Ⅰ 免疫學的檢測方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
Ⅱ 抗原抗體反應分為那四種類型各自有哪些常見的檢測方法
根據抗原和抗體性質的不同和反應條件的差別,抗原抗體反應表現為不同的形式.顆粒性抗原表現為凝集反應;可溶性抗原表現為沉澱反應;補體參與下細菌抗原表現為溶菌反應,紅細胞抗原表現為溶血反應;毒素抗原表現為中和反應等.
Ⅲ 抗原或抗體的體外檢測方法有哪些
抗原抗體檢測有凝集反映、沉澱反應、放免技術、熒光技術、酶聯免疫,化學發光、生物親和,固相免疫、免疫組化等技術
Ⅳ 可以用於進行hiv抗體檢測的有哪些
1、人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法)
雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)用於體外,肉眼觀察,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,用於幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本品僅用於無償獻血員現場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,需進行進一步篩查確認。
2、InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑
InstantCHEKTM-HIV1+2為一種快速、簡單、靈敏的檢驗方法,用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。

(4)抗體檢測哪種方法檢測抗體最常用擴展閱讀
HIV1/2抗體篩查方法包括ELISA法、化學發光法或免疫熒光試驗、快速檢測(斑點ELISA和斑點免疫膠體金或膠體硒快速試驗、明膠顆粒凝集試驗、免疫層析試驗)等,確證試驗常用的方法是免疫印跡法。
篩查試驗呈陰性反應可出具HIV1/2抗體陰性報告,見於未被HIV感染的個體,但處於窗口期的新近感染者篩查試驗也可呈陰性反應。
若呈陽性反應,應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,如兩種試劑復測均呈陰性反應,則為HIV抗體陰性;如有一種或兩種試劑呈陽性反應,需進行HIV抗體確證試驗。確證試驗無HIV特異性條帶產生,報告HIV1/2抗體陰性。
Ⅳ 抗體檢測最好選用什麼血
抗體檢測是在某些疾病中觀察療效及預後的一個指標。 抗體檢測的目的是協助臨床診斷。抗體檢測的方法有標記免疫測定、凝集試驗等。它在預防接種效果的觀察和傳染病流行病學調查中具有非常特殊的、重要的意義。
原理
在免疫應答中,細胞免疫和體液免疫是兩個密切相關、互為調節的生理過程,對這兩種免疫反應都有許多檢測方法,但迄今為止,在臨床檢驗工作中,以體液免疫反應中的特異性抗體的檢測應用最廣泛。
方法
現在抗體檢測的方法眾多,除傳統的沉澱反應,凝集試驗,補體結合試驗外,標記免疫測定(如酶聯免疫測定、放射免疫測定、熒光免疫測定、發光免疫測定等)已成為主要的免疫測定技術,免疫印跡法也發揮了明顯的作用,一些快速測定法(如快速斑點免疫結合試驗)也被廣泛使用。
臨床應用
首先抗體檢測用於診斷時,要考慮到患者所在地區該疾病的發病情況及與該疾病密切相關的情況,如正常人血清中抗體的水平,這一點在病原微生物感染的疾病中尤為重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病),往往採用「雙份血清法」,根據發病初期及患病後某個時期抗體增長的情況進行診斷。
Ⅵ 檢測抗核抗體最常用的技術是
正確答案:C
解析:間接免疫熒光技術常常作為檢測抗核抗體最常用的技術
。
Ⅶ 指出ELISA有哪幾種常用方法各種方法在操作上有什麼異同
也可用於測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯結。RF是一種自身抗體,即先包被與固相抗原相應的抗體,然後加入抗原。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。
假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇。
2;夾心復合物",血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去,以提高試驗的特異性.間接法測抗體
間接法是檢測抗體常用的方法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常採用本法。本法關鍵在於酶標抗原的制備,應根據抗原結構的不同。小分子激素,HBsAg有adr,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步檢測。
在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時。採用F(ab')或Fab片段作酶結合物的試劑,由於去除了Fc段。抗原中也不能含有與酶標抗人Ig反應的物質,例如來自人血漿或人體組織的抗原,如不將其中的Ig去除,測知標本中抗原的量,直接包被不易成功,可採用捕獲包被法、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用於包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。
3)加酶標抗抗體。可用酶標抗人Ig以檢測總抗體。
4.競爭法測抗體
當抗原材料中的干擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。特別應注意除去能與一般健康人血清發生反應的雜質,此時反應後顯色的吸光值(位於抗原過剩帶上)與標准曲線(位於抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,如按常法測讀,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質;(conjugate):
1)將特異性抗原與固相載體聯結,故稱為間接法。操作步驟如下,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF,它可充當抗原成份.Coli成份,很可能與受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發生反應。此法中受檢標本不需稀釋。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用於包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體,與結合在固相上的抗原反應。抗HBe的檢測一般採用此法。
5.競爭法測抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以採用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合,非特異IgG可直接吸附到固相載體上,應注意可測范圍的最高值,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成"。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質;(immunosorbent)、ayr,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體.雙抗原夾心法測抗體
反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。用於臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
1.雙抗體夾心法測抗原
雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,因為標准曲線到達高峰後呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時,反應甚至可不顯色而出現假陰性結果、adw,固相載體上只留下特異性抗體;(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物":(1)固相的抗菌素原或抗體,保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌後,在檢測過程中標本須先行稀釋(1。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗體抗體結合,從而間接地標記上酶。洗滌後,固相載體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關。
4)加底物顯色
本法主要用於對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
間接法成功的關鍵在於抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結果,可直接用於測定,這也是用單抗作夾心法應注意的問題。
雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子(RF)的干擾,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3) 加酶標抗體。另外如抗原中含有無關蛋白,也會因竟爭吸附而影響包被效果,然後再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題,已被列為這類試劑的一項考核指標。
間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的特異性IgG只佔總IgG中的一小部分。
3。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色、AFP。
雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原,尋找合適的標記方法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合,洗滌後再加入酶標抗體,試驗中也發生假陽性反應:40~1:200)。IgG的吸附性很強,即"免疫吸附劑",例如HBsAg,但應盡可能予以純化。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物,所得結果將低於實際的含量,這種現象被稱為鉤狀效應(hook effect)。標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應呈色淺於陰性反應,同時與固相抗體和酶標抗體結合,表現出假陽性反應,例如以E.Coli為工程酶的重組抗原,如其中含有E,從而消除RF的干擾。類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,最後的顯色也愈淺。競爭法測抗體有多種模式,因此其敏感度相對高於間接法;(3)酶反應的底物、ayw4個亞型,因其不能形成兩位點夾心,形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。
2)加稀釋的受檢血清、HBeAg,有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中,抗原包被後一般用無關蛋白質(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封閉(blocking)固相上的空餘間隙。另外,以避免過高的陰性本底影響結果的判斷,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2) 加受檢標本、葯物等ELISA測定多用此法。
6.捕獲包被法測抗體
IgM抗體的檢測用於傳染病的早期診斷中。間接法ELISA一般僅適用於檢測總抗體或IgG抗體。如用抗原包被的間接法直接測定IgM抗體,因標本中一般同時存在較高濃度的IgG抗體,後者將競爭結合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結合到固相上。因此如用抗人IgM作為二抗,間接測定IgM抗體,必須先將標本用A蛋白或抗IgG抗體處理,以除去IgG的干擾。在臨床檢驗中測定抗體IgM時多採用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相,以捕獲血清標本中的IgM(其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然後加入抗原,此抗原僅與特異性IgM相結合。繼而加酶標記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標本中的IgM成正相關。此法常用於病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒(HAV)抗體的檢測模式。
類風濕因子(RF)同樣能幹擾捕獲包被法測定IgM抗體,導致假陽性反應。因此中和IgG的間接法近來頗受青睞,用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。
7.ABS-ELISA法
ABS為親和素(avidin)生物素(biotin)系統(system)的略語。親和素是一種糖蛋白,分子量60000,每個分子由4個能和生物素結合的亞基組成。生物素為小分子化合物,分子量244。用化學方法製成的衍生物素-羥基琥珀醯亞胺酯可與蛋白質和糖等多種類型的大小分子形成生物素標記產物,標記方法頗為簡便。生物素與親和素的結合具有很強的特異性,其親和力較抗原抗體反應大得多,兩者一經結合就極為穩定。由於一個親和素可與4個生物素分子結合,因此如把ABS與ELISA法可分為酶標記親和素-生物素(LAB)法和橋聯親和素-生物素(ABC)法兩種類型。兩者均以生物素標記的抗體(或抗原)代替原ELISA系統中的酶標抗體(抗原)。在LAB中,固相生物素先與不標記的親和素反應,然後再加酶標記的生物素以進一步提高敏感度。在早期,親和素從蛋清中提取,這種卵親和素為鹼性糖蛋白,與聚苯乙烯載體的吸附性很強,用於ELISA中可使本底增高。從鏈黴菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點,在ELISA應用中有替代前者的趨勢。由於ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種試劑,增加了操作步驟,在臨床檢驗中ABS-ELISA應用不多。。其原理為利用酶標記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)以檢測與固相抗原結合的受檢抗體。在臨床檢驗中,此法適用於檢驗各種蛋白質等大分子抗原,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合,抗HBc ELISA一般採用此法,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性
Ⅷ 為什麼雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法
雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。那麼,為什麼雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法?
1、將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2、加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。 洗滌除去其他未結合物質。
3、加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合 的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4、 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。
Ⅸ 艾滋病抗體的檢查方法
艾滋病病毒抗體檢測
艾滋病病毒抗體檢測:檢測血液中的艾滋病病毒抗體是目前最常用的檢測艾滋病病毒感染的實驗室方法,一般要經過兩個步驟:首先做初篩試驗,如果為陽性,再做確認試驗,確認試驗陽性才可診斷為艾滋病病毒感染。
常用的方法有:
1病原檢測病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大,且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄-PCR)可用於臨床診斷。
2 抗體檢測血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍,可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
3 確證試劑篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot(WB),由於該法相對窗口期較長,靈敏度稍差,而且成本高昂,因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高,WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相對簡單,整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果,而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准,但不作為血液合格的標准。
4篩檢試驗篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查,因此要求操作簡便,成本低廉,而且靈敏、特異。目前世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA,還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性,操作簡單,僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用,特別適合於試驗室大規模篩檢使用。顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便,成本低廉的檢測方法,該方法結果可通過肉眼判定,靈敏度很高,特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用,缺點是必須使用新鮮樣品,特異性較差。80年代後期發展起來的斑點印跡檢測(Dot-blot assay)是一種快速ELISA(Rapid ELISA)方法,這種方法操作極為簡便,過程短暫,整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束,但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。金免疫測定是以膠體金為標記物,以硝酸纖維素膜為載體的固相免疫測定,分為滲濾和層析兩種形式。用於HIV抗體檢體金試紙條屬於金免疫層析,且大多數為間接法及雙抗原夾心法,兩種方法各有優缺點,但都簡單而快速,數分鍾即可得出結論,不需儀器設備,操作人員不需特殊訓練,試劑穩定,適用於單份測定等。

Ⅹ 各種新冠病毒的檢測方式,哪種最為准確
各種新冠病毒的檢測方式,肛拭子是最准確的。
新冠病毒的主要檢測方式
新冠病毒出現之後,醫院很快就推出了檢測的方式,而其中全球使用最多的檢測方式主要有三種。其中有兩種是主流的檢測方式,那就是鼻拭子或者咽拭子。主要是通過把一個長長的棉簽深入到呼吸道之中,然後取樣進行檢測。因為新冠病毒在呼吸道停留的時間是比較久的,檢測到樣品的機會就更大,檢測結果也就比較准確。

新冠病毒檢測的注意事項
在做新冠病毒檢測的時候,很多人會頻繁的清理喉嚨,或者嚼口香糖,希望保持口腔的清潔,但是這完全沒有必要,頻繁的吞咽反而會讓新冠病毒停留時間變短,存在檢測不到病毒的可能性。因此在做新冠病毒的檢測之前,最好不要喝水、不要清嗓子、不要抽煙、不要嚼口香糖,佩戴好口罩,等待進行檢測即可。檢測的過程是非常快速的,一般幾秒鍾就可以完成,所以不要對於長棉簽有太大的恐懼感,不然反而會耽誤檢測的進度。