『壹』 核酸檢驗方法
核酸檢測具體流程如下:
1. 核酸提取
使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動化儀器等商品化試劑或設備並按說明書操作。提取RNA時應注意防止RNA降解。DNA應置於-20℃保存,RNA和需長期保存的DNA應置於-80℃保存。
2. 逆轉錄合成cDNA
逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。
3. PCR擴增反應(使用二次擴增的套式PCR擴增方法)
PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶等)、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板(DNA或cDNA)。在擴增儀中,按照設定的程序進行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。
4. 擴增產物定性分析
擴增產物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法,與分子量標准比較,判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內。其它擴增產物分析方法還有限制性內切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動化核酸擴增儀使用酶聯比色分析或熒光探針雜交等原理測定。
5.結果判定和完成報告單
(1)實驗成立的條件:每一次檢測需同時做兩個陽性對照、兩個陰性對照,只有陽性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒有擴增出任何片段、雙份平行樣品結果一致的情況下實驗才成立,可以作出核酸陽性或陰性反應結果的判定。
(2)HIV核酸檢測陽性:發現核酸陽性反應,應該重復採集樣品進行復測,復測結果呈核酸陽性反應則判定為核酸陽性,復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果,需進一步隨訪檢測。
(3)HIV核酸檢測陰性:只可報告本次實驗結果陰性。
(4)應在完成檢測後5個工作日內發出檢測報告。
『貳』 做核酸檢測的正確方法
5月11日,武漢市新冠肺炎疫情防控指揮部涉疫大數據與流行病學調查組印發緊急通知,決定以10天為期,在武漢市范圍內開展全員新冠病毒核酸篩查。而在全國各地也有一些朋友好奇,核酸檢測到底檢測哪個部位?鼻咽拭子和口咽拭子有何不同?做核酸檢測時有哪些注意事項?
首都醫科大學附屬北京地壇醫院感染中核酸檢測標本可以採集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子統稱為咽拭子,經口的為口咽拭子,經鼻的就是鼻咽拭子。
口咽拭子
鼻咽拭子
做核酸檢測時,我們需要注意什麼呢?
在做核酸檢測前2小時盡量避免進食,以免引起嘔吐;
采樣前30分鍾不應吸煙、喝酒、咀嚼口香糖等;
檢測者需要正確佩戴口罩,檢測前取下口罩,檢測後立即戴好,可准備一個備用口罩,污染後方便及時更換;
在採集鼻咽拭子前檢測者應告知採集人員是否鼻中隔彎曲及鼻腔手術史,過程中可能出現鼻部酸癢感,刺激打噴嚏,可立即用紙巾或手肘遮擋;
鼻咽拭子採集後可能出現少量鼻腔出血,一般不需要特殊處理,如出血量較多請及時到醫院進行處理;
在採集口咽拭子時檢測者頭後仰,張口發出「啊」音,有助於暴露咽喉,但過程中會出現刺激性乾咳、惡心、嘔吐等症狀,檢測者可配合採集人員盡量放鬆、深呼吸;
核酸檢測前後都需要注意手部衛生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭雙手。
血清抗體檢測不受飲食影響 無需空腹
一般感染新冠病毒7-10天後,人體會產生針對病毒的特異性抗體。最先出現的是IgM抗體,隨後會出現IgG抗體,所以檢測這些特異性抗體,可以判斷人體是否感染過病毒,而檢測方法就是血清抗體檢測。
血清抗體需要抽取檢測者2-4mL的靜脈血液進行檢測,檢測結果不受飲食和葯物影響,因此檢測前不需要空腹。
為落實好新冠肺炎疫情常態化防控,全國各地陸續公布「核酸檢測機構名單」,推動重點人群「應檢盡檢」、其他人群「願檢盡檢」。目前國家衛生健康委推出「核酸檢測機構查詢」服務,在國務院客戶端上線,目前已有北京、天津、河北、遼寧、黑龍江、上海、江蘇、安徽、福建、山東、河南、湖北、湖南、廣東、廣西、海南、四川、貴州、雲南、寧夏、新疆生產建設兵團上傳的1226家檢測機構。
『叄』 核酸檢測怎麼做
核酸檢測目前都是取咽拭子的方法(病毒感染口腔粘膜上皮後會寄宿於口腔粘膜上皮,通過采咽拭子達到取樣目的),1 小時內送到專門檢測室內進行。這個性質決定不可能每個患者想做就能立馬做,比如大半夜來的患者就做不了,只能等待第二天儀器開機。
取咽拭子是一個高危的操作。據目前臨床研究來看,新型冠狀病毒感染肺炎的傳播途徑有三種,直接傳播、氣溶膠傳播、接觸傳播。其中飛沫混合在空氣中,形成氣溶膠,吸入後導致感染。所以對於取樣的人員而言,有被感染的風險。
核酸檢測注意事項
1.請出示健康通行碼。
2.測量體溫。
3.如您有以下情況之一,請到發熱門診就診:
(1)14天內有發熱或呼吸道症狀;
(2)14天內與新冠患者或無症狀感染者有接觸;
(3)14天內有病例報告社區的旅居史或居住史;
(4)聚集性發熱。
4.請正確佩戴口罩,檢測前取下口罩,檢測後立即戴好。
5.請有序排隊等候,保持1米距離。
6.做核酸檢測前2小時盡量避免進食,以免引起嘔吐。
7.采樣前30分鍾不應吸煙、喝酒、咀嚼口香糖等。
8.在採集口咽拭子時請頭後仰,張口發出「啊」音,有助於暴露咽喉。
9.採集過程中會出現乾咳、惡心、嘔吐等症狀,請配合採集人員,盡量放鬆、深呼吸。
『肆』 專家表示鼻咽拭子檢出率更高,核酸檢測拭子採集一般選用什麼方法
核酸拭子檢測是發現病毒存在的直接證據,新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測呈陽性,表明受試者體內存在病毒,可能具有傳染性。如果患者有發熱、呼吸道症狀或其他 NCP 臨床特徵,結合核酸檢測陽性可診斷為 NCP,如果沒有臨床症狀,核酸檢測結果為陽性,可以判斷為無症狀感染者。
采樣後立即離開現場,不要向採集點及周邊地區吐痰、扔垃圾,檢查員應注意試驗前後的手衛生。可以用免洗手消毒液、免洗手酒精、消毒棉等擦手。鼻咽拭子采樣和口咽拭子采樣會使被采樣者感到輕微不適,休息片刻即可緩解。因此,在取樣過程中,被取樣人應盡量配合取樣人員,盡量放鬆,不要過度移動頭部,以免取樣拭子刮傷黏膜。
『伍』 鼻拭子、咽拭子、鼻咽拭子、口咽拭子區別
首先,需要說明的是,這兩種方法的全稱分別為口咽拭子和鼻咽拭子。如果規范操作,使用口咽拭子或鼻咽拭子採集標本的方法,在本質上並沒有區別,都是為了採集到咽部標本,進行新冠肺炎病毒核酸檢測,以判定被采樣者是否感染了新冠肺炎病毒。
所不同的是,為了採集到咽部標本,一種是將采樣工具通過口腔進入的方法採集口咽部標本,一種是將采樣工具通過鼻腔進入的方法採集鼻咽部標本。因此,分別被稱為口咽拭子、鼻咽拭子。
在採集口咽拭子的樣本時,采樣者是可以看見所要采樣的咽部位置,但對口咽粘膜的刺激性較大,可能導致被采樣者咳嗽、惡心,甚至嘔吐等反應。而採集鼻咽拭子的樣本時,對鼻咽粘膜的刺激性則相對較小,但采樣者看不見采樣的咽部位置,主要依靠手部感覺到的阻力來完成采樣。
與鼻咽拭子相比,口咽拭子采樣有時會因為刺激性反應,較難達到規范性采樣要求。加上,由於我們的飲食、飲水和吞咽動作,會在一定程度上降低口咽部的病毒富集度,導致口咽拭子的陽性檢出率低於鼻咽試子。實際觀察和比較中,也發現鼻咽拭子的陽性檢出率高於口咽拭子。
當然,影響樣本陽性檢出率,還有其他因素,如采樣時機,通常病人發病後1周內採集的標本陽性檢出率高,而超過10天以後,由於咽部含有病毒的細胞濃度降低,檢出率也會隨之降低,一般沒有必要兩種采樣同時進行。
『陸』 核酸檢測方法
核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。
口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,刷取咽喉部位上皮細胞的檢測。受檢測者只要放鬆心情,張口發出「啊——」的聲音就可以了,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。
檢測時可能會有惡心、想要嘔吐的不適感覺,不過這些不適症狀通常只需要半分鍾到兩分鍾左右就可以完全緩解了。鼻咽拭子采樣是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣。棉簽進入鼻腔的深度約為鼻尖到耳垂的距離。
(6)口咽式核酸檢測方法擴展閱讀:
核酸檢測相關知識:
核酸檢測是檢測病毒的方法,它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測,可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。
季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。
新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。
感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。
『柒』 核酸檢測的方法
核酸檢測主要是鼻拭子或咽拭子法,經由鼻孔或口腔插入取得上呼吸道分泌物標本後送實驗室檢測。核酸檢測主要是指目前對於新型冠狀病毒肺炎的一種確診的實驗手段,核酸檢測一般分為鼻拭子、咽拭子或者肺泡灌洗液以及痰液,通過呼吸道的標本,我們在實驗室里可以檢測2019新型冠狀病毒的核酸,從而作為臨床診斷的一個重要的依據。那臨床上目前最常採用的檢測方法是鼻拭子或者是咽拭子,操作的時候由醫護人員採用特製的長柄取樣的棉簽,經由鼻孔或者經由口腔插入到鼻腔及咽腔中,在咽喉壁或者鼻腔的粘膜上進行塗抹,取得上呼吸道分泌物標本,這個標本取出之後再送到實驗室進行相關的核酸檢測。在做的過程中患者不用緊張,可能會有一些輕微的不適例如惡心,相信配合好醫護人員的話,能夠很快完成這個檢查,不會給您帶來很大的影響。
『捌』 咽拭子是怎麼一個采樣法
咽試子是一種常見的呼吸道傳染病的檢測方法,尤其是在我國遭遇新冠肺炎疫情之後,咽拭子採集法是目前常用的針對病毒核酸的檢測方法。如果咽拭子陽性,就代表著核酸檢測陽性,很有可能確診。
一、咽拭子的目的正常人的咽峽部培養應有口腔正常的菌群,而無法致其他病菌生長。咽部的細菌主要來自於外界,正常情況下不會致病,但在機體全身或局部抵抗力比較弱的時候,或者在其他外部因素的影響下,可能會出現感染。因此,咽拭子細菌培養能分離出致病菌,有助於對一些疾病的診斷,如白喉、新冠肺炎、急性咽喉炎。
現在全國各地的普通醫院都可進行新冠病毒的咽拭子檢測,價格不同,政策也不同,如果大家有需要,可以及時去當地的醫院問詢。親愛的讀者朋友們,你們明白了嗎?
『玖』 核酸檢測方法有哪些
核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。
口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,刷取咽喉部位上皮細胞的檢測。受檢測者只要放鬆心情,張口發出「啊——」的聲音就可以了,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。
檢測時可能會有惡心、想要嘔吐的不適感覺,不過這些不適症狀通常只需要半分鍾到兩分鍾左右就可以完全緩解了。鼻咽拭子采樣是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣。棉簽進入鼻腔的深度約為鼻尖到耳垂的距離。
(9)口咽式核酸檢測方法擴展閱讀:
核酸檢測相關知識:
核酸檢測是檢測病毒的方法,它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測,可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。
季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。
新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。
感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。
『拾』 現在核酸檢測都有什麼方法
通過呼吸道或口腔內的痰液做檢測