谷胱甘肽檢測方法

『壹』 氨基酸顯色方法

1、使用茚三酮試劑，噴後110oC加熱顯出顏色。用茚三酮劑顯色後用硝酸酮試劑噴，斑點由蘭紫色轉成紅色。

2、使用茚三酮+硝酸酮試劑，噴後在電爐上烤至剛剛顯色，顏色在日光燈中逐漸加深，某些氨基酸首先顯出顏色，用筆立刻將色點記下，許多氨基酸賧出特殊的顏色，不同的氨基酸顯出的速度也有差別。

3、使用2—萘醌—4—磺酸試劑（Folin試劑），噴後在室溫乾燥，不同的氨基產生各種顏色。

4．使用氯氣—聯甲苯胺試劑。也可以使氨基酸顯色。

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常用的顯色反應

雙縮脲反應：

該反應是肽鍵常用的反應，即在鹼性銅溶液中， 肽鍵與銅離子形成絡合物，呈紫色(在540nm有最大光吸收峰)。

酚試劑法：

該反應是比色法測定蛋白質的常用方法，即蛋白 質以鹼性銅溶液處理後,加用酚試劑,呈藍色(在650nm有最大光吸收峰)。

考馬斯亮藍法： 即蛋白質與一種蛋白質染料考馬斯亮藍g250反應形成復合物，該復合物在595nm有最大光吸收峰。ms蛋白質遇硝酸也顯色為黃色，不過這樣蛋白質就變性了。

茚三酮反應：除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外，所有的α?氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。

還有坂口反應 。在次溴酸鈉或次氯酸鈉存在的條件下，許多含有胍基的化合物 (如胍乙酸、甲胍、胍基丁胺等)能與α-萘酚發生反應生成紅色物質。

『貳』 基因甲基化檢測、甲基化PCR 的原理是什麼

一種全新的DNA甲基化研究方法——Pyrosequencing技術

DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾，它是由DNA甲基轉移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體，將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶（mC）的一種反應，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化學性修飾鹼基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位點，它在基因組中呈不均勻分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的區域，在哺乳動物中mC約佔C總量的2－7％。一般說來，DNA的甲基化會抑制基因的表達。DNA的甲基化對維持染色體的結構、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發生發展都起重要的作用。

CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區段，CpG保持或高於正常概率，這些區段被稱作CpG島。CpG島主要位於基因的啟動子和第一外顯子區域，約有60％以上基因的啟動子含有CpG島。 CpG甲基化的研究在腫瘤的研究中有著非常主要的地位。通過基因啟動子區及附近區域CpG島胞嘧啶的甲基化可以在轉錄水平調節基因的表達，從而引起相應基因沉默，去甲基化又可恢復其表達。DNA甲基化在生理情況下就參與了控制基因的時空表達，在腫瘤發生時，腫瘤細胞全基因組低甲基化是一個重要特徵。腫瘤細胞基因組甲基化的程度與正常細胞相比僅為20-60% , 同時伴有局部區域基因的高甲基化,包括腫瘤抑制基因、抑制腫瘤轉移和浸潤的基因、細胞周期調節基因、DNA修復基因、血管形成抑制基因等。但是目前研究手段的局限，限制了DNA甲基化的廣泛研究。

近年來，研究者不斷探索定性及定量檢測單個或多個甲基化位點的方法，但由於甲基化多態性區域存在的密度很高，所以對於延伸反應其引物的位置很難設計。Pyrosequencing技術作為一種新的序列分析技術，能夠快速地檢測甲基化的頻率，對樣品中的甲基化位點進行定性及定量檢測，為甲基化研究提供了新的途徑。

從原理上來看，Pyrosequencing是一種通過合成方法進行序列分析的方法，它通過核苷酸和模板結合後釋放的焦磷酸引發酶級聯反應，促使熒光素發光並進行檢測。這項技術曾經被用作單核苷酸多態性（SNP）的基因型和單倍型的檢測，以及細菌和病毒的鑒定和分型研究。這項技術的一個主要特點是在Pyrogarm™軟體上顯示的峰值高度來自於序列分析的原始數據，通過峰值的高度可以精確的檢測混合DNA模板中等位基因的頻率。

目前甲基化研究方面，很多甲基化定量分析的報道採用亞硫酸氫鹽處理甲基化樣本，並用混合的PCR產物
作為校正。其主要原理是：亞硫酸氫鹽可以將沒有甲基化的胞嘧啶轉化為尿嘧啶，而在適當的實驗條件下甲基化的胞嘧啶保持不變。因而，用它處理樣本後，再進行PCR擴增，甲基化的位點可以被當作一個C/T的SNP來處理，它的基因頻率為0－100％。在此，我們給大家介紹一個研究人員使用Pyrosequencing技術分析並精確定量DNA甲基化水平的例子。

研究者在一個Pyrosequencing反應中同時檢測了6個甲基化位點。這種方法同樣可以用於石蠟包埋的組織，並且具有較高的重復性和精確性。實驗選擇谷胱甘肽-S-轉移酶π（GSTP1）轉錄啟動位點的CpG島進行檢測。這些位點在正常前列腺組織中是非甲基化的，而在腫瘤樣本中高甲基化。通過PCR擴增一個包含17個甲基化多態位點140bp的片段，並用4個測序引物研究其中15個位點（Table 1）。使用在線的SNP測序引物設計軟體（Pyrosequencing AB）設計測序引物，其中一些甲基化多態性位點用最可能的鹼基所代替，以減少計算的數量。再通過人工檢測測序引物可能存在的錯配。此外，同時在PSQ 96MA DNA分析儀上運行空白對照，扣除由測序引物、生物素標記的引物或是模板引起的背景。

PCR引物設計完全與模板相匹配，不覆蓋任何甲基化多態性區域。使用10ng亞硫酸氫鹽轉化的DNA樣本或是10 fmol純化的PCR產物，10 pmol 正向（5』-GTGATTTAGTATTGG-3』）和反向（5』-biotin-AACTCTAAACCCCATC-3』）引物擴增GSTP1轉錄啟動位點的基因片段，擴增片段長度為144bp。反應體系為60 mM Tris-SO4, pH 8.9, 18 mM (NH4)2SO4, 1 mM MgSO4, 200 μM dNTPs，以及3 U Platinum Taq DNA高保真聚合酶，終體積為50μL。PCR循環設置：首先在95℃下變性4分鍾，然後在95℃ 30S，50℃ 45S以及72℃ 20S條件下重復50個循環，最後一步延伸步驟在72℃下4分鍾，中止反應。PCR反應在Eppendorf的Mastercycler 96

哺乳動物基因組中，DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化. DNA甲基化是一種基因外修飾，不改變DNA的一級結構; 他在細胞正常發育、基因表達模式以及基因組穩定性中起著至關重要的作用. 全基因組低甲基化，維持甲基化模式酶的調節失控和正常非甲基化CpG島的高甲基化是人類腫瘤中普遍存在的現象. DNA高甲基化是導致抑癌基因失活的又一個機制.

『叄』 GSH-Px是什麼什麼意思有什麼作用

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)可以清除由活性氧和•OH誘發的脂質過氧化物，保護細胞膜結構和功能的完整性
體內GSH-Px活性的檢測採用DTNB顯色法。

『肆』 誰知道測DNA甲基化的方法

http://www.ebiotrade.com/emgzf/genenews200404/gene5.htm您自己看吧！好多圖片粘貼不過來，還不如你自己看。

一種全新的DNA甲基化研究方法——Pyrosequencing技術

DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾，它是由DNA甲基轉移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體，將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶（mC）的一種反應，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化學性修飾鹼基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位點，它在基因組中呈不均勻分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的區域，在哺乳動物中mC約佔C總量的2－7％。一般說來，DNA的甲基化會抑制基因的表達。DNA的甲基化對維持染色體的結構、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發生發展都起重要的作用。

CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區段，CpG保持或高於正常概率，這些區段被稱作CpG島。CpG島主要位於基因的啟動子和第一外顯子區域，約有60％以上基因的啟動子含有CpG島。 CpG甲基化的研究在腫瘤的研究中有著非常主要的地位。通過基因啟動子區及附近區域CpG島胞嘧啶的甲基化可以在轉錄水平調節基因的表達，從而引起相應基因沉默，去甲基化又可恢復其表達。DNA甲基化在生理情況下就參與了控制基因的時空表達，在腫瘤發生時，腫瘤細胞全基因組低甲基化是一個重要特徵。腫瘤細胞基因組甲基化的程度與正常細胞相比僅為20-60% , 同時伴有局部區域基因的高甲基化,包括腫瘤抑制基因、抑制腫瘤轉移和浸潤的基因、細胞周期調節基因、DNA修復基因、血管形成抑制基因等。但是目前研究手段的局限，限制了DNA甲基化的廣泛研究。

近年來，研究者不斷探索定性及定量檢測單個或多個甲基化位點的方法，但由於甲基化多態性區域存在的密度很高，所以對於延伸反應其引物的位置很難設計。Pyrosequencing技術作為一種新的序列分析技術，能夠快速地檢測甲基化的頻率，對樣品中的甲基化位點進行定性及定量檢測，為甲基化研究提供了新的途徑。

從原理上來看，Pyrosequencing是一種通過合成方法進行序列分析的方法，它通過核苷酸和模板結合後釋放的焦磷酸引發酶級聯反應，促使熒光素發光並進行檢測。這項技術曾經被用作單核苷酸多態性（SNP）的基因型和單倍型的檢測，以及細菌和病毒的鑒定和分型研究。這項技術的一個主要特點是在Pyrogarm™軟體上顯示的峰值高度來自於序列分析的原始數據，通過峰值的高度可以精確的檢測混合DNA模板中等位基因的頻率。

目前甲基化研究方面，很多甲基化定量分析的報道採用亞硫酸氫鹽處理甲基化樣本，並用混合的PCR產物
作為校正。其主要原理是：亞硫酸氫鹽可以將沒有甲基化的胞嘧啶轉化為尿嘧啶，而在適當的實驗條件下甲基化的胞嘧啶保持不變。因而，用它處理樣本後，再進行PCR擴增，甲基化的位點可以被當作一個C/T的SNP來處理，它的基因頻率為0－100％。在此，我們給大家介紹一個研究人員使用Pyrosequencing技術分析並精確定量DNA甲基化水平的例子。

研究者在一個Pyrosequencing反應中同時檢測了6個甲基化位點。這種方法同樣可以用於石蠟包埋的組織，並且具有較高的重復性和精確性。實驗選擇谷胱甘肽-S-轉移酶π（GSTP1）轉錄啟動位點的CpG島進行檢測。這些位點在正常前列腺組織中是非甲基化的，而在腫瘤樣本中高甲基化。通過PCR擴增一個包含17個甲基化多態位點140bp的片段，並用4個測序引物研究其中15個位點（Table 1）。使用在線的SNP測序引物設計軟體（Pyrosequencing AB）設計測序引物，其中一些甲基化多態性位點用最可能的鹼基所代替，以減少計算的數量。再通過人工檢測測序引物可能存在的錯配。此外，同時在PSQ 96MA DNA分析儀上運行空白對照，扣除由測序引物、生物素標記的引物或是模板引起的背景。

PCR引物設計完全與模板相匹配，不覆蓋任何甲基化多態性區域。使用10ng亞硫酸氫鹽轉化的DNA樣本或是10 fmol純化的PCR產物，10 pmol 正向（5』-GTGATTTAGTATTGG-3』）和反向（5』-biotin-AACTCTAAACCCCATC-3』）引物擴增GSTP1轉錄啟動位點的基因片段，擴增片段長度為144bp。反應體系為60 mM Tris-SO4, pH 8.9, 18 mM (NH4)2SO4, 1 mM MgSO4, 200 μM dNTPs，以及3 U Platinum Taq DNA高保真聚合酶，終體積為50μL。PCR循環設置：首先在95℃下變性4分鍾，然後在95℃ 30S，50℃ 45S以及72℃ 20S條件下重復50個循環，最後一步延伸步驟在72℃下4分鍾，中止反應。PCR反應在Eppendorf的Mastercycler 96

哺乳動物基因組中，DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化. DNA甲基化是一種基因外修飾，不改變DNA的一級結構; 他在細胞正常發育、基因表達模式以及基因組穩定性中起著至關重要的作用. 全基因組低甲基化，維持甲基化模式酶的調節失控和正常非甲基化CpG島的高甲基化是人類腫瘤中普遍存在的現象. DNA高甲基化是導致抑癌基因失活的又一個機制.
http://www.wjgnet.com/1009-3079/abstract_cn.asp?f=1420&v=11

『伍』 為什麼要做同型半胱氨酸檢測

為什麼要做同型半胱氨酸檢測？同型半胱氨酸是人體內合成的一種蛋白質，在理想狀態下其在血液中的含量很低。

如果身體不處於最佳最佳營養狀態，血液中的同型半胱氨酸將會蓄積，增加患病風險，相關疾病50多種。

同型半胱氨酸由蛋氨酸轉化而成。

人體可以通過一定途徑把它轉化成兩種有益物質之一：

一種是谷胱甘肽，是體內重要的抗氧化劑，另一種是甲基供體，是對大腦和身體有益的「智力」營養素。

如果飲食中所含的B族維生素不處於最佳量，那麼催化同型半胱氨酸轉化為上述兩種物質的酶就無法正常工作，體內同型半胱氨酸無法轉化，在血液不斷積累。

同型半胱氨酸在血液中積累，患心臟病、中風、癌症、糖尿病、抑鬱症、早老性痴呆症等各類疾病可能性不斷提高，相關疾病50多種。

延長健康壽命的最佳方法之一就是降低同型半胱氨酸的水平。目標是降到6個單位以下。

要將同型半胱氨酸水平保持在6個單位以下，最有效快捷的途徑是補充可降低同型半胱氨酸水平的營養素，包括維生素B2、維生素B6、維生素B12、葉酸和鋅。

『陸』 谷胱甘肽的檢測標准

Glutathionum
C10H17N3O6S Mr:307.3
DEFINITION
谷胱甘肽
定義描述
L－r谷氨醯基－L－半胱氨醯基甘氨酸
含量：按乾燥品計算，98.0%-101.0%
性狀
外觀性狀：白色或幾乎白色結晶性粉末或無色的結晶。
溶解度：易溶於水，微溶於96%乙醇及二氯甲烷。
鑒別
A 比旋度符合特定的光學旋轉測定（見測定項）。
B 紅外吸收光譜檢測（2.2.24)
對比：谷胱甘肽CRS.
測定
溶液S：取該品5.0g，蒸餾水R溶解並稀釋至50ml。
溶液澄清度溶液S澄清（2.2.1），無色（2.2.2,Method II)
比旋度（2.2.7）－15.5～－17.5（干品物質）
取該品1.0g，蒸餾水R溶解並稀釋至25.0ml。
有關物質採用毛細管電泳法（2.2.47)
溶液應臨用前新鮮配製
毛細管
-材料：石英（未塗層）
-尺寸：有效長度0.5m，總長：0.6m，內徑75 μm
溫度：25℃
電解質溶液：取無水磷酸二氫鈉R1.50g，加水R230.0ml，用磷酸R調節PH值為1.80。加水R稀釋至150.0ml，檢測PH值，如有必要，用磷酸R或氫氧化鈉溶液R調節PH值。
檢測：採用分光光度計在200 nm處檢測
新毛細管的預處理：在首次進樣前在壓力138Kpa下用0.1mol/L鹽酸溶液前沖洗毛細管20min，138Kpa壓力下用水R沖洗10分鍾已達到全平衡狀態，用電解質溶液在350kpa條件下沖洗40min，在電壓20kv條件下保持60min。
預處理的毛細管：138 kPa壓力下，用電解質溶液沖洗毛細管40min；
批間沖洗：138 kPa壓力下，依次用水R沖洗毛細管1min，0.1mol/L氫氧化鈉溶液沖洗2min；水R沖洗1min，0.1mol/L鹽酸溶液沖洗3min，最後用電解質溶液沖洗10min；
進樣：3.45 kPa壓力下維持5s；注入電解質溶液（空白溶液），對照溶液（b）、（c）和供試溶液a、b
遷移：電壓為20KV
運行時間：45min
相對遷移率：相對於內標物質（約14min）
雜質A=約0.77
雜質B=約1.04；雜質E=約1.2
雜質C=約1.26；雜質D=約1.3
系統適用性
解析度：內標物質產生的峰與對照溶液C中那個雜質B產生的峰之間最低為1.5，如有必要，使用稀氫氧化鈉溶液上調PH值
峰-谷比：最低位2.5.其中：HP=雜質D產生的基線峰以上的高度
HV=對照溶液中谷胱甘肽產生的峰的分離曲線的最低點以上的高度
如有必要採用磷酸下調PH。
電泳法測定以上項目，供試溶液a在與內標物質在相同的遷移時間里沒有出現峰（可用苯丙氨酸峰進行校正）
限度供試溶液B
校正面積：相對遷移時間除以所有峰面積之和
校正因子：
雜質A、B、E：
氯化物不得大於200ppm
取溶液S2.5ml，加水R稀釋至15ml。
硫酸鹽不得大於300ppm
取溶液S2.5ml，加蒸餾水R稀釋至15ml
銨鹽不得超過200ppm
鐵不得超過10ppm

『柒』 細胞凋亡的早期檢測方法有哪些

1、PS（磷脂醯絲氨酸）在胞外膜分布的檢測
PS從胞膜內側轉移到外側現象是在細胞凋亡的早期即可發生標志。AnnexinV是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白，能專一性的結合暴露在胞膜外側的PS，使用熒光素標記的AnnexinV 蛋白（如Annexin V-FITC）即可檢測細胞凋亡。由於這是一種凋亡早期的活細胞檢測（懸浮細胞和貼壁細胞都適用），可與DNA染料或別的晚期檢測方法相結合來標記凋亡的發展階段。操作簡便快速，10分鍾就可完成檢測。靈敏度高，可作為流式方法分析凋亡細胞的基礎。
2、細胞內氧化還原狀態改變的檢測
正常狀態下,谷胱甘肽（GSH）作為細胞內的一種重要的氧化還原緩沖劑。細胞內有毒的氧化物通過被GSH還原而清除，氧化型的GSH又可被GSH還原酶迅速還原。這一反應在線粒體中尤為重要，許多呼吸作用中副產物的氧化損傷將由此被消化除。在細胞膜中有可被凋亡信號啟動的ATP依賴的GSH轉移系統。當細胞內GSH的排除非常活躍時，細胞液就由還原環境轉為氧化環境，這可能導致了凋亡早期細胞線粒體膜電位的降低，從而使細胞色素C（三羧酸循環中的重要組分）從線粒體內轉移到細胞液中，啟動凋亡效應器caspase的級聯反應。
3、細胞色素C的檢測
細胞色素C作為一種信號物質，在細胞凋亡中發揮著重要的作用。正常情況下，它存在於線粒體內膜和外膜之間的腔中，而不存在於胞漿內。凋亡信號刺激後可使其從線粒體釋放到胞漿中，結合Apaf-1後而啟動caspase級聯活化反應，首先可激活caspase-9，後者再激活caspase-3和下游的其它caspase分子。凋亡發生的早期，細胞色素C泄漏到胞漿中，檢測胞漿中細胞色素c的含量可反映細胞的早期凋亡。
4、線粒體膜電位變化的檢測
在細胞凋亡的早期，線粒體在形態學上沒有明顯變化。但線粒體可發生很多生理生化的改變。例如在受到凋亡誘導後，線粒體的轉膜電位發生變化，導致膜穿透性改變。MitoSensorTM是一種陽離子染色劑，對此膜電位改變非常敏感，可呈現出不同的熒光染色。正常細胞中，它在線粒體中形成聚集體，發出強烈的紅色熒光。凋亡細胞中，因線粒體跨膜電位改變，它則以單體形式停留於胞漿中，發出綠色熒光。用熒光顯微鏡或流式細胞儀可清楚地分辨這兩種不同的熒光信號。

『捌』 谷胱甘肽過氧化物酶的簡介

谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）是機體內廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的組成成分，它能催化GSH變為GSSG，使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，同時促進H2O2的分解，從而保護細胞膜的結構及功能不受過氧化物的干擾及損害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映機體硒水平。
谷胱甘肽過氧化物酶可以催化GSH產生GSSG，而谷胱甘肽還原酶可以利用NADPH催化GSSG產生GSH，通過檢測NADPH的減少量就可以計算出谷胱甘肽過氧化物酶的活力水平。在上述反應中谷胱甘肽過氧化物酶是整個反應體系的限速步驟，因此NADPH的減少量和谷胱甘肽過氧化物酶的活力線性相關。

『玖』 抗氧化活性的實驗測定方法有哪些

1、ORAC

ORAC是Oxygen Radical Absorption Capacity（氧化自由基吸收能力）的縮寫，是一種測試抗氧化能力的評價方法體系。

ORAC抗氧化測試包括對：過氧化自由基（含親水性、親脂性）、羥基自由基、過氧亞硝基、單線態氧、超氧陰離子 這五種人體最主要的活性氧自由基進行全面的分析，能有效得出樣品的抗氧化實際能力及分布情況。

ORAC抗氧化生物測試是比普通抗氧化測試的更高一層的測試方案。利用人體細胞有效測試出樣品的抗氧化力（生物利用度）。

2、其他評價方法

抗氧化不僅僅是一個概念，對生物體抗氧化的效果是可以量化測定的，作為動物實驗一般是服用抗氧化劑一定時間後，測定血液中的酯質過氧化產物丙二醛變化、以及肝臟勻漿中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX的活力變化。

從上述兩種酶和MDA的變化狀況來判定抗氧化的強度及效果。作為人體不可能測肝臟勻漿，可以測定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX來判定抗氧化的效果。

3、抗油脂過氧化力測定

脂類包括的范圍很廣，構成生物膜的主要成分，脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化，脂類過氧化過程中會產生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，這些產物會損傷生物細胞。因此，能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學意義。

A硫氰酸鐵法FTC：硫氰酸鐵鹽(FTC)比色法是基於在酸性條件下，脂質氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+，然後Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480-515nm內有最大吸收的紅色絡合物。通常用500nm處吸光值的高低表示物質抗脂質過氧化的能力，吸光值越小，表明物質的抗脂質過氧化能力越強。

B硫代巴比妥酸反應物TBARs法：是評價油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亞油酸氧化後的終產物主要是丙二醛，這些過氧化產物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，該有色化合物在530 nm左右有吸收。

4、清除DPPH能力的側定

DP是一種早期合成的有機自由基，常用來評估抗氧化物的供氫能力，它在有機溶劑中非常穩定，呈紫色，而且在處有一個特徵吸收峰，當遇到自由基清除劑時，DPPH的孤對電子被配對而使其退色，也就是在最大吸收波長處的吸光值變小。因此，可通過測定吸光值的變化來評價樣品對DPPH自由基的清除效果。

5、還原能力的測定

還原力的測定是檢驗樣品是否是良好的電子供體的方法，還原力強的樣品應該是良好的電子供應者，它供應的電子不僅能使Fe3+還原為Fe2+，也可以與自由基反應。還原力的測定是用來評價抗氧化劑活性的常用方法。

6、抑制 LOX酶實驗

脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白，分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個多膚鏈組成，含有三價鐵離子金屬輔基則有活性，而包含二價鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。

在生物體內的主要作用是，專一催化含有順，順一戊二烯結構的多元不飽和脂肪酸的加氧反應，生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。

在生物體內的主耍底物是甘油脂類〔如磷脂）釋放的游離不飽和脂肪酸，其中動物體內的主要底物是花生四烯酸，植物體內的主要底物是亞油酸和亞麻酸，主要產物為過氧羚基型脂肪酸。

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在機體內抗氧化活性成分發揮作用主要通過兩個機制：第一是鏈的中斷機制，主要中斷自由基的鏈式反應，例如多酌類化合物、VE、VC等天然抗氧化物質可向自由基提供一個電子來中斷鏈式反應。第二是促使產生自由基的催化劑失活而達到抗氧化的目的。

抗氧化物質可與超氧化物歧化酶等酶類或抗氧化物質協同構成抗氧化聯合系統，增強機體的抗氧化能力，修復損傷的DNA，使體內的基因能夠正常的表達。對於食品而言，食品中的抗氧化活性成分不但可以防止食品自身的腐敗變質還可以生產加工為抗氧化劑。

田迪英等對41種果蔬進行了抗氧化活性的研究，發現其中大部分果蔬具有較強的抗氧化能力。謝天柱等對添加包括茶多酷在內的多種抗氧化劑的蘋果酒的抗氧化能力的比較，結果發現，添加0.1%的茶多酷可提高果酒的抗氧化能力，並可有效減輕果酒的褐變程度。