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狂犬病抗體檢測方法

發布時間:2022-01-08 06:45:16

⑴ 注射狂犬病疫苗後怎麼知道抗體數量夠不夠

可以查一下抗體看看,小動物如狗,貓貓,老鼠,唾液中都含有病毒,如果出血了,很容易引起狂犬病毒感染,導致狂犬病,所以一定要注射狂犬疫苗的,按程序注射,不可半途中止,否則會影響免疫效果的,一定要在24小時內注射,祝健康

⑵ 狂犬病病毒抗體檢測如何實現

可電話咨詢下當地醫院,或通過114查尋

⑶ 請教你關於狂犬抗體檢測RFFIT的知識

1995年6月,法國巴斯德研究所狂犬病研究室前主任蔣安立(HerryTsiang)博士專程訪問本所,進行學術交流。雙方達成在狂犬病毒研究方面進行全面合作的意向。蔣安立博士最早明確提出在中國要解決狂犬病的防治問題,首先要解決的問題之一就是要建立狂犬病檢測中心
1996年2月,受蔣安立博士之邀,我室的嚴家新研究員去法國巴斯德研究院學習狂犬病毒抗原和抗體的檢測技術,帶回了蔣安立博士贈予的許多資料和實驗材料。
1996年3月,蔣安立博士再次專程訪問我所。此後十餘年裡,蔣安立博士每年都要訪問中國;其接班人Bourhy博士也多次訪問中國,與我所共同開展狂犬病毒的分子流行病學及相關診斷試劑的研究,協助我所建立符合WHO標準的狂犬病檢測中心,共同培養博士研究生,共同向歐共體等機構申請科研課題經費等。
該論文的結果再次證明RFFIT的重復性、特異性和靈敏度都不低於MNT(小鼠中和試驗),同時具有更加快速、價廉、簡便等優點,在大多數需要檢測RV中和抗體的情況下可取代MNT。
1998年10月,由PRA(中法先進研究計劃)支持、由蔣安立和Bourhy博士發起並組織的中法狂犬病診斷和控制培訓班成功地在中國CDC傳染病所(北京)舉辦(唐青主持)。我所的嚴家新和徐葛林參加了這次培訓班。
本室產品曾四次送到法國巴斯德研究所WHO狂犬病參考與合作中心試用,結果特異性和敏感性都優於國外同類產品。在國內數次全國性狂犬病研討會和學習班上,我們建立的方法和制備的試劑都獲得了好評,在與國外試劑的大量現場對比試驗中都證明效果相同或更好,而成本則大幅度降低。多年來,法國巴斯德研究所不僅大量購買我們生產的檢測試劑盒,還多次購買我們的單抗(原材料)用於相關研究。
我室制備的狂犬病毒檢測試劑先後出口到法國、突尼西亞、希臘、伊朗等國用於狂犬病實驗室診斷,據用戶反饋信息,我們的產品檢測靈敏度優於國外同類試劑。
(本工作得到法國巴斯德研究所WHO狂犬病參考與合作中心主任HerryTsiang博士的技術指導和法國巴斯德梅里厄血清疫苗公司(PMSV)的部分資助。)
在國內首先制備出抗狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)熒游標記抗體的基礎上,建立起檢測RV中和抗體的快速熒光灶抑制試驗(RFFIT)方法,經與小鼠中和試驗(MNT)比較,其重復性、特異性和靈敏度均無顯著差異。該方法在大多數需要檢測RV中和抗體的情況下可取代MNT。
狂犬病目前在中國和許多發展中國家仍是一個嚴重問題[1-3],因而迫切需要建立和推廣與狂犬病毒(RV)有關的各種快速、實用的檢測方法。WHO專家委員會肯定並推薦將小鼠中和試驗(MNT)和RFFIT作為檢測RV中和抗體的兩項基本方法[4],並建議在可能時盡量用RFFIT代替MNT,因前者更快速、價廉,且靈敏度與MNT相同。進行RFFIT需要有抗RV核蛋白(NP)熒游標記抗體。我們在國內首先試製成功此關鍵試劑[5]的基礎上,建立起微量RFFIT方法,並對該方法的重復性、特異性和靈敏度與MNT進行了比較。該方法有希望在狂犬病的臨床診斷、疫苗質量控制和流行病學調查等項工作中獲得廣泛應用。現將有關實驗的結果報告如下。
BHK21/BSR細胞,已適應該細胞系的RV攻擊病毒CVS株(ATCCVR959),以及已知中和滴度(IU/ml)的抗RV標准血清(批號I-1995-10-11)由法國巴斯德研究所HerryTsiang博士惠贈;接種RV疫苗(法國巴斯德梅里厄血清疫苗公司生產的VERORAB或本所生產的RV疫苗)前後的人血清由本室肖鼎昌醫生提供。
細胞培養基:D-MEM,GibcoBRL產品。Lab-Tak細胞培養載玻片,Nunc產品。Falcon96孔平底細胞培養板。Opton熒光顯微鏡。抗RVNP熒游標記抗體參考標准品為法國巴斯德Sanofi診斷用品公司產品(批號6E022U),本文中簡稱pNF;本室自製的相應產品,本文中簡稱mNF,見文獻[5];本文中未註明採用pNF的,均採用mNF。
組織培養RV的快速滴定按文獻[5-6],待測RV樣品經系列稀釋後感染BSR細胞,細胞質內的包涵體(主要成分為RV的NP)的熒光可在24小時(固定毒)或48小時(街毒)後檢測到。通常在低倍顯微鏡(160X)下檢查20個視野(用Lab-Tak載玻片時),或8個視野(微量法,用96孔細胞培養板時)。滴度用Reed&Muench方法計算,用熒光灶單位(FFU/ml)表示。進行RFFIT時攻擊病毒採用CVS株,病毒的最適攻擊劑量為經24小時溫育後能使80%的細胞感染(產生熒光包含體)的最高稀釋度。
將固定量的CVS病毒與系列稀釋的待測血清(包括已知滴度的參考血清)一起溫育(體外中和反應),然後加入敏感細胞(BSR)懸液。經24小時溫育後,細胞單層用丙酮固定,用熒游標記的抗NP抗體染色,以檢測未被中和的病毒的存在(熒光灶)。與病毒對照組比較,計算每種待測血清使固定量CVS病毒的FFU/ml減少50%的稀釋度,然後與已知滴度的參考血清比較,計算每種待測血清的中和抗體滴度。
將同一份CVS毒種分裝保存於一70℃,在半年時間內6次重復用mNF和pNF平行測定其滴度,所得的結果相當穩定,相互間也無差別(對於病毒稀釋度1103.5,t=0.445,P0.05;對於病毒稀釋度1104.2,
t=0.353,P0.05,見表1)。此CVS毒種經測定在小鼠中的毒力滴度為5.5LogLD50/ml(Sm=0.4LogLD50/ml),可用作毒力參考標准品以換算未知樣品在小鼠中的毒力滴度(根據未知RV樣品與此參考樣品在組織培養中用熒光灶單位(FFU/ml)表示的滴度的比值,可直接換算出其小鼠LD50滴度)。此CVS毒力參考品經24小時溫育後能使80%的BSR細胞感染的最高稀釋度為1160,此稀釋度即用作RFFIT的最適病毒攻擊劑量。
以法國巴斯德研究所提供的抗RV標准血清為參照,分別用RFFIT和MNT各4次重復測定參考血清A和B的中和滴度,結果見表2,這兩種方法檢測的結果間的差別均無顯著意義(對於樣品A,t=0 兒童棉鞋。444,P0.05;對於樣品B,t=0。768,P0.05,),即可認為兩種方法所得結果基本一致。
對接種RV疫苗前後的人血清樣品52份,分別用RFFIT(平行採用mNF和pNF)和MNT測定其RV中和滴度(僅測定樣品的中和效價是否大於0.5IU/ml)。在進行RFFIT測定時,採用mNF和pNF所得熒光抗體滴度之間的符合率(52/52)為100%,而RFFIT與MNT之間的符合率(51/52)則在98%以上,其中不相符的一份樣品MNT定為陰性,經RFFIT復測滴度稍大於臨界值(0.5IU/ml),為弱陽性(見表3);這也說明RFFIT的靈敏度可能略高於MNT。
同時用RFFIT和MNT對18份在不同時間採集自暴露後接種VERORAB疫苗者(編號37和45)或接種本所生產的RV疫苗者(編號121)血清樣品的RV中和抗體滴度進行檢測,結果用RFFIT和MNT測定同一份血清的滴度基本上是一致的,與相應的算術平均值相比較,絕大多數結果的變異范圍都在25%以內(見表4)。
本室制備的mNF成本低廉,效果穩定,在上述應用試驗中都與法國巴斯德Sanofi診斷用品公司相應產品pNF的特異性和敏感性完全相同,在法國巴斯德研究所WHO狂犬病參考與合作中心對這兩種試劑進行的對比試驗也得到相同結果(H.Tsiang,個人通訊)。
在應用抗NP熒游標記抗體的基礎上建立的RFFIT方法,其原理和所得結果與MNT有高度的一致性(它們所專一檢測的都是特異性地針對RV的保護性中和抗體),而且比MNT更加快速(實驗所需時間由14天降至2個工作日)、價廉,重復性更好,因此得到WHO的肯定和推薦[4],在國際上已成為最廣泛接受的對MNT的替代方法。
Fitzgerald等[8]曾進行3個實驗室的合作研究以比較MNT和RFFIT的重復性。在同一實驗室對同一樣品進行檢測,採用MNT所得結果的變異范圍為67%-149%,採用RFFIT的變異范圍為68%-146%。本文中分別用RFFIT和MNT各4次重復測定參考血清A和B的中和滴度,採用MNT所得結果的變異范圍對樣品A和B分別為81%-123%和78%-129%,採用RFFIT所得結果對樣品A和B的變異范圍分別為83%-120%和86%-116%。結果都證明RFFIT的重復性不低於MNT,而且這兩種方法檢測的結果間的差別均無顯著意義。
Zalan等[9]將RFFIT方法微量化,即用96孔細胞培養板代替價格昂貴的Lab-Tak細胞培養載玻片。其優點是可同時處理大量樣品,大大減少了試劑用量,而且觀察結果容易並能減少判定上的誤差。本文的結果也證明這種微量化方法優點更多,值得推廣。
綜上所述,本文的結果再次證明RFFIT的重復性、特異性和靈敏度都不低於MNT,同時具有更加快速、價廉、簡便等優點,在大多數需要檢測RV中和抗體的情況下RFFIT可代替MNT,有希望在我國狂犬病的防治和研究中獲得廣泛應用。
5.嚴家新,李承平,徐葛林,等.抗狂犬病毒核蛋白熒游標記抗體的制備和初步應用,《第四次全國生物製品學術會議論文匯編》,武漢,1997,P110。
8.FitzgeraldEA,CabassoVJ,SmithJS,etal.(human)bythemouseneutralizationtest(MNT)(RFFIT).JBiolStand,1979,7(1):67.
-(RV)nucleoprotein(NP),(RFFIT)itsreprocibilty,(MNT).ntofrabiesinChina.
免責聲明本文是作者在光明網衛生頻道原創專欄內容,其原創性以及文中陳述文字和內容未經本站證實,對本文以及其中全部或者部分內容、文字的真實性、完整性、及時性本站不作任何保證或承諾,請讀者僅作參考,並請自行核實相關內容。來源光明網衛生頻道)

⑷ 現在疾控中心一般用什麼方法檢測(狂犬疫苗抗體)

試劑盒

⑸ 怎樣檢測狂犬病

暈死~~~

你肯定不會有狂犬病了~還擔心什麼啊?

不過你想要知道有關的病原學檢查我還是可以告訴你的
1、抗原檢查
取病人的腦脊液或唾液直接塗片、角膜印片或咬傷部位皮膚組織通過免疫熒光法檢測抗原,陽性率可高達98%。此外還可使用快速狂犬病酶聯免疫吸附試驗檢測抗原。
2、病毒分離
取病人的唾液、腦脊液、皮膚或腦組織進行細胞培養或用乳小白鼠接種法分離病毒。
3、內基小體檢查
動物或死者的腦組織做切片染色、鏡檢找內基小體,陽性率70~80%
3、核酸測定
採用反轉錄-聚合酶鏈反應法測定狂犬病病毒RNA.

抗體檢查

存活一周以上者做血清中和試驗或補體結合試驗檢測抗體,效價上升者有診斷意義。此外,中和抗體還是評價疫苗免疫力的指標。國內多採用酶聯免疫吸附試驗檢測血清中特異性抗體,該抗體僅在疾病晚期出現。

⑹ 如何檢測狂犬病抗體

你好,一般情況下完全注射完5針後,超過2周就可以取檢測抗體,一般省市級的防疫部門,疾控中心等等就可以檢查的,一些大型綜合性醫院也可以檢測。

⑺ 關於檢測狂犬病毒抗體,過程是怎樣的

您好,根據衛生部《狂犬病防治工作規范》的22條規定:「使用合格的、正規途徑獲得的疫苗全程免疫後,一般情況下無需對免疫效果進行檢測。」狂苗在正常情況下的陽轉率是100%,無需檢測抗體的。如果被免疫者需要檢測,根據上述22條的規定必須使用中和抗體的檢測方法,包括RFFIT法和MNT法,這倆個方法不是什麼地方都可以開展的。現在有的醫療機構採用ELISA法試劑盒來檢測狂犬病毒抗體,雖然不是檢測中和抗體的方法,但是也可以選擇。
aware可自測不用抽血祝您健康天 貓!

⑻ 狂犬病的病毒和抗體檢測及治療方法

十 年 過 去 了

已 經 不 可 能 了

不 過 為 了 保 險

我 建 議 你 去 醫 院 再 打 次 疫 苗

⑼ 狂犬病抗體檢測

樓主:

狂犬病疫苗接種完成5針後,1個月抗體滴度達到高峰,其後下降,2個月後下降速度更快,起到6個月後抗體就下降到保護水平面以下,甚至不能檢測出來;
所以,2年時已經測不出抗體了;

大連市傳染病醫院和市CDC都能檢測抗體,而且比較准確。

祝你健康!

⑽ 關於狂犬疫苗的抗體檢測!

樓主:

不要太緊張了,放心吧,你不會發生狂犬病的了;

1、目前的狂犬病疫苗效果很好,只要按照程序接種完成5針以上的疫苗,抗體陽性率就能達到100%,也就是說能預防狂犬病,沒有必要非去做檢測;

2、目前的狂犬病抗體檢測和家用的試劑都不一樣,也就是說臨床上抗體的檢測准確度不是很好,也只能做參考;

3、如果抗體不高,可以繼續加強接種1-2針(間隔15天);

4、只要狂犬病疫苗接種完成後沒有發病,就不會發病了;你經檢測已經陽性(+),你可以絕對放心了,你描述的症狀也不是狂犬病症狀。

祝你健康!

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