檢測法氏囊卵黃抗體使用方法

❶ 應用高免卵黃抗體治療雞病時應注意什麼

由於雞蛋蛋黃與血清中所含抗體的種類和滴度均相近，所以可將蛋黃液用於雞病的防治上。近年來，抗雞傳染性法氏囊病和抗雞新城疫高免卵黃抗體的製作和應用相當廣泛，並取得了一定的效果，但也存在一些弊端，因此必須注意如下幾點：

（1）種雛雞群不宜使用。多種雞病病原體是可以在母雞體內通過蛋垂直傳播的，例如雞傳染性腦脊髓炎、病毒性關節炎、雞傳染性貧血、雞白痢等。而目前國內用於製造高免卵黃抗體的雞群基本上都不是無特異性病原體的雞群，因而母雞體內就有可能帶有這種或那種能垂直傳播的病原體。即使在加工卵黃抗體過程中添加了一些防腐劑和抗菌葯，但只能殺死或抑制部分病原性細菌，而對病毒則無作用。為了避免某些傳染病的垂直傳播，高免卵黃抗體不應用於種雞疾病的預防和治療。

（2）不宜與疫苗接種同期使用。用於製造高免卵黃抗體的母雞群，一般在開產前均進行過多種疫苗的接種，其蛋黃中含有一定量的多種抗體，會影響疫苗的免疫效果。如在注射高免卵黃抗體之前3～5天內接種過疫苗的，最好在注射卵黃抗體後7～10天再重新接種。另外，在注射卵黃抗體後一周內接種疫苗的效果也不理想。

（3）不宜單純依賴高免卵黃抗體的防與治。高免卵黃抗體只不過是一種被動抗體，注入雞體後其有效保護期為10～15天左右。高免卵黃抗體對許多病在早、中期進行治療，可以取得令人滿意的效果，而到晚期治療效果欠佳。此外，有些雞的傳染病的病原存在不同的血清型，不同血清型的毒株之間不一定都能保護，這就是有時高免卵黃抗體治療效果欠佳的原因之一。

（4）過期變質、結塊的高免卵黃抗體不宜再用。結塊、沉澱的卵黃抗體充分搖勻後感觀上呈灰黃，如同酸敗的玉米粥，靜置很快沉澱分層，pH值低於6，檢測抗體效價下降或消失，因此不宜再使用。

❷ 卵黃抗體如何製作及應用

卵黃杭體是治療雞新城疫（ND）和傳染性法氏囊病(IBD）的一種特效葯，於20世紀90年代，利用免疫學理論研究生產的新葯，具有特異性診斷、治療和預防作用。目前，已廣泛應用於雞新城疫和傳染性法氏囊病的防治上，均收到了良好效果。 製作方法 將新城疫I系苗、傳染性法氏囊強毒苗連續注射健康無病產蛋雞三次，第一次1個免疫量，第二次2個免疫量，第三次3個免疫量。待3周後收集母雞所產的蛋，無菌術取蛋黃，加滅菌生理鹽水稀釋成1:20的混懸液，測定效價，加入抑菌劑，然後進行分裝，在0℃以下保存備用。 卵黃抗體成分與效價 卵黃抗體也稱母源抗體,IgG抗體。是母體血液中小分子抗體IgG通過胎盤、輸卵管、滋養層傳給後代。保存入卵的蛋黃中，若孵化出雞雛，則對新城疫、傳染性法氏囊有特異的抵抗作用。這種抵抗作用稱為抗體，其分子結構稱為單體Ig,由2條多肽重鏈和2條多肽輕鏈組成。沉澱系數7S，分子量160000 ～180000，含糖2.5%。現已發現有四種IgGT型重鏈同種異型，也稱作四個亞型並含硫的半胱氨酸。具有抗感染、抗菌、抗病毒作用。由於氨基酸排列順序具有高度可變性，能接觸到抗原的物質，並發生特異結合，產生中和作用，從而體現特異作用。 卵黃抗體好與否的標準是用HA和HI試驗測定的稀釋倍數，稱為效價，Iog2的指數越大，效價越高，通常把1:64效價稱為高免卵黃抗體，其半衰期為4天左右，因此，用卵黃抗體替代主動免疫時間在2周～4周，應科學選擇使用日期，注意半衰期，計算保護期，當降到臨界線時，應及時補充。 卵黃抗體的作用 診斷作用：卵黃抗體具有沉澱素的特性，當診斷時，若懷疑雞群發生傳染性法氏囊病，可採取病料5克，加滅菌生理鹽水10毫升，研磨，加抗菌劑抑菌，置於冰箱過夜，作為未知抗原，製作備用瓊脂板，打成梅花狀七孔後，同時加入未知病料抗原和已知的卵黃抗體各一份，約0.5毫升，25℃放置24小時～72小時，出現肉眼可見白色沉澱線，為陽性反應。強陽性反應時,24小時後就可見到沉澱線，即可判定試驗雞群發生了傳染性法氏囊病。 治療作用：當雞群發生新城疫或傳染性法氏囊病時，可立即皮下注射卵黃抗體1～2毫升，肉雞可口服卵黃抗體2毫升／只，能阻止病毒進入細胞，形成再感染，中和病毒數量，經2小時就可發現雞群精神好轉，食慾增加，糞便恢復正常。目前，是治療雞新城疫、傳染性法氏囊病的特效葯物。 預防作用：卵黃抗體的使用，在免疫學理論中可成為被動免疫。當免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失敗時，可利用卵黃抗體注射、口服替代主動免疫接種，發揮抗病作用。 應用方法 解凍．：一般包裝有500毫升,250毫升、100毫升瓶裝。要把葯瓶放在新鮮井水中，浸泡2小時～4小時以上，反復振搖。用肉眼觀察，瓶內無冰碴為宜。 注射：可將解凍後的卵黃抗體，在室溫下放置半小時，接近室溫時（15℃～20℃），再皮下注射1毫升～2毫升。先注射健康雞群，再注射假定健康群，最後注射病雞群。注射1隻雞要換1個針頭。 口服：將解凍後的卵黃抗體以1:10的比例，加人入涼開水或新鮮井水及適量的抗生素，製成混懸液，讓雞在半小時內飲完，並要備足飲水器，讓雞都有位置飲水。 注意事項 卵黃抗體是生物製品，高溫會失效，為方便生產與使用，須冷凍保存和運輸，一般在-18℃條件下保存，運輸時應特別注意溫度變化，冷藏包裝運輸。 使用卵黃抗體前，一定要了解雞群是否接種過同種疫苗，並要注意間隔時間；同時，應測定其效價，計算使用量和保護期。 卵黃抗體兌水後，應呈混懸液，不要添加電解質，破壞其結構，使卵黃抗體失效。兌水後飲用時，應先控制飲水，可根據氣溫高低確定，一般應控制飲水2小時～3小時。 在使用卵黃抗體防治雞新城疫或傳染性法氏囊病時，不得產生依賴思想，同時還要做好衛生、飼養管理和消毒工作，採取綜合的防治措施，才能收到滿意的效果。

❸ 什麼是卵黃抗體

抗血清是按照一定的免疫程序給動物多次接種某種抗原（如病原微生物、疫苗等），使動物產生針對該抗原的高效價的抗體。通過採取被免疫動物的血液提取血清，經過處理製成的一類生物製品。抗血清主要用於傳染病的治療，也可用於緊急預防。

卵黃抗體是利用某種疫（菌）苗按一定程序反復免疫雞、鴨、鵝等禽類動物，並檢測其蛋品卵黃相應抗體滴度達到一定水平後，收集其被免疫禽的蛋品，並經特殊工藝收集其蛋黃所製成的一種生物製品，如新城疫卵黃抗體、傳染性法氏囊炎卵黃抗體、鴨病毒性肝炎卵黃抗體等都屬此類。它與高免血清一樣只限用於相應疫病的治療和緊急預防接種。

❹ 傳染性法氏囊病免疫後還發病，怎麼辦

必須進行免疫。因為傳染性法氏囊病是由病毒引起的雛雞急性病毒性傳染病，以損害機體免疫器官——法氏囊為特徵。傳染性法氏囊病是一種免疫抑制病，它的發生會導致許多疫苗的免疫失敗。

圖19 病雞法氏囊出血變化（山東省農業科學院家禽研究所提供）

（1）流行特點本病發病急，雞1～100日齡均可發生，21～35日齡多發。感染率可達100%；死亡率不等，一般10%～20%，高者可達40%～50%。一年四季均可發生。經呼吸道、消化道感染本病，經常是通過被污染的飼料、飲水、墊料、糞便、塵土、用具、人員衣服、昆蟲等而傳播。本病感染雛雞後導致對其他疫病的抑制，並提高對細菌、病毒的易感性，所以本病對養雞業危害相當嚴重。（2）症狀本病往往突然發生，潛伏期短，感染2～3天出現臨床症狀。病雞表現精神沉鬱，頭下垂，眼瞼閉合，羽毛蓬鬆，食慾下降或廢絕。下痢，呈白色水樣稀便，脫水，最後衰竭而死。發病後1～2天病雞死亡增多，且呈直線上升，4～5天達到死亡高峰，以後迅速下降。病程一般1周，長的可達3周。（3）剖檢病死雞脫水明顯，兩腿乾枯。大腿內側點狀、斑狀出血，嚴重者大腿外側、胸肌出血。腺胃、肌胃交界處多見出血斑或出血帶。腎腫脹、蒼白，輸尿管變粗、充滿白色的尿酸鹽。法氏囊腫大，漿膜下水腫，呈膠凍樣。法氏囊外觀黃色，囊腔內分泌物為紫紅色，嚴重者整個法氏囊呈紫紅色，像紫葡萄一樣，整個法氏囊出血。（4）免疫接種選擇最佳的疫苗和正確的免疫程序，是預防本病的關鍵性措施。有條件的要用瓊脂擴散法測定雞群陽性率，以確定免疫時間。無條件進行抗體監測的單位可參考下列免疫程序。一是，種雞未作滅活苗免疫，也沒有感染過雞傳染性法氏囊病病毒的種蛋孵出的雛雞，首免可於10～18日齡，間隔10天後二免，種雞還應在18～20周齡和40～42周齡注射組織滅活苗，以提高雛雞母源抗體水平。二是，雛雞來源於滅活苗免疫過的種雞後代，可在2周齡和7周齡時活苗飲水。三是，在雞傳染性法氏囊病病毒嚴重污染地區，使用組織滅活苗。該苗含有地方變異株在內的混合病毒群抗原，具有特異性強、高效、多價、不受母源抗體干擾、無免疫抑制等優點，對雞傳染性法氏囊病毒野毒株免疫覆蓋面寬，能提供較好的交叉保護。方法是：7～10日齡弱毒苗飲水，同時或間隔1周滅活苗注射，種雞再分別於18～20周齡和40～42周齡注射滅活苗。四是，在雞傳染性法氏囊病疫區首免和二免都要用中等毒力活苗飲水免疫。（5）加強飼養管理在料中或水中添加電解多維、維生素C等葯物以補充體液，增強體質，防止肉雞發生腹水；改善環境衛生，提高舍溫1～2℃。加強通風換氣，並用雙鏈季銨鹽或環氧乙烷等消毒劑對舍內外進行噴霧消毒；隔離病禽，消除噪音，避免應激；嚴格獸醫衛生防疫措施。降低飼料中的蛋白含量（減至15%左右），同時料中加入雙倍量的電解多維和抗菌素，以增強體質，提高抗應激、抗感染能力，防止繼發或並發其他疾病，提高免疫後雞體內抗體水平和增強細胞免疫能力，降低死亡率。（6）對病雞和發病雞群緊急治療治療該病時，可視雞群實際情況而定，但用抗生素防止細菌（如大腸桿菌等）繼發感染，用小蘇打、乙醯水楊酸鈉等腎腫解毒葯解除腎腫，用電解多維等葯物補充體液，提高機體抵抗力。發病1～2天的雞群，可肌肉注射雞傳染性法氏囊病高免卵黃抗體（雛雞1.0～1.4毫升/只；30日齡左右的雞1.8～2.4毫升/只），這時一定要注意加投防治大腸桿菌病的葯物；若是發病超過3天的雞群，一般不建議注射高免卵黃抗體，最好採用中西結合的方法，加投抗生素以防繼發細菌感染。

❺ 卵黃抗體的IgY的形成、作用機理與制備

IgY的性質與哺乳動物的IgG相似。正常雞IgY的分子量約為180KDa，由兩條輕鏈(2L)和兩條重鏈(2H)組成，分子量分別為60-70KDa和22-30KDa。其等電點約為5.2。
IgY與一般哺乳動物IgG相比，IgY具有較強的耐熱、耐酸、抗離子強度和一定的抗酶降解能力。
在低於75℃條件下，IgY具有良好的熱穩定性。IgY制劑在4℃貯存5年或在室溫貯存6個月其活性仍無明顯變化或下降，65℃時可保持24h以上，70℃時加熱90min後其活性才明顯下降60℃，30min條件下巴氏消毒不影響IgY；高於80℃，大部分IgY失去活性。
IgY在pH4.0-11.0時比較穩定，pH3.0-3.5時活性迅速下降，pH12時活性亦有所下降。
IgY對胃蛋白酶有較高的抵抗力，但對胰蛋白酶十分敏感。將胃蛋白酶和IgY在pH2.0溫育1h後，幾乎所有活性喪失，但在pH4.0時1h後可保持91%的活性，甚至溫育10h後仍有63%活性。IgY分別與胰蛋白酶和胰凝乳酶溫育8h，活性分別保持39%和41%。 卵黃中的主要成分是蛋白質和脂肪，其比例為1：2。大部分蛋白質都是脂蛋白，存在於卵黃顆粒中，不溶於水，只有卵黃球蛋白(α、β、γ)是水溶性的，而IgY是γ卵黃球蛋白。因此IgY的分離純化首先需要有效地去除卵黃中的脂類，從水溶性蛋白中分離IgY。
多年來，已建立了許多較為高效而經濟的方法，這些方法大多以PEG、硫酸葡聚糖、天然膠，如藻酸鈉、角叉聚糖或乙醇沉澱等方法初步純化蛋白質。
1980年，Polson首先提出聚乙二醇(PEG)兩步沉澱法，分別用終濃度為3.5%和12%的PEG分步沉澱，用硫酸銨鹽析法去除PEG。1985年，在此基礎上提出了冷乙醇沉澱的改進方法，使產量提高，而且能有效地去除殘留PEG。1981年Jensensius等提出了硫酸葡聚糖沉澱法(DS法)，PEG法和DS法的產量相當，但提取的IgY製品含有一定量的雜蛋白。Bade和Stegemann(1984)用預冷的丙烷和丙酮(-20℃)沉澱蛋白質並去除脂質，經DEAE柱層析進一步純化，其IgY抗體活性與用Polson法提純的IgY之間無明顯差別，且穩定性好，經3次以上凍融，抗體活性未見改變。1992年Akita等用水稀釋法(WD)提純IgY，每個卵黃可獲得100mg以上的IgY。此後，Akita等比較了WD法、PEG法、DS法和黃原膠法(Xanthan法)的提純效果，結果表明：WD法產量最高，其次為DS法，WD法更適合大規模生產。
1993年，Horikoshi提出了冷乙醇分級離心的方法，分別用60%、30%、25%的冷乙醇沉澱離心，得到純度達99%以上的IgY。此法適用於大規模製備IgY。
工業上大規模生產IgY的方法有：超臨界二氧化碳氣體抽提法、卡拉膠法、硫酸銨鹽析法。

❻ 卵黃分層為什麼要在酸性，低溫條件下進行有什麼更好的方法來分離卵黃抗體

在水稀釋法中，卵黃液的酸鹼度對提取效果影響較大，在pH5.0~5.2時，卵黃抗體的提取率與純度最高。

❼ 法氏囊卵黃抗體可以治鴿溫嗎

摘要 在發現鴿子得了鴿瘟之後，一定要及時治療，把鴿瘟控制住，可參考以下的幾種治療方法。

❽ 如何做好雞傳染性法氏囊病的免疫

雞傳染性法氏囊病最早於1957年在美國特拉華的甘布羅被發現，故又稱甘布羅病。該病一年四季均可發生，以20～40日齡雞多發。臨床表現突然發病，病雞精神沉鬱，腹瀉，法氏囊腫大、出血，腎腫大和肌肉出血。由於病雞免疫應答降低，易繼發感染大腸桿菌病、新城疫等疾病。

近年來，傳染性法氏囊病已不像20世紀80—90年代那樣呈區域性的大面積流行，其特徵已由爆發型趨向溫和型或小區域散發。

對本病的免疫，要把握好4個要點，即了解母源抗體水平、確定合理免疫程序、選擇合適毒力的疫苗、正確的免疫接種方法。

有的養殖戶認為，免疫程序是固定不變的，只要按程序注射疫苗，就能防止該病的發生；也有的養殖戶認為，如果上批雞免疫疫苗後發病了，這批雞就提前免疫或者加大免疫劑量、增加免疫次數。有的養殖戶乾脆配上干擾素或針對傳染性法氏囊病的抗病毒葯物。

在一些肉雞養殖密集區，無論免不免疫疫苗，傳染性法氏囊病都頻頻發生，使得一些養殖戶對疫苗免疫失去了信心，有的索性就放棄法氏囊病疫苗免疫，依賴注射卵黃抗體來應付，以至一個飼養周期一般要打4～5次。殊不知，這樣做的壞處有三：一是有些低劣的卵黃抗體含有大量雜菌、黴菌或者慶大黴素等抗生素，注入後很容易繼發細菌病或黴菌病，加劇腎腫，形成腎衰。再者，使用卵黃抗體在發病初期效果明顯，中後期則不理想，同時卵黃抗體注入體內後5～7天即消失，需要及時補免或重復注射卵黃抗體，一旦時間差掌握失誤，發病的風險依然很大。三是頻繁捉雞會造成對雞的驚嚇和應激反應。

法氏囊病之所以頻頻發生，使人不知所措，大多是由於免疫不當造成的。若要做好法氏囊病的免疫，應根據當地本病的流行特點、飼養條件與雞群類型，以及雞的母源抗體水平來綜合考慮。尤為關鍵的是確定首免日齡。在生產中可參考以下接種方案：

（1）種雞群，2～3周齡弱毒疫苗飲水，4～5周齡中等毒力疫苗飲水，開產前油佐劑滅活疫苗肌內注射。

（2）商品蛋雞，14～15日齡弱毒疫苗飲水，24～25日齡中等毒力疫苗飲水。

（3）商品肉雞可在10～14日齡首免，20～25日齡二免；若母源抗體較高，可在18～24日齡只免疫一次。對於來源復雜或情況不清的雛雞免疫可適當提前，並進行二次免疫。沒有母源抗體或抗體水平偏低的雞群首免可選用弱毒疫苗，二免時用中等毒力苗。在嚴重污染區、本病高發區的雛雞可直接選用中等毒力疫苗。

雞場一旦發生傳染性法氏囊炎，可及時注射高免血清或高免卵黃抗體，每隻雞1～2毫升，一般可收到很好的效果。生產中可應用抗病毒葯物進行治療；同時使用廣譜抗生素防止繼發感染。

❾ 注射高免卵黃抗體治療雞傳染性法氏囊病發病時應注意什麼

雞得了傳染性法氏囊病時採用高免卵黃抗體進行肌肉注射的方法，可取得較好療效，但需要注意以下幾個問題。

（1）使用正規廠家生產的產品，不能使用三無產品。

（2）高免卵黃抗體應做到低溫保存和運輸，以4～8℃為宜。

（3）高免卵黃抗體的療效與其使用時間有關。發病初期的雞群注射高免卵黃抗體，能明顯增強療效，死亡率控制在2%左右，但發病中、後期使用高免卵黃抗體則不太理想。

（4）不可用高免卵黃抗體替代疫苗，高免卵黃抗體在雞體內的有效期為7～10天。因此，在注射高免卵黃抗體後7天左右，應加強一次雞傳染性法氏囊病疫苗的免疫。

（5）高免卵黃抗體不能與新城疫或雞傳染性法氏囊病弱毒疫苗同時接種。否則，卵黃抗體與疫苗會發生中和反應，從而導致免疫失敗。

（6）注射高免卵黃抗體時，可加入適量的廣譜抗生素，以控制細菌污染。

（7）高免卵黃抗體的注射量不宜過大。臨診上最佳注射量為：雛雞1～1.5毫升/只，成年雞2～3毫升/只，注射量過大不僅起不到作用，反而會造成不良後果，嚴重時可導致大批死亡。

（8）連續注射時，要注意更換針頭，以防交叉感染，加重病情。

（9）水中添加治腎葯物，以利尿酸鹽排出。

（10）降低飼料蛋白質水平，用5%麩皮替代5%豆粕，連用3～5天。