品系中選擇優良的單株作材料。

靈芝組織分離時先應將分離材料用清水沖洗干凈，去掉泥沙或污物，用紗布擦乾水分，即可移到無菌室進行分離前的消毒處理。通常，靈芝子實體可在0.1%的升汞液中浸泡1～2分鍾，或用75%的酒精表面擦拭消毒。

（2）分離方法

將要分離的子實體放入無菌室內，用無菌水沖洗數次，進行表面消毒，隨即用消毒過的解剖刀從菇柄中部縱切一刀，撕開，挑取菌蓋和菇柄交界處的一小塊組織，移接到PDA斜面培養基上，加上棉塞，於25℃下培養，即可得到該菌的菌種。

Ⅸ 分離植物組織中的細胞的方法是什麼

動物組織中細胞間可通過纖維蛋白維持細胞的位置，故可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。分離植物組織中的細胞可用解離液（質量分數為15%的鹽酸：體積分數為95%的酒精=1:1），解離液可以破壞植物組織的細胞間的聯系。