『壹』 核酸檢測是怎樣檢測的
眾所周知,新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是一種烈性呼吸道傳染病,其病原體為新型冠狀病毒。若想證實已出現的感染症狀是由本病毒所引起,最准確的方法是從患者體內分離出活病毒,並進行病毒培養。
然而,此方法並不適合大面積應用,在此次疑似病例的確診工作中,也並不適用。這是因為病毒培養所需時間較長,需要的場所條件也很高(P3級實驗室),時效性遠遠跟不上臨床需要。
而核酸檢測作為病原學的檢測手段之一,效率很高,一般情況下幾個小時就可以知道結果。因此,在此次疫情中,臨床上取得病原學證據的主要方式並不是病毒培養,而是核酸檢測。
核酸是遺傳信息載體,是對DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的統稱。病毒則主要由遺傳物質和蛋白質組成。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒,其遺傳物質是單鏈RNA。核酸檢測的原理,正是檢測在被測者的咽拭子等樣本中,是否存在病毒的RNA。如果存在,說明被病毒感染。那麼,我們是否已經獲悉了病毒的RNA呢?
△RNA與DNA(圖片來源網路)
在武漢疫情初期,中國疾病預防控制中心應用宏基因組學技術,在短時間內完成該病毒的鑒定,並獲取了全基因組序列。在病毒全基因組序列公布後,實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)試劑被快速研發。
隨後,核酸檢測試劑盒被應用於臨床,並為確診新冠肺炎提供病原學證據。那麼,應用試劑盒進行核酸檢測,究竟是怎樣的一個過程呢?
首先,檢測人員需要在試劑的幫助下,將樣本中的核酸提取出來。再把已經分離出來的核酸加到核酸擴增試劑中,然後將其放到核酸擴增儀內,一般兩個小時內就會有結果。
事實上,在操作步驟中,擴增是很重要的一環。擴增的意義在於能讓微量的遺傳信息成指數增加。只要樣本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,從而更清晰地與病毒全基因組序列實現比對。
實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法已在臨床實驗室應用多年,檢測體系成熟,具有特異性強、靈敏度高、檢測周期短和可定量檢測的優點,而且還能對病毒感染程度和治療效果進行動態監測。
中日友好醫院呼吸與危重症醫學科主任醫師陳欣在記者采訪中介紹道:核酸檢測十分敏感,只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸,就可以通過RT-PCR擴增的方式,整合成序列。
"雖然不確定核酸是否來自於活病毒,但對於有呼吸道感染症狀的患者或疑似患者來說,如果其咽拭子有這種核酸,一般認為來源於活病毒的一部分,間接證實其體內存在著病毒的繁殖和感染。" 陳欣告訴記者。
核酸檢測容易出現"假陰性"
雖然核酸檢測有靈敏度高、檢測周期短等優點,但也存在著一定的弊端。不同於從人體內直接分離出活病毒的方式,核酸檢測採用的是一種間接的方式,有可能造成假陰性。
因為試劑盒存在最低檢測限的問題,所以只有當採到的樣本中,病毒的含量達到一定程度時才能檢測出來。少數情況下,可能康復者並未康復,但由於樣本中病毒載量低,故康復者核酸檢測的結果呈陰性,也就是我們常說的"假陰性"。
因此,在《新型冠狀病毒肺炎診療標准(試行第七版)》中,出院標准之一為連續兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性(釆樣時間至少間隔24小時)。
而之所以選取呼吸道標本進行核酸檢測,是因為新冠肺炎屬於呼吸道傳染病,故而優先考慮從呼吸道的分泌物中取得標本。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;後者主要包括氣管、主支氣管及肺內各級支氣管。
相應地,現在對疑似患者檢測病毒核酸,標本的採集一般有兩大類,上呼吸道標本和下呼吸道標本。
上呼吸道標本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(NPS)、鼻咽吸取物(NPA);下呼吸道標本主要包括痰液、氣管吸取物、支氣管肺泡灌洗液(BALF)等。
『貳』 新冠核酸檢測增加肛拭子采樣,是否能更加有效的檢測出病毒
新冠核酸檢測增加肛拭子采樣,的確能更加有效的檢測出病毒,一部分感染者糞便或肛拭子核酸陽性的持續時間比上呼吸道持續時間更長,對於重點人群可以選擇肛拭子采樣。
如果已經被集中隔離觀察了,或者有發熱或其他不適,消化道有不適表現,是入境人員和感染者密切接觸人員就需要更加全面的檢測,加上咽拭子,鼻拭子,還會使用到肛拭子檢測,能更加的准確,更好的減少漏網之魚。肛拭子和鼻咽拭子就是一樣的了,本人或者家屬可以在12小時或24小時內拿到結果。 目前各地的疫情形勢仍然嚴峻,疫情還處於緊張的階段,希望大家能主動接受采樣和篩查,有序排隊參加檢測配合醫護人員工作,堅決打贏這場疫情防控阻擊戰,迎接春天的到來。
『叄』 現在核酸檢測都有什麼方法
通過呼吸道或口腔內的痰液做檢測
『肆』 做核酸檢測的正確方法
5月11日,武漢市新冠肺炎疫情防控指揮部涉疫大數據與流行病學調查組印發緊急通知,決定以10天為期,在武漢市范圍內開展全員新冠病毒核酸篩查。而在全國各地也有一些朋友好奇,核酸檢測到底檢測哪個部位?鼻咽拭子和口咽拭子有何不同?做核酸檢測時有哪些注意事項?
首都醫科大學附屬北京地壇醫院感染中核酸檢測標本可以採集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子統稱為咽拭子,經口的為口咽拭子,經鼻的就是鼻咽拭子。
口咽拭子
鼻咽拭子
做核酸檢測時,我們需要注意什麼呢?
在做核酸檢測前2小時盡量避免進食,以免引起嘔吐;
采樣前30分鍾不應吸煙、喝酒、咀嚼口香糖等;
檢測者需要正確佩戴口罩,檢測前取下口罩,檢測後立即戴好,可准備一個備用口罩,污染後方便及時更換;
在採集鼻咽拭子前檢測者應告知採集人員是否鼻中隔彎曲及鼻腔手術史,過程中可能出現鼻部酸癢感,刺激打噴嚏,可立即用紙巾或手肘遮擋;
鼻咽拭子採集後可能出現少量鼻腔出血,一般不需要特殊處理,如出血量較多請及時到醫院進行處理;
在採集口咽拭子時檢測者頭後仰,張口發出「啊」音,有助於暴露咽喉,但過程中會出現刺激性乾咳、惡心、嘔吐等症狀,檢測者可配合採集人員盡量放鬆、深呼吸;
核酸檢測前後都需要注意手部衛生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭雙手。
血清抗體檢測不受飲食影響 無需空腹
一般感染新冠病毒7-10天後,人體會產生針對病毒的特異性抗體。最先出現的是IgM抗體,隨後會出現IgG抗體,所以檢測這些特異性抗體,可以判斷人體是否感染過病毒,而檢測方法就是血清抗體檢測。
血清抗體需要抽取檢測者2-4mL的靜脈血液進行檢測,檢測結果不受飲食和葯物影響,因此檢測前不需要空腹。
為落實好新冠肺炎疫情常態化防控,全國各地陸續公布「核酸檢測機構名單」,推動重點人群「應檢盡檢」、其他人群「願檢盡檢」。目前國家衛生健康委推出「核酸檢測機構查詢」服務,在國務院客戶端上線,目前已有北京、天津、河北、遼寧、黑龍江、上海、江蘇、安徽、福建、山東、河南、湖北、湖南、廣東、廣西、海南、四川、貴州、雲南、寧夏、新疆生產建設兵團上傳的1226家檢測機構。
『伍』 核酸檢測的方式都有什麼
核酸檢測主要有酸檢測試劑、抗體檢測兩種方法,第一種方法通常是通過咽拭子進行PCR檢測,基因擴增,然後再進行核酸檢測。 而抗體檢測是選擇抽血,抽血的方法得出結果看,觀察其抗體滴度是否升高,這種情況常常是指在抽血前常出現不能產生抗體的情況。
核酸檢測是一種「進行時」檢測,通過聚合酶鏈反應等方法檢測病毒基因組中特定的核酸序列,從而判斷被檢測者此刻是否感染了病毒。
與核酸檢測不同,新冠病毒抗體檢測顯示的是哪些人曾經被感染。抗體檢測又被稱為血清學檢測,目的是檢測血液樣本中的抗體。人體感染病毒後,會產生IgM或IgG抗體。
被感染初期,人體會迅速產生IgM抗體,以抗感染;相比之下,產生IgG抗體的速度更慢,但IgG抗體保留時間更長。抗體檢測就是檢測血清中是否有這些特異性抗體,以確定被測試者是否曾被感染。
(5)當前核酸檢測方法准確性擴展閱讀:
六種人不宜做核酸檢測
一、釆樣前30分鍾,對於有吸煙、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸檢測,以免影響檢測的准確度。
二、進食太飽的人不宜做核酸檢測,否則容易發生惡心嘔吐,影響採用結果的准確性。
三、核酸檢測前有口服抗病毒和抗感染的葯物的,應推遲做核酸檢測,避免影響檢測結果。
四、若是進行鼻拭子采樣的話,對於鼻咽部有病症的急性期,如出血、水腫等人群可以暫不予檢測。
五、剛進行核酸檢測時出現惡心嘔吐的人,應暫緩做核酸檢測,需等檢測者緩解後再予以進行。
六、被采樣者用手或其他物品觸及拭子采樣冠、棉簽的前端的不宜進行,否則容易造成污染,影響檢測結果,需更換進行重做。
『陸』 怎麼才能提高核酸檢測的准確度呢
提高核酸檢測的准確度在做檢測前1-2個小時不要進食防止嘔吐,也不要飲酒、吸煙、咳痰等,防止改變口腔內的菌群,造成檢測結果的不準確。
南京市第一醫院感染性疾病科護士長王娟說,「假陰性」可能是當時沒有檢測到病毒片段,也可能是當時確實未感染病毒,不能代表檢測結果不準確。「所以我們醫院從疫情初始,就一直做鼻咽拭子,相較口咽拭子的准確度更高一點。」王娟解釋,這是鼻咽部的構造決定的,一些分泌物在鼻腔後壁會有一個彎曲,這里容易殘留更多分泌物。
建鄴區沙洲社區衛生服務中心院長潘琴也告訴記者,在社區醫院,正是出於這種考慮,目前也在培訓檢測人員鼻咽拭子采樣方法。「我自己實際體驗了一下,確實鼻子會有酸酸的感覺,眼淚會不自主地流下來。但為了更好地進行檢測,還是呼籲大家多多配合。」
(6)當前核酸檢測方法准確性擴展閱讀
核酸檢測結果不一定要去醫院取:
不一定。對於政府組織的機構的核酸檢測,其結果由政府及時向檢測對象公布,居民自己到醫院檢測的,可直接到該院的官網或微信公眾號查詢,或者微信搜索「國務院客戶端」小程序,選擇「便民服務」中「核酸檢測證明」後,輸入姓名及身份證號,就可以快速查詢7日內的檢測結果。也可以通過支付寶中的健康碼查詢。
江蘇省人民醫院護士長侯樂提醒:一般早晨9點前采樣的當天16點左右即可拿到檢測結果,下午采樣的第二天獲得檢測結果,請大家根據自己需求合理安排時間。當前正值春運期間,核酸檢測需求增多,請大家有序排隊,做好個人防護。
『柒』 核酸檢測需要注意什麼怎樣能保證准確率
在做核酸檢測的過程當中,為了保證它的准確率,首先我們應該注意的是檢測之前兩小時盡量不要進食也不要喝飲料,將自己的嗓子清好,在檢測的過程當中記得張口發出啊的聲音,而且還要准備好自己的身份證件。
在去年春節的時候,我國就因為新冠疫情而各個領域都放緩了腳步,隨之而來的就是大面積的核酸檢測,因為只有核酸檢測才能夠發現哪些人患有新冠肺炎,這也是目前最為准確的一種方式,在新冠疫情防控的過程當中發揮了至關重要的作用,如果沒有核酸檢測根本就不知道疫情的分布,現在我國已經將疫情控製得非常好,但是仍然有一些中高風險地區的人們需要做核酸檢測,目前核酸檢測一共有三種,分別是捅鼻子、捅喉嚨、還有一種是肛門拭子,這三種方法當中捅喉嚨的方式准確率比較大,肛門試紙也是最近新出來的一種。
我們應當積極的配合工作人員的核酸檢測,不求為疫情作出貢獻,也不要給他們添麻煩。
『捌』 抗原檢測與核酸檢測有哪些區別這兩款產品的准確率如何
核酸檢測由於對設備及採集人員的要求較高,因此准確率比抗原檢測更有效。但抗原檢測有比核酸檢測更快的初步檢驗結果,適用於多人群的大規模基礎診斷。
由於核酸檢測對於病毒的感染性以及結果都有較為准確地預判和估計,因此現在我國在許多人群的篩查上都會使用核酸檢測作為評估結果。但隨著防控局勢的逐步嚴峻,抗原檢測也可以作為一種補充的檢測方法。雖然抗原檢測的准確率不高,但在大規模人群的初步篩選上,有非常好的表現和作用。
一:核酸檢測由於對設備以及採集人員的要求較高,因此檢測結果更加有效。
由於核酸檢測具有早期診斷、靈敏度和特異性高等突出特點,是目前確診新冠肺炎的重要標准之一,核酸檢測使用的是實時熒光定量RT-PCR技術。這種技術對於目前新冠病毒的初期發現和判斷有很好的作用和幫助。但缺點是高靈敏度的RT-PCR儀價格不菲,對相關實驗室的潔凈度和操作人員要求也較高,且檢測時間較長,一個檢測通常會需要4-6個小時才有結果。
『玖』 各種新冠病毒的檢測方式,哪種最為准確
各種新冠病毒的檢測方式,肛拭子是最准確的。
新冠病毒的主要檢測方式新冠病毒出現之後,醫院很快就推出了檢測的方式,而其中全球使用最多的檢測方式主要有三種。其中有兩種是主流的檢測方式,那就是鼻拭子或者咽拭子。主要是通過把一個長長的棉簽深入到呼吸道之中,然後取樣進行檢測。因為新冠病毒在呼吸道停留的時間是比較久的,檢測到樣品的機會就更大,檢測結果也就比較准確。
新冠病毒檢測的注意事項在做新冠病毒檢測的時候,很多人會頻繁的清理喉嚨,或者嚼口香糖,希望保持口腔的清潔,但是這完全沒有必要,頻繁的吞咽反而會讓新冠病毒停留時間變短,存在檢測不到病毒的可能性。因此在做新冠病毒的檢測之前,最好不要喝水、不要清嗓子、不要抽煙、不要嚼口香糖,佩戴好口罩,等待進行檢測即可。檢測的過程是非常快速的,一般幾秒鍾就可以完成,所以不要對於長棉簽有太大的恐懼感,不然反而會耽誤檢測的進度。
『拾』 核酸檢驗方法
核酸檢測具體流程如下:
1. 核酸提取
使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動化儀器等商品化試劑或設備並按說明書操作。提取RNA時應注意防止RNA降解。DNA應置於-20℃保存,RNA和需長期保存的DNA應置於-80℃保存。
2. 逆轉錄合成cDNA
逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。
3. PCR擴增反應(使用二次擴增的套式PCR擴增方法)
PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶等)、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板(DNA或cDNA)。在擴增儀中,按照設定的程序進行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。
4. 擴增產物定性分析
擴增產物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法,與分子量標准比較,判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內。其它擴增產物分析方法還有限制性內切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動化核酸擴增儀使用酶聯比色分析或熒光探針雜交等原理測定。
5.結果判定和完成報告單
(1)實驗成立的條件:每一次檢測需同時做兩個陽性對照、兩個陰性對照,只有陽性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒有擴增出任何片段、雙份平行樣品結果一致的情況下實驗才成立,可以作出核酸陽性或陰性反應結果的判定。
(2)HIV核酸檢測陽性:發現核酸陽性反應,應該重復採集樣品進行復測,復測結果呈核酸陽性反應則判定為核酸陽性,復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果,需進一步隨訪檢測。
(3)HIV核酸檢測陰性:只可報告本次實驗結果陰性。
(4)應在完成檢測後5個工作日內發出檢測報告。