蘇木檢測方法

Ⅰ 檢測細胞增殖的方法有哪些

一、MTT比色：
MTT比色是一種目前被廣泛採用的檢測細胞生長和存活的方法，其原理是外源性MTT（四唑鹽）可被活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶還原成難溶的藍紫色結晶物並沉澱在細胞中，而死細胞無此功能，DMSO（二甲基亞碸）能溶解細胞中的紫色結晶物，用酶聯檢測儀在490nm波長處檢測其光密度值，可間接反映活細胞數量。在一定范圍內，MTT結晶物形成的量與細胞數成正比，此方法已廣泛用於檢測細胞活力、觀察細胞生長等方面，具有靈敏度高、重復性好、操作簡便、經濟、快速、易自動化、無放射性污染等特點，與細胞計數有良好的相關性。
二、rdU標記法
1．細胞以1.5×105/ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中（內放置一蓋玻片），培養1天，用含0.4％ FCS培養液同步化3天，使絕大多數細胞處於G0期。
2．終止細胞培養前，加入BrdU（終濃度為30μg/L），37℃，孵育40min。
3．棄培養液，玻片用PBS洗滌3次。
4．甲醇/醋酸固定10min。
5．經固定的玻片空氣乾燥，0.3％H2O2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6．5％正常兔血清封閉。
7．甲醯胺100℃，5min變性核酸。
8．冰浴冷卻後PBS洗滌，加1抗即抗小鼠BrdU單抗（工作濃度1：50），陰性對照加PBS或血清。
9．按ABC法進行檢測，蘇木素或伊紅襯染，在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及BrdU陽性細胞數，計算標記指數（LI）。
三、結晶紫法
1．體外細胞培養結束後，去培養液，加入11％的戊二醛固定，置於振盪器上搖20min。
2．固定細胞用去離子水洗滌至戊二醛液洗凈。
3．置空氣或烘箱37℃徹底乾燥。
4．加入0.1％的結晶紫液對細胞染色，振搖30min。
5．用蒸餾水洗滌，至多餘的結晶紫液沖洗干凈。
6．置空氣或37℃烘箱中徹底乾燥。
7．加入10％的乙酸對細胞吸收的結晶紫進行提取。
8．1h後在酶標儀上測定光吸收度，波長595nm。
四、酸性磷酸酶法
1．96孔細胞培養板中培養細胞，去培養液。用0.01mol/L PBS洗滌1次（如為懸浮細胞則用離心洗滌）。
2．去洗滌液後加入磷酸酶底物100μl/孔。
3．37℃，孵育1～4h。
4．加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。
5．在多孔酶標儀上405nm處測光吸收度，將細胞培養板其中不含細胞，同樣處理過的一孔作為空白對照，所測的每孔光吸收度可間接反應每孔中的細胞數。如在同樣條件下作一細胞數的系列標准對照，以細胞數為X軸，光吸收度為Y軸，可作直線回歸，可推算出每孔中的細胞。

Ⅱ 免疫組織化學sp法和pv法的區別

一·第二代聚合酶兩步法（ PV，En Vision)
PV－9000是2001年投入美國市場的，它是將二抗抗體分子的單價Fab段與酶聚合在一起，與一抗結合後，直接用底物進行顯色的方法。此方法由於簡單、快速、敏感性強且避免了內源性生物素所造成的背景染色，以有逐漸取代其他免疫酶組織化學檢測方法的趨勢。
PV法操作流程
1石蠟切片脫蠟至PBS。
2 0.3％H2O2甲醇液或3％H2O2室溫孵育20min。
3 抗原修復。
4滴加適當稀釋的一抗370C 60min或40C過夜。
5 PBS洗滌。
6 酶標記二抗370C 30min或室溫60min。
7 DAB(0.04%)顯色（鏡檢控制），水洗、復染、封片

二·sp法是一抗＋生物素化二抗＋HRP標記的鏈霉卵白素（HRP標記的親和素）
一般的sp法步驟啊,具體如下：
1.烤片，68℃，20分鍾,
2. 常規二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水；二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min
3.阻斷 滅活內源性過氧化物酶：3%H2O2 37℃孵育10min，PBS沖洗3X5min；
4. 抗原修復:置0.01M枸櫞酸緩沖液（PH 6.0）中用煮沸（95℃，15－20min），自然冷卻20min 以上，再用冷水沖洗缸子，加快冷卻至室溫，PBS沖洗3X5min。
5. 正常羊血清工作液封閉，37℃10 min，傾去勿洗.
6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育過夜，PBS沖洗3X5min（用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照）；
滴加生物素標記二抗, 37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
7. 滴加辣根過氧化物酶標記的鏈黴素卵白素工作液，37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
8. DAB/ H2O2反應染色，自來水充分沖洗後，
蘇木素復染，常規脫水，透明，乾燥，封片。

三·檢測試劑盒
靈敏度高而極易控制背景的檢測系統試劑盒是最為理想也是免疫組化染色優劣的關鍵，根據免疫組化技術發展至今PV系列及SP試劑盒更優於其它試劑盒。檢測系統應與一抗來源相匹配，否則檢不出目的物。如一抗是鼠單或多抗的，二抗就應該是羊或兔抗鼠的。

四·建議選SP，亦可根據實驗室習慣及在組織中的表達情況來定

Ⅲ 中葯質量檢測新技術有那些

（一）性狀鑒別

性狀鑒別，就是人們對葯材的形、色、味、大小、質地、斷面等特徵，採用眼看、手摸、鼻聞、口嘗、水試、火試等簡單的物理、化學反應，直接感觀葯材，作出符合客觀實際的結論，區分葯材真、偽、優、劣的方法。它具有簡單、易行、迅速的特點。這個方法，是幾千年勞動人民同疾病作斗爭中總結出來的寶貴經驗。

各類葯材的性狀雖然有一定的共同點。但是，各種葯材由於來源不同，組織結構也有差異，所含化學成分也不一樣。因此，在性狀上就各有一定的特異點，葯材鑒別工作也是首先採用性狀鑒別這個方法，通常照中國葯典或地方葯品標准及有關中葯書籍中所描述的性狀特徵，就能比較正確地鑒定葯材。

性狀鑒別，通常從以下方面進行：

1、形狀：一種葯材的外形特徵，一般是較為固定的。如圓柱形、紡錘形、雞爪形、拳形、圓塊狀等。對有些品種老葯工使用很形象的語言來表述葯材外形的特徵。如海馬稱為：「馬頭、蛇尾、瓦楞身」。野山參為「馬牙蘆、燈草芯、棗核艼、鐵絲紋、落肩膀、細結皮、少數腿、珍珠尾」。蘄蛇為「翹鼻頭、方勝紋、連珠斑、佛指甲。」防風為「蚯蚓頭」。川貝稱為「懷中抱月」等。又如以馬兜鈴狀如馬脖子上下垂的鈴鐺。馬鞭草穗狀如花序細長，形如馬鞭。木鱉子扁平圓板狀，形如鱉。瓦楞子如同房上瓦片（射放肋），鳳尾草孢子葉片一回羽狀復葉，下部羽片2-3分叉，羽片和小羽片呈長條形，狀如鳳尾。佛手果實具3-5個手指狀的裂瓣。冬蟲夏草蟲體似蠶，頭部子座細長圓柱形等。

在觀察性狀時，除少數鮮葯材如生薑、地黃、石斛、蘆根、薄荷等外，性狀的觀察應是乾燥葯材。易破碎葯材如全草、葉類、花類等性狀以完整的葯材為主。

2、大小：葯材的大小（指長短、粗細、厚薄），一般有一定的幅度。如測量大小與規定有差異時，應測量較多的樣品，可允許有少量高於或低於的數值。

（1）選擇有代表性和大多數的常見的葯材進行測量，特大、特小的可以不概括。

（2）大小一般用厘米(cm)表示，細小的用毫米(mm)表示。

（3）一般習慣測量時，根、莖、果實稱作長、直徑。鱗莖稱作高、直徑。皮稱作長、寬、厚。種子稱作長、寬或直徑。

葯材的大小除了表明特定的長短、薄厚、粗細外，主要表現在中葯材這個特殊商品的質量、規格、等級的劃分上。例如：

甘草：大草：長25-50cm，頂端直徑2.5-4。

條草：一等：長25-50cm，頂端直徑1.5以上。

二等：長25-50cm，頂端直徑1cm以上。

三等：長25-50cm，頂端直徑0.7cm以上。

草節：一等：長6cm以上，頂端直徑1.5cm 以上。

二等：長6cm以上，頂端直徑0.7以上。

杜仲：一等：70-80cm，寬50cm，厚0.7以上。

二等：長70-80cm，寬40cm，厚0.5cm以上。

三等：長寬大小不分，厚在0.3cm以上。

四等：長寬大小不分，厚在0.29cm以下。

3、色澤：是指葯材表面的顏色和光亮程度。商品葯材的色澤一般是固定的，色澤的變化與葯材的質量關系很大，可以反映出葯材的真偽和質量的好壞。如葯材品種不同，加工條件變化，貯藏時間長短或加工不當等就會改變葯材的固有色澤，也表示葯材質量的降低。

在觀察顏色時，葯材應是乾燥品，不要在有色光下進行，最好在白天的自然光線下或日光燈下進行。對於顏色的描述，以質量好的在前，如枸杞子呈鮮紅色或暗紅色，表明鮮紅色的枸杞子為佳；以色淺的在前，如牛黃表面呈金黃色或棕黃色等；如果是用兩種色調復合的描述，以色強的和後一種顏色為主，如黃棕色，即以棕色為主，如阿膠呈棕黑或烏黑色等。關於顏色的描述舉例如下：

紅：硃砂：鮮紅色或暗紅色，有光澤。

紅花：紅黃色或紅色。

丹參：棕紅色或暗紅色。

紫：紫蘇葉：兩面紫色或上表面綠色，下表面紫色。

紫草：表面紫紅色或紫褐色。

紫石英：紫色或綠色。

黑：黑胡椒：表面黑褐色。

黑芝麻：表面黑色。

墨旱蓮；表面墨綠色。

烏梅：表面烏黑色或棕黑色。

黃：川黃連：表麵灰黃色或黃褐色，皮部橙紅色，木部鮮黃色。

川黃柏：外表面黃褐色或黃棕色，內表面暗黃色。

姜黃：表面深黃色。

白：白芷：斷面白色或灰白色。

白蘚皮：外表麵灰白色，內表面類白色。

白芨：表麵灰白色或黃白色。

山葯：表面黃白色，斷面白色。

褐：赭石：表面暗棕紅色或灰黑色。

藍：青黛：深藍色。

雜色：五花龍骨：淡灰白色，淡黃白色或淡黃棕色，夾有藍灰色及紅棕色深淺不同的花紋。對光澤的描述，一般採用形象比喻的方法。如石膏：絹絲光澤。自然銅：金屬光澤。大青鹽：玻璃樣光澤。珍珠：彩光閃耀。元胡：具蠟樣光澤。花蕊石：具閃星狀亮光。青礞石：斷面可見閃光星點。金礞石：帶有閃爍的金黃色光澤。雄黃：斷面具樹脂樣光澤，晶面有金剛石樣光澤。

4、表面：是指葯材外表面或內表面的具體特徵。葯材的表面特徵是不一樣的，如光滑、粗糙、皮孔、皺紋等。單子葉植物根莖及球莖節上的膜質鱗葉，根痕。蕨類植物的鱗片、毛等。這些特徵的有無和程度，常是鑒別葯材的主要特徵之一。如枇杷葉的毛，蒼耳子的刺，黃連的鱗葉，黃柏的栓皮，厚朴的皮孔，烏海的皺紋紋理，王不留的雕紋，蘇子的網紋，大黃、首烏的綿紋、星點，天麻的鸚哥嘴（紅色芽）、圓臍疤、點狀環，白芷具有突起的皮孔和疙瘩狀根痕。

5、質地：指葯材的軟硬、堅韌、疏鬆、輕重、粘性或粉性等特徵，常用的術語很多。松泡：表示質輕而松，如南沙參（泡參），泡而松。燈芯草，松花粉質輕。粉性：表示含大量的澱粉，如山葯、天花粉。粘性：表示具粘液質，如鮮石斛，折斷面顯粘性，干時，則嚼之顯粘性，天冬柔潤具粘性。柔潤：表示柔軟而潤澤，如當歸、玉竹。油潤：具有油性，如柏子仁等。角質：表示含多量澱粉因加工糊化，如半透明，如鬱金、天麻等。堅韌：表示質堅韌不易折斷，如絲瓜絡、桑白皮。其他如質重的硃砂，十黃九糠的大黃，糟皮粉茬的丹皮，心枯朽的黃芩等。

6、斷面：指葯材折斷面所具有的特徵，如自然折斷面，破碎面，橫斷面等。觀察折斷時的現象，如有無粉末飛揚、響聲、折斷的難易等。折斷面的平坦、粗糙、顆粒性、纖維性、膠絲以及層層剝離等情況。此法主要用於皮類，長條狀的根及根莖類，藤、枝類葯材的鑒別。

用刀橫切（或削）成平面，觀察皮、木兩部的比例、色澤、射線與維管束的排列形式。如菊花心（黃芪），車輪紋（粉防己）和棕色小點（油室或油細胞）等特徵。以下舉幾個例子如：九節菖蒲：斷面白色粉性，可見淡黃色小點（維管束）6-9個排列成環。大黃：斷面淡紅棕色或黃棕色，根莖髓部寬廣，顆粒狀，有星點環列或散在，根木部發達，具放射狀紋理。天麻：斷面平坦，黃白色至淡棕色，角質樣。元胡：斷面黃色，角質樣，有蠟樣光澤。木賊：斷面中空，周圍有多數圓形小空腔，排列成環。珍珠：破碎面現層紋。牛黃：斷面色淺，可見密細膩的同心層紋。首烏：斷面紅棕色，皮部有4-11個類圓形的異型維管束環列。

7、味：是中葯鑒別採用最早方法之一，從古至今，把嘗味當作中葯鑒別的重要手段之一。葯材的味，與葯材的成分、質量關系很大。有些葯材的味是衡量品質的標准之一，如烏海、木瓜、山楂以味酸為好。葯材的味與其所含成分及含量有密切的關系。葯材的味一變，就要考慮其品種與質量的優劣等問題。每一種中葯都有它的味的特性，例如：

淡：石膏

酸：烏梅、山楂、木瓜

甘：龍眼肉、黨參、桂圓肉

麻：細辛

辛、辣：乾薑

刺喉：半夏、南星

咸：大青鹽

苦：龍膽、鴉膽子、黃連、穿心蓮

五味：五味子

澀：五倍子

苦澀：大黃

苦而回甜：牛黃、熊膽

吸舌：龍骨、竹黃

粘性：黃精、玉竹、茯苓

涼：薄荷、冰片

砂礫感：大黃、地楓

在嘗葯材時，應注意下列問題。

（1）取樣要有代表性。因為葯材的各部分味道可能不同，例如：果實的果皮與種子，樹皮的外側與內側，根的皮部和木部等。

（2）取具有代表性的樣品，放在口裡嚼至少一分鍾，才能准確的嘗出味來。因為舌尖部只對甜味敏感，而對苦味敏感的是接近舌根部分，咀嚼一分鍾後，再使舌頭的各部分接觸到葯液，這樣才能准確的嘗到葯味。

（3）對具有強烈的刺激性和毒性葯，口嘗時要特別小心，取樣不能太多，嘗後一定要吐出來，並用水嗽口，洗手，以免中毒，如草烏、白附子、狼毒、半夏等。

8、水試：利用某些葯材在水中的比重和特殊變化，作為鑒別特徵之一。例如，西紅花用水泡後，水變金黃色，花不退色。蘇木投入熱水中，呈鮮艷的桃紅色透明溶液，加酸（或醋）則溶液變為黃色，加鹼（或石灰水）溶液則變紅色。熊膽粉末投入清水杯中，可逐漸溶解而盤旋，有黃線下垂至杯底，且不擴散。小通草（旌節花科），南天仙子（爵床科）遇水顯粘性。蟾酥遇水後呈乳白色。

9、火試：有些藤木類，樹脂類和動物類葯材用火燒之，能產生特殊的氣味、顏色、煙霧、響聲等現象，而用以鑒別葯材，如降香微有香氣，點燃則香氣濃烈，燃時有油流出，燒完留有白灰。血竭放在錫紙上，下面用火烤，熔化後色鮮紅如血而透明，無殘渣。麝香少許，用火燒時有輕微爆響聲，起油點如珠，但無臭氣，灰為白色。海金沙易點燃而發爆鳴聲及閃光，松花粉及蒲黃無此現象。大青鹽置火焰上燃燒，火焰呈亮黃色（N+a）馬勃置火焰上輕輕抖動，可見火星飛揚，熄後發生大量白煙。青黛微火灼燒有紫紅色煙霧發生等，均可鑒別。

10、氣：有些葯材有特殊的香氣或臭氣，是由於中葯材中含有揮發性物質的緣故。有的葯材的氣，本來就不很強烈，在空氣中暴露時間久了，就更不容易聞出來，這時可將葯材弄碎了再聞。或者放在有蓋的杯子里，用熱水泡一下再聞。有的葯材的氣是十分特殊的，成為鑒別時的主要依據之一。

例如：

無：珍珠、石膏
微：山葯
清香：大黃、牛黃、熊膽、冰片
香芳香：八角茴香、蜂蜜
香烈：肉桂、砂仁、麝香
臭：九香蟲、紫草、蕪荑、蜘蛛香

特殊有：
羊膻氣：白蘚皮、羊紅膻
焦糖氣：黃精
腥：紫河車
蒜臭：薤白
苯甲醛臭：丹皮
硫臭氣：硫黃
黨參臭：桔梗科葯材
雞屎臭：雞矢藤
樟腦臭：關木通（粗皮摩擦）
打嚏：蟾酥、豬牙皂

11、其它：如牛黃的掛甲，麝香用槽針檢查有冒槽現象，手捏成團等

Ⅳ hematoxylin and eosin是什麼意思

hematoxylin and eosin
網路釋義

蘇木精和伊紅

（3） 壁細胞：大多分布在胃腺的上半部，其中有很多粒腺體，在蘇木精和伊紅
（hematoxylin and eosin）的制劑染色之下，會呈現明亮的嗜伊紅性 （eosinophilia）。

伊紅

四、檢測指標及方法（一）病理學檢查
右上葉肺組織常規石蠟包埋、切片，蘇木紅-伊紅（hematoxylin and eosin）染色。光鏡下觀察肺組織病理學變化。

染色

四常規染色技術HE染色 （Hematoxylin and
Eosin） 1.蘇木素的化學性質 天然蘇木素是從蘇木的樹心中提取出來的變色物， 為淺黃色或褐色結晶，只有氧化為蘇木紅後分子 中才有發色團...

蘇木精一伊紅染色

中國婦產科在線
【專業、權威的婦產科網路交流平台】-研究實踐-盆腔器官脫垂盆底組織的雌激素受體變化研究患者取陰道後壁深層肛提肌組織lOOmg,並於手術治療前1天取血清標本。
1.3檢測方法 所有組織標本均進行蘇木精一伊紅染色（hematoxylin and
eosin,H-E），以鏈黴菌抗生物素蛋白一過氧化物酶連結法 （streptavidin.perosidase,S

短語

hematoxylin and eosin stain 伊紅染色

Ⅳ Br檢測細胞周期結果如何用Flow J分析

你要先在FSC和SSC散點圖上gate出細胞，然後SSC-W和SSC-Hgate出單細胞，然後在用BrdU/PI 散點圖打開才能開的比較清楚的圖。

Ⅵ 如何檢測蛋白的蘇木素化

方法一：western blot and strip 通過WB檢測所有發生泛素化的蛋白條帶，拍照後，將膜strip。然後與特定蛋白的抗體和特定泛素化位點的抗體反應，顯色拍照。通過陽性條帶的對比來初步判斷某一特定蛋白的特定位點發生了泛素化 方法二：western blot and immunoprecipitations 通過免疫共沉澱方法...

Ⅶ 蘇木鄉到中牟縣需不需要核酸檢測現在走高速需不需要核酸檢測報告

從蘇木鄉到中牟縣，是不需要核酸檢測報告的，現在走高速，也不需要檢測報告，只要你有健康碼的綠碼和行程碼就可以。

Ⅷ 糖尿病患者的血糖檢測方法及注意事項有哪些

醫學上的空腹是指禁食8小時以上。要求化驗前一天晚8點後不再進食任何食物，直到第二天早上5：00-8：00之間的時間段為空腹時段，也就是早晨8點前應到醫院采血。因影響血糖的因素比較多，特別是飲食，正常人進食晚餐後血糖會顯著增高，餐後2小時可恢復到正常范圍。夜間依靠內生胰島素維持血糖在正常水平。糖尿病患者因胰島素絕對或相對缺乏，晚餐後血糖升高的過程可維持6-8小時，此後逐漸恢復到原來空腹的水平。當空腹時間超過8小時後，血糖大多開始下降，無法真實反映實際的空腹血糖水平。也有極少數人在空腹時間超過8小時後血糖輕微上升，這是因為影響血糖的因素除了飲食，還有情緒、運動等。因此，只有按照時間要求檢測空腹血糖，才能得到准確的數據。
如何做到檢測結果的准確性，需要注意以下幾點：
1、測空腹血糖的前一天不要過分節食甚至不吃晚餐，雖然空腹時間超過12小時可能使測定的血糖值低一些，但並不能反映真實的空腹血糖水平。
2、禁食時間內盡量不要大量喝水，如口渴可少量飲用白開水，但不可多飲。喝水過多可使血液稀釋而干擾血糖的檢測結果。
3、糖尿病患者檢查空腹血糖前晚降糖葯須照常服用，檢查當日須在抽血後服葯。
4、測空腹血糖前要保證充足的睡眠，避免情緒激動、過於劇烈的活動等，這些因素都可能導致血糖升高。
5、當糖尿病患者空腹血糖升高時，需鑒別以下情況，並採取不同處理措施：血糖未控制好，整個夜間均處於高血糖狀態；半夜產生低血糖致血糖反跳引起空腹血糖升高(稱蘇木傑效應)：在血糖控制良好的基礎上，凌晨4-5點鍾由於生長激素分泌增多導致血糖上升(稱黎明現象)。
6、若測定空腹血糖有困難，可選擇糖化血紅蛋白檢測，因糖化血紅蛋白不受時間、進食、活動和情緒等因素影響，可避免飢餓影響糖尿病篩查和檢測結果，並能反映近3個月血糖平均水平。
空腹血糖是衡量胰島功能的重要指標，是診斷糖尿病的標准之一。空腹血糖還可反映糖尿病患者前晚所用葯物對整個夜間乃至清晨血糖的控制情況。總之，無論體檢時，還是糖尿病患者的日常復診，都應做到禁食8小時後的早8點前進行血糖測定，以此得到准確的空腹血糖數據。

Ⅸ 黎明現象跟蘇木傑有什麼區別

主要區別是，性質不同、主要症狀不同、主要原因不同，具體如下：

一、性質不同

1、黎明現象

是指在夜間血糖控制尚可且平穩，即無低血糖的情況下，於黎明時分（清晨3～9時）引起的一種清晨高血糖狀態。

2、蘇木傑現象

是指夜間（午夜1～3時）低血糖，早餐前高血糖的現象。

二、主要症狀不同

1、黎明現象

主要症狀：乏力，飢餓，出汗，心悸。

2、蘇木傑現象

主要症狀：夜間血糖低，晨起感覺頭痛、惡心。

三、主要原因不同

1、黎明現象

由各種激素間不平衡分泌所引起的。

2、蘇木傑現象

主要是由於口服降糖葯或胰島素使用過量而導致夜間低血糖反應後，機體為了自身保護，血糖出現反跳性升高。