卵黃抗體效價用什麼方法檢測

Ⅰ 制備免疫血清時，為檢測抗體效價，家兔最常用的采血方法是

正確答案:B
解析：制備免疫血清時，免疫家兔後，常採用耳緣靜脈采血來檢測家兔產生抗體的效價
。

Ⅱ 抗體效價的檢測方法

多采免疫雙向擴散法
【基本原理】
*指抗原和抗體在同一凝膠內都擴散，彼此相遇後形成特異性的沉澱線。
-將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個相隔一定間距的小孔內，使兩者進行相互擴散，當抗原抗體濃度之比相適宜時，彼此相遇形成一白色弧狀沉澱線。
*優缺點：簡便，但敏感性較低，易出現假陰性結果。
免疫雙向擴散法的操作步驟
*將玻璃板用水洗凈後用75%乙醇沖洗，晾乾後放在水平台上備用。
*將1%agar 融化後，置56℃水浴。
*在玻璃板上鋪膠，約1.5mm 厚，凝固後打孔(直徑 3rnm)，孔間距10mm。
l 抗血清(抗體預先作系列倍比稀釋即ml 抗原樣品，周圍孔內每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。
*凝膠板置濕盒內，室溫擴散24h。
*觀察結果。
凝聚胺法測定孕婦血清IgG抗-A（抗-B）效價的方法待檢血清與0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在試管內等量混合，放入37℃水浴1 h以破壞血清中的IgM抗體，吸取處理後的血清用生理鹽水倍比稀釋，稀釋度分別為2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024，然後每管加入相應的3%～5%紅細胞懸液，置37℃水浴30 min，觀察是否凝集，不凝集者用生理鹽水洗滌3次，然後加入低離子鹽水介質(LIM液)，混勻，滴入2滴凝聚胺，混勻後3 000 r/min離心30 s，扣搖肉眼可見明顯的凝集(無凝集者須重做)，再加入2滴重懸液，輕搖，觀察凝集是否消失，凝集1 min內不消失者表示受檢者血清中含有IgG型抗?A(抗?B)。
抗體效價檢測的其它方法
*環狀沉澱試驗，需較多的抗血清，現已很少用；
*對流免疫電泳，比瓊脂免疫雙擴散法敏感，較簡便、實用；
*酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)。
通常抗體效價低於1：128是沒有問題的，有些孕婦高達1：256以上，而且抗體效價最好1個月查上一次，有時候會有所變化。

Ⅲ 卵黃抗體如何製作及應用

卵黃杭體是治療雞新城疫（ND）和傳染性法氏囊病(IBD）的一種特效葯，於20世紀90年代，利用免疫學理論研究生產的新葯，具有特異性診斷、治療和預防作用。目前，已廣泛應用於雞新城疫和傳染性法氏囊病的防治上，均收到了良好效果。 製作方法 將新城疫I系苗、傳染性法氏囊強毒苗連續注射健康無病產蛋雞三次，第一次1個免疫量，第二次2個免疫量，第三次3個免疫量。待3周後收集母雞所產的蛋，無菌術取蛋黃，加滅菌生理鹽水稀釋成1:20的混懸液，測定效價，加入抑菌劑，然後進行分裝，在0℃以下保存備用。 卵黃抗體成分與效價 卵黃抗體也稱母源抗體,IgG抗體。是母體血液中小分子抗體IgG通過胎盤、輸卵管、滋養層傳給後代。保存入卵的蛋黃中，若孵化出雞雛，則對新城疫、傳染性法氏囊有特異的抵抗作用。這種抵抗作用稱為抗體，其分子結構稱為單體Ig,由2條多肽重鏈和2條多肽輕鏈組成。沉澱系數7S，分子量160000 ～180000，含糖2.5%。現已發現有四種IgGT型重鏈同種異型，也稱作四個亞型並含硫的半胱氨酸。具有抗感染、抗菌、抗病毒作用。由於氨基酸排列順序具有高度可變性，能接觸到抗原的物質，並發生特異結合，產生中和作用，從而體現特異作用。 卵黃抗體好與否的標準是用HA和HI試驗測定的稀釋倍數，稱為效價，Iog2的指數越大，效價越高，通常把1:64效價稱為高免卵黃抗體，其半衰期為4天左右，因此，用卵黃抗體替代主動免疫時間在2周～4周，應科學選擇使用日期，注意半衰期，計算保護期，當降到臨界線時，應及時補充。 卵黃抗體的作用 診斷作用：卵黃抗體具有沉澱素的特性，當診斷時，若懷疑雞群發生傳染性法氏囊病，可採取病料5克，加滅菌生理鹽水10毫升，研磨，加抗菌劑抑菌，置於冰箱過夜，作為未知抗原，製作備用瓊脂板，打成梅花狀七孔後，同時加入未知病料抗原和已知的卵黃抗體各一份，約0.5毫升，25℃放置24小時～72小時，出現肉眼可見白色沉澱線，為陽性反應。強陽性反應時,24小時後就可見到沉澱線，即可判定試驗雞群發生了傳染性法氏囊病。 治療作用：當雞群發生新城疫或傳染性法氏囊病時，可立即皮下注射卵黃抗體1～2毫升，肉雞可口服卵黃抗體2毫升／只，能阻止病毒進入細胞，形成再感染，中和病毒數量，經2小時就可發現雞群精神好轉，食慾增加，糞便恢復正常。目前，是治療雞新城疫、傳染性法氏囊病的特效葯物。 預防作用：卵黃抗體的使用，在免疫學理論中可成為被動免疫。當免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失敗時，可利用卵黃抗體注射、口服替代主動免疫接種，發揮抗病作用。 應用方法 解凍．：一般包裝有500毫升,250毫升、100毫升瓶裝。要把葯瓶放在新鮮井水中，浸泡2小時～4小時以上，反復振搖。用肉眼觀察，瓶內無冰碴為宜。 注射：可將解凍後的卵黃抗體，在室溫下放置半小時，接近室溫時（15℃～20℃），再皮下注射1毫升～2毫升。先注射健康雞群，再注射假定健康群，最後注射病雞群。注射1隻雞要換1個針頭。 口服：將解凍後的卵黃抗體以1:10的比例，加人入涼開水或新鮮井水及適量的抗生素，製成混懸液，讓雞在半小時內飲完，並要備足飲水器，讓雞都有位置飲水。 注意事項 卵黃抗體是生物製品，高溫會失效，為方便生產與使用，須冷凍保存和運輸，一般在-18℃條件下保存，運輸時應特別注意溫度變化，冷藏包裝運輸。 使用卵黃抗體前，一定要了解雞群是否接種過同種疫苗，並要注意間隔時間；同時，應測定其效價，計算使用量和保護期。 卵黃抗體兌水後，應呈混懸液，不要添加電解質，破壞其結構，使卵黃抗體失效。兌水後飲用時，應先控制飲水，可根據氣溫高低確定，一般應控制飲水2小時～3小時。 在使用卵黃抗體防治雞新城疫或傳染性法氏囊病時，不得產生依賴思想，同時還要做好衛生、飼養管理和消毒工作，採取綜合的防治措施，才能收到滿意的效果。

Ⅳ 求助ELISA測定抗體效價方法

我用的是間接ELISA，以下自我的畢業論文：
將抗原用包被液稀釋至約10 ?g/mL；分別將陽性血清和陰性血清用TBS倍比稀釋，稀釋梯度從1：200，1：400至1：204800，二抗用的是HRP標記的羊抗兔IgG(1:5000稀釋) 。酶標儀測定450nm處各個孔的吸光度(A450)，計算陽性血清與陰性血清的吸光度之比(P/N)，當P/N＜1.5時為陰性，當P/N≥1.5而＜2.1為可疑，當P/N≥2.1為陽性，將P/N≥2.1時所對應的抗體最高稀釋倍數作為抗體的效價。

Ⅳ 應用高免卵黃抗體治療雞病時應注意什麼

由於雞蛋蛋黃與血清中所含抗體的種類和滴度均相近，所以可將蛋黃液用於雞病的防治上。近年來，抗雞傳染性法氏囊病和抗雞新城疫高免卵黃抗體的製作和應用相當廣泛，並取得了一定的效果，但也存在一些弊端，因此必須注意如下幾點：

（1）種雛雞群不宜使用。多種雞病病原體是可以在母雞體內通過蛋垂直傳播的，例如雞傳染性腦脊髓炎、病毒性關節炎、雞傳染性貧血、雞白痢等。而目前國內用於製造高免卵黃抗體的雞群基本上都不是無特異性病原體的雞群，因而母雞體內就有可能帶有這種或那種能垂直傳播的病原體。即使在加工卵黃抗體過程中添加了一些防腐劑和抗菌葯，但只能殺死或抑制部分病原性細菌，而對病毒則無作用。為了避免某些傳染病的垂直傳播，高免卵黃抗體不應用於種雞疾病的預防和治療。

（2）不宜與疫苗接種同期使用。用於製造高免卵黃抗體的母雞群，一般在開產前均進行過多種疫苗的接種，其蛋黃中含有一定量的多種抗體，會影響疫苗的免疫效果。如在注射高免卵黃抗體之前3～5天內接種過疫苗的，最好在注射卵黃抗體後7～10天再重新接種。另外，在注射卵黃抗體後一周內接種疫苗的效果也不理想。

（3）不宜單純依賴高免卵黃抗體的防與治。高免卵黃抗體只不過是一種被動抗體，注入雞體後其有效保護期為10～15天左右。高免卵黃抗體對許多病在早、中期進行治療，可以取得令人滿意的效果，而到晚期治療效果欠佳。此外，有些雞的傳染病的病原存在不同的血清型，不同血清型的毒株之間不一定都能保護，這就是有時高免卵黃抗體治療效果欠佳的原因之一。

（4）過期變質、結塊的高免卵黃抗體不宜再用。結塊、沉澱的卵黃抗體充分搖勻後感觀上呈灰黃，如同酸敗的玉米粥，靜置很快沉澱分層，pH值低於6，檢測抗體效價下降或消失，因此不宜再使用。

Ⅵ 如何檢測中和抗體效價

北京德元國際科技公司代做抗體效價檢測，用ELISA法

Ⅶ ELISA方法檢測抗體效價的時候為什麼要加入二抗啊。。。用酶標記有什麼作用

因為二抗有標記物，標記的酶是為了讓底物顯色的，以表示是否檢測到了抗體，顯色表明陽性，不顯色表明陰性，有時還可以定量。

Ⅷ 怎樣製作和保存鴨肝卵黃抗體

採用雛鴨病毒性肝炎活疫苗，或用死於鴨病毒性肝炎的臟器組織滅活苗，免疫接種健康產蛋母鴨，2周後重復1次，待卵黃抗體達到一定效價時，收集鴨蛋，在無菌操作下取卵黃勻漿稀釋過濾，制備而成高免卵黃抗體。性狀為呈淡黃色卵黃混懸液。用於預防和治療雛鴨病毒性肝炎。雛鴨預防量為每隻皮下或肌內注射0.5毫升，治療量為1～2毫升。放置在-15℃冷凍保存，2年內有效；2～8℃冷藏保存，3個月內有效。

Ⅸ 什麼是卵黃抗體

抗血清是按照一定的免疫程序給動物多次接種某種抗原（如病原微生物、疫苗等），使動物產生針對該抗原的高效價的抗體。通過採取被免疫動物的血液提取血清，經過處理製成的一類生物製品。抗血清主要用於傳染病的治療，也可用於緊急預防。

卵黃抗體是利用某種疫（菌）苗按一定程序反復免疫雞、鴨、鵝等禽類動物，並檢測其蛋品卵黃相應抗體滴度達到一定水平後，收集其被免疫禽的蛋品，並經特殊工藝收集其蛋黃所製成的一種生物製品，如新城疫卵黃抗體、傳染性法氏囊炎卵黃抗體、鴨病毒性肝炎卵黃抗體等都屬此類。它與高免血清一樣只限用於相應疫病的治療和緊急預防接種。