dna提取方法有哪些方法有哪些方法有哪些

Ⅰ DNA怎麼提取

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式：酶法。根據核酸分離純化方式的不同有；硅質材料、陰離子交換樹脂等。

提取DNA總的原則:

1.保證核酸一級結構的完整性；

2.核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；

3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；

4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。

例如 : 用酶法提取

DNA提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。

工具/原料: 研磨棒、研磨儀或者組織破碎儀 , 氯仿：異戊醇（24:1）或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱

方法/步驟 :

1. 使用研磨儀、研磨棒或者使用超聲破碎細胞的方法破碎細胞，加入去污劑，如sds等，除去膜脂。

2. 去除細胞內的蛋白質，包括與DNA結合的組蛋白，通過加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚／氯仿抽提等方法去除。

3. 加入RNA酶去除RNA，如實驗不嚴密，可省略此步。

4. 沉澱DNA，需在冷乙醇或異丙醇中沉澱，放在冰箱-20℃沉澱30分鍾以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起發生沉澱。

總結: DNA提取方法有下面⑦種

一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb

二.甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。

三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。

四.異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）

五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。

六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。

七.鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。

Ⅱ DNA抽提方法與步驟

高中：
原理：
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含雜質較少的DNA。
3.DNA在沸水浴時被二苯胺染成藍色。
方法步驟：
1．提取細胞核物質：順時針方向攪拌，稍快，稍重。 5 min
2．溶解DNA：
3．析出含DNA的黏稠物：蒸餾水300mL，逆時針方向攪拌，緩慢
4．過濾：取黏稠物
5．再溶解：順時針方向攪拌，較慢。3 min
6．過濾：取濾液。
7．提取出含雜質較少的DNA，逆時針方向攪拌，稍慢。5 min
8．DNA的鑒定：沸水浴5min

大學
DNA提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
利用研磨或者超聲破碎細胞，並通過加入去污劑以除掉膜脂。
加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚/氯仿抽提，以除掉細胞內的蛋白，如與DNA結合的組蛋白。
將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉澱，因為DNA在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。
另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒。

2.細胞的破碎
細菌有堅硬的細胞壁，首先要破碎經胞。方法有三種;①機械方法：超聲波處理法、研磨法、勻漿法;②化學試劑法：用SDS處理細胞;③酶解法：加入溶菌酶或蝸牛酶，都可使細胞壁破碎。

3.DNA提取的幾種方法
(1).濃鹽法
A. 利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M 氯 納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的 氯仿一起搖盪,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間，而DNA位於上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉澱出來.
B. 也可用0.15 MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.
兩種方法比較,後種方法使核酸降解可能少一些.
C.以稀鹽酸溶液提取DNA 時,加入適量去污劑,如SDS可有助於蛋白質與DNA 的分離。在提取過程中為抑制組織中的DNase對DNA 的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,並稱SSC溶液,提取DNA. （2）.陰離子去污劑法; 用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取DNA .由於細胞中DNA與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA
（3）.苯酚抽提法：苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由於蛋白與DNA 聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶於酚相，而DNA溶於水相。離心分層後取出水層，多次重復操作，再合並含DNA 的水相，利用核酸不溶於醇的性質，用乙醇沉澱DNA 。此時DNA是十分粘稠的物質，可用玻璃漫漫繞成一團，取出。此法的特點是使提取的DNA保持天然狀態
（4）.水抽提法:利用核酸溶解於水的性質,將組織細胞破碎後,用低鹽溶液除去RNA，然後將沉澱溶於水中，使DNA充分溶解於水中,離心後收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6M.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然後分別用66% ，80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最後在空氣中乾燥,既得DNA樣品.此法提取的DNA中蛋白質含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入SDS.

Ⅲ DNA的提取方法有多少種

DNA的提取方法有7種：酚抽提法、甲醯胺解聚法、玻璃棒纏繞法、異丙醇沉澱法、表面活性劑快速制備法、加熱法快速制備、鹼變性快速制備。

DNA的提取原則

1、保證核酸一級結構的完整性；

2、核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；

3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；

4、其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。

(3)dna提取方法有哪些方法有哪些方法有哪些擴展閱讀

提取DNA的注意事項

1、 各操作步驟要輕柔，盡量減少DNA的人為降解。

2、注意防止非核酸類成分干擾。

3、要減少DNA的降解，促進DNA與蛋白等的分相及DNA沉澱。

4、 提取DNA過程中所用到的試劑和器材要通過高壓烤乾等辦法進行無核酸酶化處理。

5、 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配製。

Ⅳ DNA的提取如何進行以及最常見的方法

提取DNA主要有SDS和CTAB法，其實提取效果的好壞主要看提取的對象是什麼樣的材料，在提取之前一定要好好分析材料的特性，然後在設計實驗步驟。
一）CTAB法
CTAB是一種去污劑，可溶解細胞膜，它能與核酸形成復合物，在高鹽溶液中（0.7
mol/L
NaCl）是可溶的，當降低溶液鹽濃度到一定程度（0.3
mol/L
NaCl）時，從溶液中沉澱，通過離心就可將CTAB與核酸的復合物同蛋白質、多糖類物質分開，然後將CTAB與核酸的復合物沉澱溶解於高鹽溶液，再加入乙醇使核酸沉澱，CTAB能溶解於乙醇。
（二）SDS法
利用高濃度的SDS，在較高溫度（55—65℃）條件下裂解細胞，使染色體離析，蛋白質變性，釋放出核酸，然後採用提高鹽濃度及降低溫度的做法使蛋白質及多糖雜質沉澱（最常用的是加入5M的KAc於冰上保溫，在低溫條件下KAc與蛋白質及多糖結合成不溶物），離心除去沉澱後，上清液中的DNA用酚/氯仿抽提，反復抽提後用乙醇沉澱水相中的DNA。
以下是在提取熱帶水果DNA時設計的兩種不同方法步驟，對比起來CTAB法好，在禾本科植物效果差不多！
1、
CTAB法
1）
在所需量的CTAB抽提液中加入2－巰基乙醇，使終濃度達2％（v/v）。將此溶液預熱至65℃。
對於每克新鮮的葉組織大約需要4ml的2－ME/CTAB抽提液。
2）
用液氮（－196℃）或乾冰（－78℃）冷卻粉碎器/勻漿器，將0.5
g植物組織粉碎成細粉，然後將組織轉移到2.0
ml離心管。
3）
加入800
µl預熱的2－Me/CTAB，混合使之充分濕潤，於65℃溫育20
min，不時顛倒混勻。
4）
待冷至室溫後，加入800
µl氯仿/異戊醇（24：1），顛倒混勻至溶液呈乳濁狀----但不要振盪。25℃，10000
rpm離心10
min。
5）
上清（~700
µl）轉移至另一干凈的離心管中，加入5
µl
RNaseA貯液，37℃溫育30
min。
6）
加入700
µl氯仿/異戊醇，顛倒混勻，25℃，10000
rpm離心10
min。
7）
上清（~600
µl）轉移至另一干凈的1.5
ml離心管中，加入600
µl異丙醇，顛倒混勻，室溫或-20℃放置20
min。
8）
25℃，12000
rpm，離心10
min，收集沉澱。
9）
去上清，加1
ml70%乙醇洗滌沉澱兩次。（25℃，12000
rpm，離心10
min）
10）涼干DNA，溶於50
µl
ddH2O，4℃保存備用。
2、
SDS法
①
將0.3
g植物材料於液氮速凍，然後在研缽中將其磨碎，將粉末轉至2
ml離心管中。
②
加入1.2
ml預熱至65℃的提取緩沖液（其中加入3
μl
β—巰基乙醇，增加DNA的穩定性），置65℃水浴中放置30分鍾，不時顛倒混勻。。
③
加入0.45
ml
5M的醋酸鉀，混勻，冰浴20分鍾，在10000
rpm離心20
min。需要的話，Miracloth紗布過濾除去沉澱，上清液轉入另一離心管中。
④
加入等體積氯仿：異戊醇（24：1），輕輕顛倒混勻，12000
rpm離心15
min。
⑤
轉移上清液到另一新離心管中，加5
μl
RNaseA貯液，37℃溫育30
min。
⑥
加入等體積氯仿：異戊醇（24：1），輕輕顛倒混勻，12000
rpm離心15
min。
⑦
轉移上清液到另一新離心管中，加入0.7V異丙醇，輕輕顛倒混勻，-20℃放置30分鍾沉澱核酸。
⑧
25℃，12000
rpm，離心10
min，收集沉澱。
⑨
棄上清，70％乙醇洗兩次。
⑩
涼干DNA，溶於50
µl
ddH2O，4℃保存備用。

Ⅳ DNA的提取方法有多少種

dna提取的幾種方法 
(1).濃鹽法 
利用rnp和dnp在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1m
氯
納提取化鈉抽提,得到的dnp粘液與含有少量辛醇的
氯仿一起搖盪,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間,而dna位於上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將dna
鈉鹽沉澱出來.
也可用0.15
mnacl液反復洗滌細胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白. 
兩種方法比較,後種方法使核酸降解可能少一些. 
以稀鹽酸溶液提取dna
時,加入適量去污劑,如sds可有助於蛋白質與dna
的分離.在提取過程中為抑制組織中的dnase對dna
的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15mnacl,0.015m檸檬鈉,並稱ssc溶液,提取dna. 
（2）.陰離子去污劑法: 
用sds或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取dna
.由於細胞中dna與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取dna. 
（3）.苯酚抽提法: 
苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了dnase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由於蛋白與dna
聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶.蛋白分子溶於酚相,而dna溶於水相.離心分層後取出水層,多次重復操作,再合並含dna
的水相,利用核酸不溶於醇的性質,用乙醇沉澱dna
.此時dna是十分粘稠的物質,可用玻璃漫漫繞成一團,取出.此法的特點是使提取的dna保持天然狀態
. 
（
4）.水抽提法:
利用核酸溶解於水的性質,將組織細胞破碎後,用低鹽溶液除去rna,然後將沉澱溶於水中,使dna充分溶解於水中,離心後收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6m.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然後分別用66%
٠80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最後在空氣中乾燥,既得dna樣品.此法提取的dna中蛋白質含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入sds.

Ⅵ DNA提取的方法有幾種分別是什麼，哪種是現在最常用的

關於DNA的提取方法在《分子克隆》一書中有詳細介紹，其中最常用的質粒提取方法包括：
SDS鹼裂解法制備質粒DNA煮沸裂解法制備質粒DNA牙簽法小量制備質粒DNASDS裂解法提取質粒DNA
這其中SDS鹼裂解法又是最常使用的提取方法。
當然針對不同組織樣品DNA的提取方法是不同的，具體還是要參考《分子克隆》等工具書。
另外，針對不同組織的DNA樣品，就是都有很多成熟的試劑盒可以使用。如果不是大批量使用或者經費充足的話，可以考慮購買試劑盒，一般可以提取到更高質量的DNA，並且也可以節約不少自己摸索的時間。

Ⅶ 提取基因組DNA的方法有哪些各有何優缺點

1、苯酚氯仿抽提法

優點是採用了實驗室常見的試劑和葯品，做起來成本比較低廉。

缺點是由於使用了苯酚、氯仿等試劑，毒性較大，長時間操作對人員健康有較大影響，而且核酸的回收率較低，損失量較大，由於操作體系大，不同實驗人員操作重復性差，不利於保護RNA，很難進行微量化的操作。

2、離心柱法

離心柱法DNA提取它的優點是比傳統的酚氯法提取的純度高，有利於RNA保護，而且能進行微量操作，以其低廉的價格和相對便捷的操作，漸逐取代了傳統DNA提取方法，被高校科研所等市場普遍接受。

離心柱法DNA提取的缺點是需要較多的樣本，耗材多，對於珍稀樣本無能為力，特別是在法醫、考古等領域顯得力不從心。

同時離心柱法DNA提取需要反復離心，不便於高通量、自動化操作，與現代生物學實驗的高通量、自動化要求格格不入，特別是在基因診斷、疾病檢測、轉基因檢測等領域，離心柱法DNA提取需要大量的操作人員及儀器設備。

當面對突發疫情時，更是需要有高通量的DNA提取設備與方法才能更有效准確的監測疫情、控制疫情。

3、磁珠法

磁珠法是納米科技與生物技術的完美結合，具有其他DNA提取方法無法比擬的優勢，主要體現在：

（1）能夠實現自動化、高通量操作，配合96孔的核酸自動提取儀，在以往做一個樣品的提取時間內可同時實現對96個樣品的處理，效率直接提高96倍，滿足了當前生物學高通量操作的要求，使得在大規模疫情爆發時能夠進行快速篩查原因，這個優點是其他方法難以趕超的。

（2）操作簡單、用時短，整個提取流程只有裂解、結合、洗滌、洗脫四步短時間內即可完成。

（3）安全無毒，不使用傳統方法中的苯、氯仿等有毒試劑，對實驗操作人員的傷害少，保護了實驗人員的身體健康。

（4）磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。

（5）靈敏度高，適合法醫樣本等痕量DNA提取。

(7)dna提取方法有哪些方法有哪些方法有哪些擴展閱讀：

磁珠法的原理是在磁珠表面修飾有對核酸有吸附作用的特定活性官能基團，通過不同的裂解液結合液洗滌液在特定的條件下能夠與目的物質進行特異性結合，同時利用磁珠自身的磁性，在外磁場的作用下可以方便地實現定向移動與富集，從而達到核酸與雜質分離的目的，進而實現對目標物質的分離純化，獲得純化核酸。

Ⅷ 提取基因組dna的方法有哪些

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式：酶法。根據核酸分離純化方式的不同有；硅質材料、陰離子交換樹脂等。

Ⅸ DNA提取方法

DNA的提取方法
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。
七.鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。