大腸桿菌檢測方法分為三種:
1、細菌分離鑒定法
分離培養與鑒定:糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液先經肉湯增菌,然後轉種血瓊脂平板。其他標本同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。
37℃孵育18~24小時後,觀察菌落塗片染色鏡檢。腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要的時候檢定腸黴毒素。
2、衛生細菌學檢查法
大腸桿菌會不斷隨糞便排出體外,污染周圍環境水源、食品等。取樣檢查時,樣品中大腸桿菌越多,則表示樣品被糞便污染的越嚴重,表明樣品中存在腸道致病菌的可能性也就越大。
大腸菌數指數:指每立升中大腸菌群數,採用乳糖發酵法檢測。中國衛生標準是每1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群,瓶裝汽水和果汁中每100ml大腸菌群不能超過5個。
3、全自動微生物定量分析儀(TEMPO)檢測法
全自動微生物定量分析(TEMPO)儀大腸桿菌群計數檢測有TEMPOTC和TEMPOCC兩種方法。
TEMPOTC的開發是為獲得NF ISO4832標准相當性能水平。
TEMPOCC法是TEMPO儀器上根據BAM方法專門用於24h計數食品中大腸桿菌群方法。
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大腸桿菌在生物技術中的應用
這些菌株由於失去了細胞壁等重要組分,所以在自然條件下已無法生長。甚至普通的清潔劑都可以輕易地殺滅這類菌株。即便由於操作不慎導致活菌從實驗室流出,也不易導致生化危機。
生物工程用的菌株基因組都被優化過,使之帶有不同基因型(例如β半乳糖苷酶缺陷型),可以更好的用於分子克隆實驗。
真核基因在大腸桿菌中表達,必須有合適的表達載體(Vector),常用載體:pBV220,pET系統。
目的基因在大腸桿菌中表達的情況:
大腸桿菌更適合原核基因的表達,外源基因表達產量與單位體積產量是正相相關的,外源基因拷貝數和表達 產物產量之間存在動態平衡,單個細胞的產量又與外源基因拷貝數,基因表達效率,表達產物的穩定性和細胞代謝負荷等因素有關。
② 要檢查口腔是否感染白色念珠菌,具體做什麼檢測當天能出結果嗎
問題分析:
白色念珠菌是一種真菌,通常存在於正常人口腔,一般上呼吸道,腸道及陰道,在正常機體中數量少,不引起疾病,當機體免疫功能或一般防禦力下降或正常菌群相互制約作用失調,就會導致發病。
意見建議:
一般可以採取直接檢查法是臨床最常用檢驗方法,陽性檢出率較低,其優點是簡便,快捷。馬上就能夠檢查出,而革蘭染色法以及培養法陽性率較高,但是時間較長,當天不能查出。
③ 大腸桿菌的檢測方法
多管發酵法。
多管發酵法是一種檢測水體中大腸桿菌的傳統方法,這種方法是在44.5℃的含有熒光底物的培養基上連續培養24h,而後能產生分解熒光底物——葡萄糖醛酸酶,從而釋放出熒光產物,進而使培養基在紫外光照射下產生特徵熒光。此方法可被用來對原樣品中的菌落數作統計學估計。
在單料或雙料乳糖膽鹽發酵管內發酵,分離培養試驗,利用伊紅美藍培養皿分離,接著是在乳糖發酵管中進行二次發酵,最後通過芽孢染色、革蘭氏染色、顯微鏡觀察等來完成。多管發酵法對試驗條件要求不高,成本低,但是檢測時間較長,容易受其他條件干擾,進而影響到測定結果的精確度。
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注意事項:
1、檢樣時注意無菌操作。
2、稀釋時採用的稀釋液可以用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水,接種時可採用九管法,設置三個梯度,分別為0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一個稀釋度的試管應充分混勻。
3、每次實驗需要有陰性對照。
4、使用小倒管培養基配製時,為排凈氣泡,滅菌時不要把試管的蓋子蓋的太緊,滅菌後注意觀察一下倒管中的氣體是否排完全、
5、高壓滅菌後等高壓滅菌鍋的壓力表達到0,取出培養基放到冰箱冷卻,效果會比較好。
④ 幽門螺旋桿菌的檢測方法有哪些
首先推薦呼氣試驗
有碳13和碳14兩種
碳13價格約是碳14價格的兩倍多
碳14c尿素呼氣試驗是一種無創傷、快速檢測幽門螺旋桿菌方法。
測定結果為:
c14正常值為小於100
(dpm/mmol
co2)為陰性,大於100為陽性。
目前認為,幽門螺旋桿菌是引起消化性潰瘍與慢性胃炎的重要因素之一,也是引起潰瘍與胃病復發的重要因素。
建議在醫生指導下進行抗幽門螺旋桿菌治療
碳13和碳14都是採用同位素示蹤的原理,所不同的是13是穩定的同位素,14是放射性同位素
13在自然界中的含量遠遠小於14的.所以檢測費用高.碳-14膠囊放射性非常微弱.14是天然存在的放射性元素,一粒膠囊的碳-14的放射性約是一個成年人人體放射性的1/20.
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⑤ 怎樣檢查幽門螺桿菌
幽門螺旋桿菌它是一種很厲害的微生物,它是有一定的傳染性的,他寄生在人的胃中,對於幽門螺旋桿菌感染已經是一種很常見的細菌感染了,幽門螺桿旋菌和胃潰瘍、十二指腸潰瘍還有胃癌的產生都有著密切的聯系,那麼幽門螺旋桿菌該怎麼檢測呢?讓我們一起來看一下吧。
幽門螺旋桿菌的檢測方法主要有下面的這四個:
第一種是,血清的方式檢測,但是現在醫院都不經常在使用了,因為患者在治療之後,血中的幽菌抗體還是會存在一到二年的,可能還會有假陽性的。
第二種是,C13和C14的呼氣試驗,它是可以間接的檢測出幽菌抗原的,但是C14對人體和環境都有污染,吃過同位素之後在人體不會被衰退,不適合孕婦和兒童檢測。C13是C14的升級版,它去除了C14的污染,只是需要食用相對的C13的標記的底物,敏感性以及特異性比較高。
第三種,醫院還是會採用胃鏡以及胃粘膜來活檢,是一種侵入性的方式,有很多人都比較排斥這種方法。但是它的病理切片精確比較度高,化學反應的精確度就比較低了,還有小病灶的區域很容易漏檢的。是很多病人都比較排斥的,它的檢查費用比較高,不適合普遍檢查。
第四種,唾液檢測法間接檢出幽菌抗原,測定尿素酶的敏感性、特異性以及它的針對性強,這種方法簡單安全快速。而且還填補了檢測口腔幽門螺旋桿菌的空白,是很適合初查和復查的。
以上就是幽門螺旋桿菌檢測的四個方法,侵入性的方法可能會讓很多病人難以接受,非侵入性的方法會讓人容易接受,幽門螺旋桿菌最好的檢測方法就是C13和C14尿素呼吸試驗,這個方法是最簡單的也是最好的檢測方法。
⑥ 腸道致病菌的分類及常用檢測方法
根據可培養細菌的數量分類在腸道菌群中,可以培養到的細菌有400餘種,依據其數量多少可以分為主要(優勢)菌群(predominant microflora)和次要菌群(sub—dominant microflora)。
①主要(優勢)菌群:指腸道菌群中數量大或種群密集度大的細菌,一般在10~10cfu/g以上,包括類桿菌屬、優桿菌屬、雙歧桿菌屬、瘤胃球菌屬和梭菌屬等專性厭氧菌,通常屬於原籍菌群。優勢菌群是對宿主發揮生理功能的菌群,在很大程度上影響著整個菌群的功能,決定著菌群對宿主的生理病理意義。
②次要菌群:數量在10~10cfu/g以下,主要為需氧菌或兼性厭氧菌,如大腸桿菌和鏈球菌等,流動性大,有潛在致病性,大部分屬於外籍菌群或過路菌群。
檢測方法:
1、采樣及稀釋
(1)按無菌操作法將檢樣25g(或25mL)放於含有225mL無菌水的三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用無菌均質器,以8000~10000r/min的速度離心1min,做成1:10的稀釋液。
(2)用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1Ml,注入含有9mL無菌水的試管內,振搖混勻,做成1:100的稀釋液,換用1支lmL滅菌吸管,按上述操作依次作l0倍系列稀釋液。
(3)根據食品的衛生要求或對檢驗樣品污染情況的估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度接種3管。也可直接用樣品接種。
2、乳糖初發酵試驗
即通常所說的假定試驗。其目的在於檢查樣品中有無發酵乳糖產生氣體的細菌。將待檢樣品接種於乳糖膽鹽發酵管內,接種量在1mL以上者,用雙倍乳糖膽鹽發酵管。
lmL及1mL以下者,用單倍乳糖膽鹽發酵管。每一個稀釋度接種3管,置36±1℃溫箱內,培養24±2h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產氣者,則按下列程序進行。
3、分離培養
將產氣的發酵管分別劃線接種於伊紅美藍瓊脂平板,置36±1℃溫箱內培養18~24h,然後觀察菌落形態並作革蘭氏染色、鏡檢並作復發酵試驗。
4、乳糖復發酵試驗
即通常所說的證實試驗,其目的在於證明經乳糖初發酵試驗呈陽性反應的試管內分離到的革蘭陰性無芽胞桿菌,確能發酵乳糖產生氣體。
在上述選擇性EMB培養基上,挑取可疑的大腸菌群菌落1~2個進行革蘭染色,同時接種乳糖發酵管,置36±l℃溫箱內培養24±2小時,觀察產氣情況。
凡乳搪發酵管產氣,革蘭染色為陰性反應的無芽胞桿菌,即報告為大腸菌群陽性;凡乳糖發酵管不產氣或革蘭染色為陽性,則報告為大腸菌群陰性。
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有益菌菌群的生理功能:
如果腸內有益菌菌群占優,腸內黏膜呈現粉紅色,表示腸內環境相當良好。
1、吸收水分,糞便較軟,較易排泄
在胃部分解消化的食物,經由小腸吸收營養後,成為粘稠狀物體送至大腸。然後再經過18小時將水分及礦物質吸收,就變成容易排泄的糞便。腸道內環境良好時,糞便的軟硬適中,排便會較為順利。
2、緩和的蠕動,能順利將糞便排出
藉由腸的蠕動,將糞便緩慢的推送至肛門。如果蠕動過快或太慢,都將影響糞便的構成,導致便秘或者腹瀉。而如果腸內干凈,則蠕動的速度就相當的有規律,糞便可順利排出。
3、有助維他命的合成
比菲德氏菌等好菌能維護肌膚的健康,並具有合成有助熱量產生的維他命B1、B2及B6等,以及與止血、骨骼形成有關的維他命K等之功用。健康的腸道,好菌會不斷繁殖,維他命的合成也可順利進行。
4、迅速排出有害物質
健康的腸道並非完全沒有壞菌的存在,有害物質多少會產生。當然還包括,吃進體內的食品化學添加物或是無法成為營養成分的物質。只要腸內環境良好,這些物質在開始危害身體前就被排出體外。
5、避免病原菌的侵害
比菲德氏菌等好菌可以刺激並提高身體的免疫機能,而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特質,所以像是含有好菌的乳酸飲料或健康食品等,都可抑制病原菌在腸內繁殖。
腸道有益菌菌群除了以上功能之外,對人體還有營養作用,如糖尿病、高血壓、高血脂等。B族維生素和非必需氨基酸對人類的毛發具有重要的作用,當缺少這些營養元素,會導致頭發脫落或毛發發黃、發叉,容易折斷等現象。
⑦ 兒童口腔菌群怎麼檢查
健民口腔醫療機構專門檢查口腔環境的儀器,用於預測口腔是否是易患齲環境,從根本上預防
⑧ 咽拭子檢測的原理是什麼
正常人咽峽部培養應有口腔正常菌群,而無致病菌生長。咽部的細菌均來自外界,正常情況下不致病,但在機體全身或局部抵抗力下降和其他外部因素下可以出現感染等而導致疾病。因此,咽部拭子細菌培養能分離出致病菌,有助於白喉、化膿性扁桃體炎、急性咽喉炎等的診斷。
由於呼吸和食物都通過口腔,因此口腔中會有形形色色的細菌寄生。如卡它球菌、各種葡萄球菌、各種鏈球菌、類白喉桿菌、肺炎克雷伯菌及大腸桿菌等。另外還有厭氧菌,如消化球菌、擬桿菌及類酵母菌的存在。
流感是通過呼吸道傳播的,咽部是此類病毒聚集較多的地方。咽拭子標本就是用醫用的棉簽,從人體的咽部蘸取少量分泌物,採取的樣本就是咽拭子標本,為了檢驗呼吸道疾病病毒類型,往往通過咽拭子可以方便快捷准確地檢測出該病毒類型。
(8)檢測口腔菌群的檢測方法擴展閱讀:
標本採集步驟:
1、清晨先用淡鹽水(約1%)漱口後,方可采樣留取標本,這樣可以將口腔中雜菌清理掉,以便准確地查出上呼吸道及下呼吸道的感染細菌。
2、標簽貼於標本容器上,攜用物至病人床旁。解釋取咽拭子培養的目的和方法。
3、點燃酒精燈,囑病人張口發「啊」音,暴露咽喉,用培養管內的消毒長棉簽以靈敏而輕柔的動作擦拭兩側齶弓和咽、扁桃體上的分泌物。
4.取畢,將試管口在酒精燈火焰上消毒,然後將棉簽插入試管,塞緊。
5.及時送檢。接種於特製培養皿中培養。