A. 測定氨基酸含量的方法有幾種
1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
B. 蛋白質中氨基酸的檢測方法
茚三酮法是比較粗糙的方法,如果你只是想知道含量,不測序,你有HPLC,為什麼不用HPLC,先過標准品,再測你樣品的水解產物,多方便。
C. 檢驗氨基酸用什麼方法
你若是問蛋白質,我可以直接告訴你又雙縮脲試劑(中學階段),但氨基酸的檢驗比蛋白質麻煩多了。 一、氨基酸的分離和檢測氨基酸的分離和檢測手段,以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。隨著高效液相色譜及填料的發展,HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優越性。但大多數氨基酸無紫外吸收和熒光發射特性,為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性,通常將氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法與柱後衍生法。HPLC與各種衍生相結合的氨基酸分析技術,構成了具有廣泛適用性的現代氨基酸分析技術。 二、鑒定是哪種氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸環境加熱) 紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色) (檢驗α-氨基) 2、坂口反應 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸 α-萘酚+鹼性次溴酸鈉 紅色 (檢驗胍基 精氨酸有此反應) 3、米隆反應(又稱米倫氏反應) HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應,未加熱則為白色) 4、Folin-Ciocalteau反應(酚試劑反應) 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應) 5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應) 6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應) 加入乙醛酸混合後徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)