黃麴黴素的限量檢測方法

㈠ 怎樣測試自製櫻桃酒中黃麴黴素

黃麴黴素（AF)的檢測方法從最初以薄層層析法為主，發展到高效液相色譜法、微柱法、酶聯免疫吸附法等多種方法普遍應用，其進展與新的化學檢測手段和新儀器的出現密不可分。這些新方法、新手段的快速應用，為黃麴黴毒素的檢測提供了更廣泛的選擇餘地，適應了不同的檢測目的和要求。

薄層層析法
薄層層析法（TLC）是測定AF的經典方法，其原理是將樣品經過提取、柱層析、洗脫、濃縮、薄層分離後，在波長365nm紫外光下產生藍紫色或黃綠色熒光，並根據其在薄層上顯示的最低檢出量來確定其含量。

高效液相色譜法
HPLC具有高解析度，分析時間較短等優點。它的原理是樣品溶液中欲分離的幾種化合物在流動相和固定相之間有不同的分配量，從而達到分離的目的。AF經柱後電化學衍生化後，能發射特徵性熒光，被熒光檢測器捕獲後而得到檢測，最後經化學工作站處理數據。這一檢測方法，將化學分析試驗與領先的計算機技術結合，使自動化程度得到極大的提高，在試驗空間、人力和儀器都保持不變的情況下，能檢測更多的樣品。HPLC是近幾年發展起來的檢測AFB1的方法，主要是用熒光檢測器檢測。該法快速而准確，但需要昂貴的儀器設備，未能廣泛使用。

微柱法
微柱法測定AF，是利用微柱管內的硅鎂型吸附劑吸附AF並在365nm紫外光下顯示熒光，其強度與一定濃度的AF含量成正比關系，由此可簡略定量AF。

酶聯免疫吸附法
酶聯免疫吸附法（ELISA）是抗原（或抗體）吸附劑和用酶標記的抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原和抗體）起特異的免疫學反應，用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度，是一種定性或半定量的方法。大致採用兩種方法檢測AF：一種是用雙抗體夾心法；另一種是用競爭法。免疫吸附法測定的試劑盒及配套儀器、方法被列入國家標准（GB/T5009 22-1996第二法）。
關於運用酶聯免疫法檢測AFB1的檢測報道也較多，目前國外已有較成熟的檢測食品及飼料中AFB1等真菌毒素的ELISA試劑盒出售，我國自20世紀90年代以來也有一些以ELISA檢測食品及飼料中AFB1的研究報道。

其他方法
（1）溴化熒光分光光度法（SFB）
樣品經甲醇-水混合溶劑提取後，部分提取液通過固相分離進行柱前處理，500μL純化的提取液用溴試劑衍生化後，用熒光檢測計中檢測，樣品熒光吸收度與硫酸喹啉液的吸收度比較可直接換算成AF的總含量。該法已通過AOAC和美國農業部聯邦穀物檢測中心的認證。
（2）超光譜方法（HS）
超光譜法是基於反射能基礎上的一種非侵入無破壞的映像技術，用於農產品檢測中，能夠快速地提供該產品的有關化學和其他方面的內部細節。另據研究報道，培訓黃蜂可用於AF檢測。由於AF主要是由黃麴黴產生的，寄生黃蜂通過培訓能把黃麴黴的氣味和糖水聯系起來，並對這些氣味產生有區別的行為反應，藉此來識別目標氣味的存在。這種培訓反應正在應用於儲藏玉米、花生的AF監控和檢測實踐當中，目前還未給出有關的結果評定。

各方法對比
薄層層析法對樣品處理繁瑣，實驗過程復雜，所需時間多，易受雜質干擾，較適合於對AF的定性檢測，是研究AF初期所使用的主要方法。今後，雖然薄層層析法在不斷地改進，並在一般實驗室均可完成操作，但由於它復雜的前處理過程致使在應用中仍然會受到一定程度的限制。
高效液相色譜法測定AF，技術水平要求較高，目前採用這種方法檢測AF較多，但具體一次實驗所使用的化學葯劑和處理途徑差別很大，對實驗結果的精度造成影響，這種方法還應在實踐中進一步改進。但總體上說高效液相色譜法操作較為簡便，同時可檢測多個AF種類，適於大批量樣品的分析。將免疫親和柱與高效液相色譜法結合應用，是目前採用較多的一種方法，今後將被廣泛應用。
微柱法測定AF，主要是用來檢驗AF的存在與否以及快速篩選出超標樣品，而要對AF種類進行區分定量檢驗，則需要對不同AF組分進行分離，再利用其他方法檢測。因此，微柱法並不能完成整個AF檢測過程，僅適用於定性檢驗。
酶聯免疫吸附法操作簡便，使用較為安全，但由於酶本身的不穩定性，用此方法檢驗AF有可能帶來假陽、陰性結果，而且研製出的AF快速測試盒多以測定最具毒性的種屬為主，食品和飼料工業上利用它來界定食品或飼料中AF的超標問題。酶聯免疫吸附法的檢測精度還有待於提高。
溴化熒光分光光度法的最大優點是檢測時不使用AF對照品，同時快速、靈敏，適合大批量樣品普查，儀器價格也較低，張雪輝等比較了用SFB法和溴衍生HPLC檢測中葯中AF的結果，發現SFB法在測定中葯時可能出現許多假陽性結果。

㈡ 黃麴黴毒素B1的檢測方法

GB2761-2014《食品安全國家標准 食品中真菌黴素的限量》中對於黃麴黴毒素B1的限量以及檢測方法做了修改，嬰幼兒配方食品及嬰幼兒輔助食品按照GB5009.24規定的方法測試，其他食品按照GB/T18979規定的方法測定。 TLC法是測定黃麴黴毒素的經典方法，是中國測定食品及飼料中AFT黃麴黴素B1(AFB1)的標准方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來，經溶劑萃取純化，再在薄層板上層析展開，分離，利用AFB1的熒光特性，根據熒光斑點的大小和強弱，比較測定黃麴黴毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法，TLC法由於設備簡單，易於普及，所以國內外仍在使用，但由於該法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質較多因而在展開時影響斑點的熒光強度，而雙向展開雖避免了雜質干擾，增加了靈敏度，但增加了操作步驟和時間。 酶聯免疫法檢測AFB1的理論基礎是抗原抗體反應，其採用單克隆或多克隆抗體技術，具有特異性強、分析時間短等優點。其原理是抗原（或抗體）吸附於載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原或抗體）起特異的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類：一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1， 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便，目前國內外已研製了酶標記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器,方法也被列入國家標准(GB/T5009.22 1996第二法)。
但由於ELISA法中酶的活性易受反應條件影響，因此ELISA法測定結果穩定性較差，分析結果的准確性不高，容易出現假陽性結果。 一般來說，組織中黃麴黴毒素含量很低，而液相色譜串聯質譜法具有比高效色譜法更高的靈敏度和准確性，如今這種方法還極少使用在測定組織黴菌毒素含量中。該方法檢測限可達0.02~0.025 ppb。 84%甲醇水溶液提取樣品中,正己烷脫脂,HLB固相萃取柱凈化。採用電噴霧電離,正離子掃描,選擇多反應檢測模式（MRM）監測,外標法定量，該法靈敏,結果可靠。

㈢ 家庭如何檢驗黃麴黴素

一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。

由此產生的一步式黃麴黴毒素快速檢測試紙可在5—10分鍾完成對樣品中黃麴黴毒素的定性測定，藉助黃麴黴毒素標准樣品這種方法能估算黃麴黴毒素的含量，非常適用於現場測試和進行大量樣品的初選。

薄層分析法(TLC)是檢測黃麴黴素最為經典的方法，也是以前最為常用的方法，至今仍為一些檢測機構所用，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來，經柱層析凈化後，再在薄板上展開後分離。

(3)黃麴黴素的限量檢測方法擴展閱讀：

HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離，再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前，該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離，其凈化效果優異。

該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，檢測速度快且定性與定量准確，檢測限低，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴，前處理方法相對繁瑣，若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加，對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。

㈣ 花生油里的黃麴黴素如何檢驗

GB/T 18979-2003 食品中黃麴黴毒素的測定 免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法

㈤ 黃麴黴毒素怎麼檢測

檢測方法

1、薄層分析法(TLC)

TLC法是檢測黃麴黴素最為經典的方法，也是以前最為常用的方法，至今仍為一些檢測機構所用，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來，經柱層析凈化後，再在薄板上展開後分離。

利用黃麴黴素的熒光特性，根據熒光斑點的強弱與標准比較確定其含量，對於一些組分很復雜的試樣要雙向展開，才能獲得較高的靈敏度。

TLC法設備簡單，檢測費用低，但操作繁瑣、費時，萃取和凈化效果不理想，靈敏度差，對操作人員的身體健康存在較大程度的危害。

2、液相色譜法(HPLC)

HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離，再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前，該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離，其凈化效果優異。

該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，檢測速度快且定性與定量准確，檢測限低，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴，前處理方法相對繁瑣，若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加，對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。

3、酶聯免疫法(ELISA)

ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。

該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀，且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。

4、毛細管電泳法(CE)

毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃麴黴素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。

Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1，取得了較為理想的分離效果，其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高，操作復雜，不適宜在試樣檢測中廣泛應用。

5、熒光光度法(IA C/S FB)

IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃麴黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃麴黴素的含量。

該方法對檢測人員身體健康無危害，檢測速度迅速，靈敏度高，適用於大量試樣檢測，且定量准確，但檢測費用較高，需要配置專用設備，且不能對單一的毒素進行檢測。

6、金標試紙法

金標試紙法，實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應，可一步檢測黃麴黴素。

該法可在5～10 min內完成對試樣中黃麴黴素的定性測定，具有簡單、快速的特點，且無須其他儀器設備的配合，既可在實驗室中進行檢測，也可在現場進行實地測定，但是其檢測的准確度、精度有待進一步的研究。

7、生物感測器法

生物感測器是使用固定化技術將具有分子識別能力的生物活性物質與物理化學換能器結合，可以用來探測生物體內外的環境化學物質或與之起特異性交互作用後產生響應的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物感測器為免疫感測器口。

根據能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同，免疫感測器可分為電化學免疫感測器、光學免疫感測器、壓電晶體免疫感測器等。由於生物感測器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合於現場檢測等優點，因此各國科研工作者正積極探索研製新型生物感測器用於檢測黃麴黴素。

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黃麴黴毒的危害

1993年黃麴黴毒素被世界衛生組織（WHO）的癌症研究機構劃定為1類致癌物，是一種毒性極強的劇毒物質，足以說明黃麴黴毒素對身體的危害是極大的。黃麴黴毒素毒性遠遠高於氰化物、砷化物和有機農葯的毒性，其中黃麴黴毒素B1毒性最大。

黃麴黴毒素進入體內後，主要在肝細胞內質網微粒體混合功能氧化酶系的作用下進行代謝。因此，黃麴黴毒素的危害性在於對人的肝臟組織有破壞作用，嚴重時可導致肝癌甚至死亡。 當然，黃麴黴毒素沒有經過代謝活化是無致癌性的。

參考資料來源：網路-黃麴黴毒素檢測方法

㈥ 怎樣檢查白酒里的黃麴黴素

咨詢記錄 · 回答於2021-01-14

㈦ 中葯材黃麴黴素是用以下哪種方法檢驗的

2015版《中國葯典》中國家食品葯品監督管理局對陳皮、僵蠶、桃仁、胖大海、酸棗仁、薏苡仁、柏子仁、蓮子、麥芽、使君子、檳榔、肉豆蔻、決明子、遠志、大棗、地龍、水蛭、全蠍、蜈蚣等19種葯材及其飲片品種項下增加「黃麴黴毒素」檢查項目。葯典限量為黃麴黴毒素B1不得過5 μg/kg，黃麴黴毒素B1、B2、G1、G2總量不得過10 μg/kg 。同時第四部2351規定黃麴黴毒素測定採用高效液相色譜法，另外葯典增補描述該法增加柱後光化學衍生法檢測。Pribolab KRC光化學柱後衍生器，雙波長254nm/352nm衍生光源，FEP衍生反應池線圈<10米，光源壽命超3000小時，不需要任何衍生試劑。配合PriboFast黃麴黴毒素免疫親和柱。

㈧ 國家規定黃麴黴素的范圍是多少

黃麴黴毒素(AFT)是一類化學結構類似的化合物，均為二氫呋喃香豆素的衍生物。它們存在於土壤、動植物、各種堅果中，特別是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油產品，是黴菌毒素中毒性最大、對人類健康危害極為突出的一類黴菌毒素。國家規定黃麴黴素的范圍是：

1. 玉米、花生、花生油，堅果和乾果（核桃、杏仁）≤20μg/kg (ppb)≤20μg/kg (ppb)≤2、4、5、8、10、15μg/kg (ppb)

2. 玉米及花生仁製品（按原料折算）≤20 μg/kg (ppb)≤20μg/kg (ppb)≤2、4、5、8、10、15μg/kg (ppb)

3. 大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）≤10 μg/kg (ppb)≤10μg/kg (ppb)≤2、4μg/kg (ppb)

4. 其它糧食（麥類、麵粉、薯干）、發酵食品（醬油、食用醋、豆豉、腐乳製品）、澱粉類製品（糕點、餅干、麵包、裱花蛋糕）≤5μg/kg (ppb)≤5μg/kg (ppb)不得檢出

5. 牛乳及其製品（消毒牛乳、新鮮生牛乳、全脂牛奶粉、淡煉乳、甜煉乳、奶油）、黃油、新鮮豬組織（肝、腎、血、瘦肉）≤0.5μg/kg (ppb)≤0.5μg/kg (ppb)≤0.05μg/kg (ppb)

   

黃麴黴毒素的危害性：

1. 在於對人及動物肝臟組織有破壞作用，嚴重時可導致肝癌甚至死亡。

2. 在天然污染的食品中以黃麴黴毒素B1最為多見，其毒性和致癌性也最強。

3. B1是最危險的致癌物，經常在玉米，花生，棉花種子，一些乾果中常能檢測到。它們在紫外線照射下能產生熒光，根據熒光顏色不同，將其分為B族和G族兩大類及其衍生物。AFT已發現20餘種。

4. AFT主要污染糧油食品、動植物食品等；如花生、玉米，大米、小麥、豆類、堅果類、肉類、乳及乳製品、水產品等均有黃麴黴毒素污染。

㈨ 怎樣檢查白酒里的黃麴黴素

檢查白酒里的黃麴黴素的方法：

1、薄層分析法，此法是檢測黃麴黴素最為經典的方法，至今仍為一些檢測機構所用，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來，經柱層析凈化後，再在薄板上展開後分離。

2、液相色譜法，此法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離，再用熒光檢測器測定。此法能准確地分離不同種類的黃麴黴素，檢測速度快且定性與定量准確，檢測限低，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴，前處理方法相對繁瑣。

3、酶聯免疫法，此法為近年較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀，且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。

㈩ 你們黃麴黴毒素B1是怎麼檢測的用什麼方法學檢測的

通用方法

薄膜層析法和液相色譜法是目前國內絕大多數檢測機構都在使用的方法。由於其檢測周期長，程序復雜所需試劑繁多等缺點已遠遠不能滿足現代檢測要求.隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學生物化學，分子生物學的不斷發展人們已創建了不少快速，簡便特異，敏感低耗且適用的黃麴黴毒素檢測方法.而且以金標試紙為代表的這些方法已經被先進國家所廣泛使用，引進和消化這些先進的方法是我們檢測領域的當務之急.免疫親和柱法優點很多但由於檢測費用過高，而無法普及.而一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法似乎更適用於中國值得推廣。薄層層析（Thin-Layer Chromatography,TLC）是在黃麴黴毒素研究方面應用最廣的分離技術.自1990年它被列為AOAC （Association of Official Agricultural Chemists）標准方法，該方法同時具有定性和定量分析黃麴黴毒素的功能.2、液相色譜法液相色譜（Liquid Chromatography,LC）與薄層層析在許多方面具有相似性二者互相補充.通常用TLC進行前期的條件設定，選擇適宜的分離條件後再用LC進行黃麴黴毒素的定量測定。3、免疫化學分析方法利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設計的黃麴黴毒素的免疫分析方法也是最常用的黃麴黴毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法（Radioimmunoassay,RIA），酶聯免疫法（Enzyme-linked of Immunosorbent Assay,ELISA）和免疫層析法（Immunoaflinity Column Assay,ICA）.它們均可以對黃麴黴毒素進行定量測定。