乳糖檢測方法

1. 如何測定乳粉中的乳糖和蔗糖含量試寫出試驗思路和流程

方法二 乳糖、蔗糖和總糖的測定（萊因-埃農氏法） 9 方法提要 乳糖：樣品經除去蛋白質以後，在加熱條件下，直接滴定已標定過的費林氏液，樣液中的乳糖將費林氏液中的二價銅 還原為氧化亞銅。以次甲基藍為指示劑，以終點稍過量時，乳糖將藍色的氧化型次甲基藍還原為無色的還原型次甲基 藍。根據樣液消耗的體積，計算乳糖含量。 蔗糖：樣品除去蛋白質後，其中蔗糖經鹽酸水解轉化為具有還原能力的葡萄糖和果糖，再按還原糖測定。將水解前後 轉化糖的差值乘以相應的系數即為蔗糖含量。 總糖：乳糖和蔗糖之和。 10 試劑 所有試劑，如未註明規格，均指分析純；所有實驗用水，如未註明其他要求，均指三級水。 10．1 費林氏液（甲液和乙液） 10．1．1 甲液：取34.639g硫酸銅，溶於水中，加入0.5mL濃硫酸，加水至500mL。 10．1．2 乙液：取173g酒石酸鉀鈉及50g氫氧化鈉溶解於水中，稀釋至500mL，靜置兩天後過濾。 10．2 次甲基藍溶液：10g/L。 10．3 鹽酸溶液：體積比1：1。 10．4 酚酞溶液：0.5g酚酞溶液於75mL體積分數為95%的乙醇中，並加入20mL水，然後再加入約0.1mol/L的氫氧化鈉 溶液，直到加入一滴立即變成粉紅色，再加入水定容至100mL。 10．5 氫氧化鈉溶液：c（NaOH）為300g/L。取300g氫氧化鈉，溶於1000mL水中。 10．6 乙酸鉛溶液：c（PbAc 2 ）為200g/L。取20g乙酸鉛，溶解於100mL水中。 10．7 草酸鉀-磷酸氫二鈉溶液：取草酸鉀3g，磷酸氫二鈉7g，溶解於100mL水中。 11 儀器 ：常用理化實驗室儀器。 12 操作步驟及結果計算 12．1 費林氏液的標定 12．1．1 用乳糖標定 12．1．1．1 稱取預先在92～94℃烘箱中乾燥2h，乳糖標樣約0.75g（准確至0.2mg），用水溶解並稀釋至250mL。將 此乳糖溶液注入一個50mL滴定管中，待滴定。 12．1．1．2 預滴定：取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）於250mL三角燒瓶中。再加入20mL蒸餾水，從滴定管中放出 15mL乳糖溶液於三角瓶中，置於電爐上加熱，使其在2min內沸騰，沸騰後關小火焰，保持沸騰狀態15s，加入3滴次甲 基藍溶液（10.2），繼續滴入乳糖溶液至藍色完全褪盡為止，讀取所用乳糖 的毫升數。 12．1．1．3 精確滴定：另取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）於250mL三角燒瓶中，再加入20mL蒸餾水，一次加入比 預備滴定量少0.5～1.0mL的乳糖溶液，置於電爐上，使其在2min內沸騰，沸騰後關小火焰，維持沸騰狀態2min，加入 3滴次甲基藍溶液，然後繼續滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待藍色完全褪盡即為終點。以此滴定量作為計算 的依據（在同時測定蔗糖時，此即為轉化前滴定量）。 12．1．1．4 按式（2）、（3）計算乳糖測定時，費林氏液的乳糖校正值（f 1 ）: V 1 ——滴定時消耗乳糖液量，mL； m 1 ——稱取乳糖的質量，g； AL 1 ——由乳糖液滴定毫升數查表1所得的乳糖數，mg。 表1 乳糖及轉化糖因數表（10mL費林氏液） 12．1．2 用蔗糖標定 12．1．2．1 稱取在105℃烘箱中乾燥2h的蔗糖約0.2g（准確到0.2mg），用50mL水溶解並洗入100mL容量瓶中，加水 10mL，再加入10mL鹽酸（10.3），置75℃水浴鍋中，時時搖動，在2min30s至2min45s之間，使瓶內溫度升至67℃。 自達到67℃後繼續在水浴中保持5min，於此時間內使其溫度升至69.5℃，取出，用冷水冷卻，當瓶內溫度冷卻至35℃ 時，加2滴甲基紅指示劑（10.4），用300g/L的氫氧化鈉（10.5）中和至呈中性。冷卻至20℃，用水稀釋至刻度，搖 勻。並在此溫度下保溫30min後再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL費林氏液所消耗的轉化糖量。 12．1．2．2 按式（4）、（5）計算蔗糖測定時，費林氏液的蔗糖校正值（f 2 ）： V 2 ——滴定時消耗蔗糖液量，mL； m 2 ——稱取蔗糖的質量，g； AL 2 ——由蔗糖液滴定毫升數查表1所得的轉化糖數，mg。 12．2 乳糖的測定 12．2．1 樣品處理 12．2．1．1 稱取2.5～3g樣品（准確至0.01g），用100mL水分數次溶解並洗入250mL容量瓶中。 12．2．1．2 加4mL乙酸鉛（10.6）、4mL草酸鉀-磷酸氫二鈉溶液，每次加入試劑時都要徐徐加入，並搖動容量瓶， 用水稀釋至刻度。靜止數分鍾，用乾燥濾過濾，棄去最初25mL濾液後，所得濾液作滴定用。 12．2．2 滴定 12．2．2．1 預滴定：將此濾液注入一個50mL滴定管中，待測定。取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）於250mL三角燒 瓶中，再加入20mL蒸餾水，置於電爐上加熱，使其在2min內沸騰，沸騰後關小火焰，保持沸騰狀態15s，加入3滴次甲 基藍（10.2），然後徐徐滴入乳糖溶液至藍色完全褪盡為止，讀取所用乳糖的毫升數。 12．2．2．2 精確滴定：另取10mL費林氏液（甲、乙各5mL）於250mL三角燒瓶中，再加入20mL蒸餾水，一次加入比預 備0.5～1.0mL的乳糖溶液，置於電爐上，使其在2min內沸騰，沸騰後關小火焰，維持沸騰狀態2min，加入3滴次甲基 藍溶液，然後一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待藍色完全褪盡即為終點。以此滴定量作為計算的依據（在同時測定蔗糖 時，此即為轉化後滴定量）。 12．2．3 乳糖含量的計算 式中：L——樣品中乳糖的質量分數，g/100g； F 1 ——由消耗樣液的毫升數查表1所得乳糖數，mg； f 1 ——費林氏液乳糖校正值； V 1 ——滴定消耗濾液量，mL； m——樣品的質量，g。 12．3 蔗糖的測定 12．3．1 轉化前轉化糖量的計算 利用測定乳糖時的滴定時，自表1中查出相對應的轉化糖量，按式（7）計算： 式中：F 2 ——由測定乳糖時消耗樣液的毫升數查表1所得乳糖數，mg； f 2 ——費林氏液蔗糖校正值； V 1 ——滴定消耗濾液量，mL； m——樣品的質量，g。 12．3．2 樣液的轉化及滴定 取50mL樣液於100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL的鹽酸（10.3），置75℃水浴鍋中，時時搖動，在2min30s至2min45s 之間，使瓶內溫度升至67℃。自達至67℃後繼續在水浴中保持5min，於此時間內使其溫度升至69.5℃，取出，用冷水 冷卻，當瓶內溫度冷卻至35℃時，加2滴酚酞溶液劑（10.4），用氫氧化鈉（10.5）中和至呈中性，冷卻至20℃，用 水稀釋至刻度，搖勻。並在此溫度下保溫30min後再按12.2.2滴定，得出滴定10mL費林氏液所消耗的轉化液量。 式中：F 3 ——由V2 2 1查得轉化糖數，mg； f 2 ——費林氏液蔗糖校正值； m——樣品的質量，g； V 1 ——滴定消耗轉化液量，mL。 12．3．3 蔗糖含量的計算 式中：L 1 ——轉化後轉化糖的質量分數，%； L 2 ——轉化前轉化糖的質量分數，%。 12．3．4 若樣品中乳糖與蔗糖之比超過3：1時，則計算乳糖時應在滴定量中加上表2中的校正值數後再查表1和計算。 12．3．5 總糖=蔗糖+乳糖 13 允許差 13．1 重復性 ：由同一分析人員在短時間間隔內測定的兩個結果之間的差值，不應超過結果平均值的1.5%。 13．2 重現性 ：由不同實驗室的兩個分析人員對同一樣品測得的兩個結果之差，不應超過結果平均值的2.5%。 表2 乳糖滴定量校正值數 方法三 蔗糖的測定——（酶比色法） 同GB/T 16286。

2. 乳糖不耐受有哪些檢測方法

為了避免不適當飲奶對健康造成的損害，最好在飲奶前檢查自己是否耐受乳糖，然後選擇不同類型的奶製品。
1．臨床診斷，醫生根據患者腹痛、腹脹、腹瀉等症狀，確定其是否耐受乳糖。2．在飲用牛奶後做「呼氫試驗」。3．在飲用牛奶後，測試尿液中半乳糖的濃度，這是目前國外最常用的一種方法，更為簡便、經濟、可靠。伊利在本次活動中選用的即為此種檢測方法。

3. 請問如何檢測「乳糖不耐受」

目前，檢測人體乳糖耐受能力的方法大致有三類：一是臨床診斷；二是飲用乳糖後做「呼氫試驗」，需用特殊儀器，如有吸煙史或蔗糖不耐受症，測試結果不準確；三是測試尿中半乳糖的濃度，在西歐、北美和日本較為普遍。我國基本採用臨床診斷法，造成許多隱性不耐受患者漏診，可靠性較差。 針對這一現狀，在全國小兒佝僂病防治科研協作組等的組織支持下，經過兩年多努力，北京金域高科診斷技術有限公司王加義副研究員率領的團隊經過數千次實驗，終於掌握了一種評價人體乳糖耐受能力、指導公眾科學飲奶的新技術——JY-Po-Color Gal尿半乳糖測定技術。 經權威機構查新檢索，這一技術屬國內首創。受試者只需收集飲用乳糖或牛奶後2至3小時間的5毫升尿液，十幾分鍾即可測試出乳糖耐受能力，可在家庭使用。

4. 請教乳清粉中乳糖含量測定的方法及注意事項

A可以試下這個： 乳清粉中乳糖的測定 1 儀器設備 磁力攪拌器、分析天平(感量0.000lg)、燒杯、容量瓶、具塞錐形瓶等。 2 主要試劑 0. lmol/L氫氧化鈉溶液，0.5mol/L鹽酸溶液，0.1N碘標准溶液，0.1N硫代硫酸鈉標准溶液，1%澱粉指示劑 3 操作方法 准確稱取乳清粉樣品1.5～2.0g (精確至0.000lg)放入150m1的燒杯中，加入100m1的蒸餾水，放置磁力攪拌器中攪拌10分鍾，讓其充分溶解。然後移人200m1容量瓶中，用蒸餾水洗2～3次，加水

5. 乳糖不耐受怎麼檢查

病情分析： 可以檢查的，你可以去醫院進行一下特定的檢查。 意見建議：目前，檢測人體乳糖耐受能力的方法大致有三類：一是臨床診斷；二是飲用乳糖後做「呼氫試驗」，需用特殊儀器，如有吸煙史或蔗糖不耐受症，測試結果不準確；三是測試尿中半乳糖的濃度，查小便，如果懷疑還是去查一下更放心一些。

6. 乳糖的微生物限度檢驗方法是什麼

濃度梯度的設置，生物量做縱坐標，乳糖濃度做橫坐標，進行檢測。

7. 如何測定牛奶中乳糖含量

牛奶中乳糖含量的測定方法有兩種，一是利用其還原性，另一種是利用其穩定性。日本推行的方法是Lane Eynon法，這種方法是還原銅鹽法。具體測定方法是：先配製斐林試劑A液（CuSO434.369克定容至500毫升水中）和斐林試劑B液（173克酒石酸鈉，50克NaOH定容至500毫升水中），然後取A、B液各5毫升混合，加水10毫升，另取5毫升牛奶溶於水定容至100毫升，再用斐林混合液在加熱條件下滴定，用甲藍GF作指示劑，根據終點，換算成乳糖含量。

8. 乳糖不耐受有哪些檢測方法 低乳糖牛奶能解決乳糖不耐受嗎

乳糖不耐受檢測方法：

為了避免不適當飲奶對健康造成的損害，專家建議：最好在飲奶前檢查自己是否耐受乳糖，然後選擇不同類型的奶製品，檢查的辦法分三類。

1．臨床診斷，醫生根據患者腹痛、腹脹、腹瀉等症狀，確定其是否耐受乳糖。這種方法的缺點是不能發現隱性乳糖不耐受者。

2．在飲用牛奶後做「呼氫試驗」。這種做法需要特殊儀器，如受試者有吸煙史或蔗糖不耐受症，測試結果會不準確。

3．在飲用牛奶後，測試尿液中半乳糖的濃度，這是目前國外最常用的一種方法，更為簡便、經濟、可靠。伊利在本次活動中選用的即為此種檢測方法。

低乳糖奶可以解決乳糖不耐受：

在牛奶加工過程中，加入安全的乳糖酶，像體內乳糖被正常消化一樣，乳糖被消化為葡萄糖和半乳糖。由於酶的消化，牛奶中的乳糖含量便下降，所以這樣的牛奶被稱作低乳糖牛奶。 由於低乳糖牛奶生產中，利用乳糖酶將乳糖消化成更利於吸收的葡萄糖和半乳糖，這類產品可以滿足正常消費者、乳糖不耐受者、乳糖酶缺乏者飲用牛奶、充分吸收牛奶營養的需要。 由於乳糖的甜度較乳糖酶消化後的產物---葡萄糖和低聚半乳糖合起來的甜度低，所以，仔細品嘗會發現，低乳糖牛奶甜度比正常牛奶略為甜一點。

9. 如何判斷自己的乳糖耐受程度

人體需要藉助乳糖酶的幫助才能分解乳糖，但很多人由於腸道內乳糖酶缺乏，無法將牛奶或是其他食物中的乳糖有效分解。沒能分解的乳糖就有可能在回腸末端、結腸被細菌所發酵，進而產氣，引起腹脹、排氣。（還記得《生活大爆炸》中的萊納德嗎？）

有時，乳糖還可以直接或間接使得腸道中內容物的滲透壓逐漸增高，從而出現滲透性腹瀉、腹痛等。這種乳糖酶缺乏的人喝了奶之後出現腹瀉、腹脹等一系列情況的症狀，就叫做乳糖不耐症。

也就是說如果你空腹喝了牛奶之後，有漲氣、放屁、腹瀉、腹痛，那就可能是乳糖不耐受。
如果不耐受程度比較輕，喝的太少可能反應不大，建議喝個一杯（200ml）左右，要是這樣都沒反映那日常生活中就基本上也不用特地注意了。

看網路牛奶乳糖耐受性上的介紹，醫院檢查中最常用的是尿液檢測
就是在飲用牛奶後，測試尿液中半乳糖的濃度，這是最常用的一種方法。

10. 牛奶乳糖耐受性的檢測方法

就是運用基因學和分子生物學技術，對不同個體的與牛奶中乳糖耐受性相關DNA片段進行遺傳信息解讀，因為我們知道分解消化乳糖需要人體內產生的一種叫LCT的乳糖酶，所以通過檢測LCT的DNA 有助於解釋他們是否適合喝牛奶或適合喝哪種類型的奶製品。這是目前國內外最先進的檢測手段。
DNA 樣本的採集
口腔粘膜採集：受測者在醫護人員幫助下用清水漱口，用無菌拭子適度用力的在口腔左右腮上下刮拭20次以上，將樣本保存放入採集袋中。此過程無痛無損傷，是非常方便快捷的取樣方式。
FTA血樣採集：醫護人員替病患消毒後採集相應部位的血液，此方法現在不是很常用了。
檢測方法：利用熒光PCR儀器，根據DNA列陣的微測序法、動態等位基因特異的雜交、寡聚核苷酸特異的連接、DNA晶元以及TaqMan系統 等。但不管哪一種方法，首先必須進行靶序列的擴增，然後才能進行其它檢測。