alk基因的檢測方法

『壹』 ALK基因檢測有哪些方法

ALK基因的檢測方法有很多種。包括檢測DNA層面的FISH（熒光原位雜交），RNA層面的RT-PCR，以及檢測蛋白的免疫組化方法。這幾種方法都已通過許多臨床試驗驗證。另外，近些年還有高通量基因測序的方法可以對包括EGFR,ALK,KRAS,ROS1等在內的一組基因同時檢測的方法，這類方法目前還沒有獲得相應臨床試驗認證，仍舊處於研發階段，對於結果需要謹慎解讀。

『貳』 怎麼檢測ALK陽性非小細胞肺癌

根據肺癌組織的癌細胞病理特徵分:非小細胞肺癌（NSCLC）約佔85%,小細胞肺癌（SCLC）：約佔15%。對於晚期非小細胞肺癌，推薦所有腺癌或含腺癌成分的非小細胞肺癌患者，在診斷時常規進行ALK融合基因或ALK融合蛋白檢測。 對於小活檢標本或者不吸煙的鱗狀細胞癌患者也建議進行ALK檢測。 2009年Shaw等將ALK基因重排陽性的肺癌列為非小細胞肺癌的一個特定分子亞型。 ALK融合型非小細胞肺癌不僅是基因序列層面的改變，ALK融合蛋白也是該類疾病中重要變異，因此將此類疾病統稱為「ALK陽性非小細胞肺癌」 。ALK陽性非小細胞肺癌，是一類驅動基因明確的肺癌類型。這一類型的非小細胞肺癌，對於新型靶向葯物--ALK抑制劑高度敏感。 中國非小細胞肺癌中ALK陽性率為3-11%,每年新發病例數約35000例。 對於基因突變陽性的ALK陽性非小細胞肺癌，靶向治療無疑成為他們更好的治療選擇。

『叄』 alk是什麼意思

根據肺癌組織的癌細胞病理特徵分:非小細胞肺癌（NSCLC）約佔85%,小細胞肺癌（SCLC）：約佔15%。

對於晚期非小細胞肺癌，推薦所有腺癌或含腺癌成分的非小細胞肺癌患者，在診斷時常規進行ALK融合基因或ALK融合蛋白檢測。 對於小活檢標本或者不吸煙的鱗狀細胞癌患者也建議進行ALK基因檢測。

ALK融合基因的產物是分子量為80 kD的融合腫瘤蛋白，其轉化細胞的能力已得到公認。P80NPM-ALK通過使大鼠纖維母細胞發生錨非依賴性（anchorage independent）生長，增殖率明顯增高。

它還可使Ba/F3細胞轉變為IL3非依賴性。通過逆轉錄病毒將NPM-ALK轉染小鼠骨髓細胞，這些小鼠隨之發生了T細胞和B細胞性大細胞淋巴瘤。

非小細胞肺癌中唯一驅動突變：

其中一組研究人員開發了逆轉錄病毒cDNA表達庫用於篩選新癌基因。他們轉染了提取自一位預先篩選顯示KRAS和EGFR突變陰性的62歲日本男性吸煙者肺腺癌的cDNA文庫，並設計生成了轉基因小鼠，在肺泡細胞中特異性表達EML4-ALK，由此生成了許多肺腺癌結節。

使用ALK抑制劑治療這些轉基因小鼠導致腫瘤負荷相比於未治療的小鼠減小。大部分小鼠很快在1個月內死亡。使用相同ALK抑制劑治療導致肺臟無EML4-ALK/3T3細胞浸潤且生存期延長。此研究有力證實了EML4-ALK是非小細胞肺癌中唯一的驅動突變。

以上內容參考：網路-alk

『肆』 我能通過什麼方法ALK基因檢測

目前，在國內很多大型綜合性醫院和專科醫院，已經能開展肺癌驅動基因的檢測，這為ALK陽性肺癌患者找到更適合的「最佳」治療方案奠定了基礎。

『伍』 哪些肺癌需要接受ALK融合基因檢測

各種條件允許的話，建議是所有肺鱗癌、肺腺癌的患者都做基因檢測。首先最應該檢測的是EGFR基因，其突變陽性的概率在我國非小細胞肺癌人中約佔30%以上，等於1/3的病人一線就適合吃TKI葯物。患者等待基因檢測可能需要較長的時間（一周至兩周），並且部分醫院該部分是醫保的，尤其需要強調的是這個等待是值得的，因為這個結果對下一步治療至關重要。此外，還應該檢測EML4-ALK融合基因，如果這個細胞發生融合基因表達陽性的話，另有靶向葯物治療，就是大眾尚不熟悉的克唑替尼，但是發生率在我國加起來不過10%，我們優先做EGFR基因檢測，再做EML4-ALK檢測。
而不同基因檢測的方法，所需要的時間也不盡相同。以檢測ALK基因為例，採用Ventana IHC這種免疫組化方法大約1—2天就可以出結果；採用FISH（熒光原位雜交）時大概需要3—4天出結果；採用PCR（聚合酶鏈反應）這種比較復雜的分子生物學檢測方法，則大約需要5—7個工作日出結果（國際上要求兩周之內出基因檢測結果）。

『陸』 最全梳理ALK基因突變和對應的靶向葯物

間變性淋巴瘤激酶（ALK）突變的形式有過量表達、與其他基因形成融合基因，發生點突變等等。ALK基因融合突變是非小細胞肺癌（NSCLC）常見的一種驅動基因，中國非小細胞肺腺癌中ALK融合突變陽性的比例為5.3%，在非小細胞肺腺癌、年輕患者（小於60歲）以及不吸煙的人群中發生率較高，ALK陽性的非小細胞肺癌被認為是一種分子亞型，相對應的靶向葯物與EGFR分子亞型完全不同。

ALK融合基因突變主要在肺腺癌里常見，一般肺鱗癌患者ALK融合基因突變概率很低，有報道說1400個肺鱗癌患者里ALK融合基因的發生率為1.3%。考慮到ALK總體突變頻率僅有5%，所以對於鱗癌患者也是可以做一下ALK檢測的。由於非小細胞肺癌里的驅動基因突變一般是互相排斥的，或者說一山不容二虎，癌細胞也沒有必要搞兩個驅動突變。有研究說亞裔的EGFR、KRAS野生型的腺癌患者，ALK陽性比例高達30%-42%，因此如果發現EGFR和KRAS是野生型，是更有必要測下ALK基因的。

一、ALK融合突變的檢測

圖5：L1198F導致的勞拉替尼耐葯對克唑替尼重新復敏

這是一個非常有意思的發現，即勞拉替尼這個葯物也不是最後的一張牌，這個葯物耐葯了，也許之前被放棄的葯物仍可以有效。所以也有說法ALK是一種鑽石突變。但需要謹慎的是不是每一個勞拉替尼耐葯的患者都這樣。我們從圖示看出患者同時存在C1156Y和L1198F突變，才造成了這種逆轉。也許其他的突變位點如L1196M等和L1198F就沒有這種協同效果。或者還有可能勞拉替尼耐葯的原因是其他的旁路激活，如KRAS或EGFR等，具體的還是可以根據基因檢測結果來謹慎分析和對待，不過現在的測序技術抽血測ctDNA檢測ALK的這些激酶突變總可能會有陰性，ArmsPCR等檢測方法也還沒有相應的產品，暫時只能盡量地取耐葯後的新發組織樣本，進行二代測序檢測。

編者：翱宇

參考文獻：

1、馮勤楊欣林冬梅，ALK陽性非小細胞肺癌的診斷，中國肺癌雜志2 0 1 5年2月第1 8卷第2期。

2、蔣濤周彩存，中國肺癌雜志2015年2月第1 8卷第2期

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7、Ther Adv Med Oncol. 2016Jan;8(1)：32-47

8、Shaw AT et al, N Engl J Med. 2016 Jan7;374(1):54-61

『柒』 ALK基因檢驗的qPCR的ALK融合基因檢測手段效果怎麼樣

同FISH和ventana免疫組化一樣，是獲得CFDA批準的ALK檢測方法之一。~~

『捌』 ALK基因檢測是怎樣通過分子診斷來完成的

ALK基因檢測鑒於分子診斷指導臨床治療決策的重要性，需要多學科的策略來獲取、保存、處理腫瘤組織，用以滿足各水平的分子檢測。這些檢測包括DNA序列或拷貝數分析、基於RNA的基因表達或序列變異分析、基於組織切片的熒光原位雜交（FISH）/顯色原位雜交（CISH）/免疫組織化學檢測等。在中國獲批的三種方法是 Ventana IHC/ RT-PCR/FISH.

『玖』 ALK基因檢測是什麼

摘要 ALK基因變異是非小細胞肺癌的一種分子亞型，該亞型的人群特徵多發於年輕，肺腺癌，非吸煙人群。ALK基因檢測是一種對ALK基因是否正常的一種診斷方法。

『拾』 目前為止世界范圍之內基因檢測測序最安全最便捷最准確的方式有哪些

如果是想用靶向葯物的話，檢測EGFR突變。Arms法檢測EGFR基因更加准確，所需的標本量少，但檢測費用比較貴。如果有突變，廣州市醫保可以申請「吉非替尼「的特定門診，獲批準的話，自付3300就可以長期服葯，5個月後可以申請贈葯。厄洛替尼的廣州市醫保申請不需要有基因突變，獲批的話，自付4500左右，4個月後可以申請贈葯。廣州市醫保承認的基因檢測醫院有廣東省人民醫院、中山大學附屬第一醫院、中山大學附屬腫瘤醫院。如果你不是廣州市的。可以去你所在省份的首府的最大的腫瘤醫院或綜合醫院的胸外科、腫瘤科、化療科或呼吸內科咨詢。另外用PCR方法檢測ALK基因，是另外一種靶向葯物。如果檢測出T790M突變，就是另外一種靶向葯物了。