食品中的菌落總數的檢測方法

❶ 菌落總數食品檢測標准

菌落總數是食品中重要的安全衛生指標，表示食品受細菌污染的程度。
1、膨化食品的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb17401-2003《膨化食品衛生標准》規定，膨化食品的菌落總數應為≤10000cfu/g、大腸菌群應為≤90mpn/100g，超過國家標准規定可判斷為不合格膨化食品。
2、固體飲料的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb7101-2003《固體飲料衛生標准》規定，固體飲料產品的菌落總數應≤1000cfu/g；大腸菌群應≤90mpn/100g；黴菌應≤50cfu/g，超過國家標准規定可判斷為不合格固體飲料。
3、糕點、麵包、月餅的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb7099-2003《糕點、麵包衛生標准》規定，月餅產品中菌落總數不得超過1500cfu/g，大腸菌群不得超過30mpn/100g，黴菌計數不得超過100cfu/g；蛋糕生產的標准要求：菌落總數≤10000cfu/g，大腸菌群≤300mpn/100g，黴菌≤150cfu/g，超過國家標准規定可判斷為不合格糕點類產品。
4、食醋的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb2719-2003《食醋衛生標准》規定，食醋中菌落總數不得超過10000cfu/ml，超過國家標准規定可判斷為不合格食醋。
5、冷凍飲品的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb2759.1-2003《冷凍飲品衛生標准》規定，含澱粉或果類的冷凍飲品菌落總數應≤3000cfu/g,大腸菌群應≤100mpn/100g；含乳蛋的冷凍飲品的菌落總數應≤25000cfu/g,大腸菌群應≤450mpn/100g，超過國家標准規定可判斷為不合格雪糕或冷飲。
6、餅乾的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb7100-2003《餅干衛生標准》規定，非夾心餅乾的菌落總數不得超過750cfu/g，夾心餅干菌落總數不得超過2000cfu/g；餅干產品的黴菌計數不得超過50cfu/g，超過國家標准規定可判斷為不合格餅干。
7、巴氏殺菌、滅菌乳的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb19645-2005《巴氏殺菌、滅菌乳衛生標准》規定，滅菌乳菌落總數不得超過10cfu/g，大腸菌群不得超過3mpn/100g，超過國家標准規定可判斷為不合格乳製品。
8、蜜餞的落菌總數標准
依據國家強制性標准gb14884-2003《蜜餞衛生標准》規定，蜜餞食品中菌落總數不得超過1000cfu/g；黴菌不得超過50cfu/g，超過國家標准規定可判斷為不合格乳蜜餞產品。

❷ 食品衛生微生物檢驗菌落總數測定

上食品夥伴網查吧，一般不同產品檢測有一定的差異但大體方法都是一樣的！
.1 食品檢樣
3.2 培養基
平板計數培養基，無菌生理鹽水
3.3 其它
無菌培養皿，無菌移液管，無菌不銹鋼勺。
4 流程

5 步驟
5.1 取樣、稀釋和培養
5.1.1 以無菌操作取檢樣25g（或ml），放於225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經充分振要或研磨製成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液後，最好置滅菌均質器中以8000～10000r/min的速度處理1min，製成1:10的均勻稀釋液。
5.1.2 用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水的試管內，振搖試管混合均勻，製成1:100的稀釋液。
5.1.3 另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，制10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支10ml吸管。
5.1.4 根據標准要求或對污染情況的估計，選擇2～3個適宜稀釋度，分別在製作10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。
5.1.5 稀釋液移入平皿後，將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml，並轉動平皿，混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。
5.1.6 待瓊脂凝固後，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h，取出計算平板內菌落數目，乘以稀釋倍數，即得每克（每毫升）樣品所含菌落總數。
5.2 菌落計數方法
作平皿菌落計數時，可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平皿的菌落總數後，求出同稀釋度的各平皿平均菌落數。到達規定培養時間，應立即計數。如果不能立即計數，應將平板放置於0－4℃，但不要超過24h。
5.3 菌落計數報告方法
5.3.1 平皿菌落數的選擇
選取菌落數在30～300之間的平皿作為菌落總數測定標准。每一個稀釋度應採用兩個平皿平均數，其中一個平皿有較大片狀菌落生長時，則不宜採用，而應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數，若片狀菌落不到平皿的一半，而其餘一半中菌落分布又很均勻，則可以計算半個平皿後乘以2以代表全皿菌落數。

表1 稀釋度選擇及菌落數報告方式
2、不同稀釋度的選擇及報告方法
1）首先選擇平均菌落數在30~300之間者進行計算，若只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時，則將該菌落數乘以稀釋倍數報告之（見實例1）
2）若有兩個稀釋度，其生長的菌落數均在30~300之間，則視二者之比值來決定，若其比值小於2應報告兩者的平均數（如實例2）。若大於2則報告其中稀釋度較小的菌落總數（如實例3）。若等於2亦報告其中稀釋度較小的菌落數（見實例4）。
3）若所有稀釋度的平均菌落數均大於300，則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之（見實例5）。
4）若所有稀釋度的平均菌落數均小於30，則應以按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之（見實例6）。
5）若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間，則應以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之，（見實例7）。
6）若所有稀釋度的均無菌落生長，則以<1乘以稀釋倍數報告之。
7）菌落計數的報告：菌落數在100以內時按實有數報告，大於100時，採用二位有效數字，在二位有效數字後面的數值，以四捨五入方法計算，為了縮短數字後面的零數也可用10的指數來表示。
稀釋度選擇及菌落總數報告方式
實例不同稀釋度的平均菌落數 兩個稀釋度 菌落總數 報告方式
10-1 10-2 10-3 菌落數之比 （CFU/mL） （CFU/mL）
1 1365 164 20 — 16400 16000或1.6×104
2 2760 295 46 1.6 37750 38000或3.8×104
3 2890 271 60 2.2 27100 27000或2.7×104
4 150 30 8 2 1500 1500或1.5×104
5 多不可計 1650 513 — 513000 510000或5.1×104
6 27 11 5 — 270 270或2.7×104
7 多不可計 305 12 — 30500 31000或3.1×104
8 0 0 0 — < 1×10 < 1×10

❸ 食品中細菌總數和菌落總數是怎麼樣測定的

一、菌落總數介紹： 菌落是指細菌在固體培養基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物，它是由數以萬計相同的細菌集合而成。當樣品被稀釋到一定程度，與培養基混合，在一定培養條件下，每個能夠生長繁殖的細菌細胞都可以在平板上形成一個可見的菌落。 菌落總數就是指在一定條件下（如需氧情況、營養條件、pH、培養溫度和時間等）每克（每毫升）檢樣所生長出來的細菌菌落總數。按國家標准方法規定，即在需氧情況下，37℃培養48h，能在普通營養瓊脂平板上生長的細菌菌落總數，所以厭氧或微需氧菌、有特殊營養要求的以及非嗜中溫的細菌，由於現有條件不能滿足其生理需求，故難以繁殖生長。因此菌落總數並不表示實際中的所有細菌總數，菌落總數並不能區分其中細菌的種類，所以有時被稱為雜菌數，需氧菌數等。 菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛生質量，它反映食品在生產過程中是否符合衛生要求，以便對被檢樣品做出適當的衛生學評價。菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛生質量的優劣。 二、檢驗方法 菌落總數的測定，一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液，然後從每個稀釋液中分別取出1mL置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合，在一定溫度下，培養一定時間後（一般為48小時），記錄每個平皿中形成的菌落數量，依據稀釋倍數，計算出每克（或每ml）原始樣品中所含細菌菌落總數。 基本操作一般包括：樣品的稀釋－－傾注平皿－－培養48小時－－計數報告。 國內外菌落總數測定方法基本一致，從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數報告無何明顯不同，只是在某些具體要求方面稍有差別，如有的國家在樣品稀釋和傾注培養進，對吸管內液體的流速，稀釋液的振盪幅度、時間和次數以及放置時間等均作了比較具體的規定。 檢驗方法參見： GB4789.2-94 《中華人民共和國國家標准 食品衛生微生物學檢驗 菌落總數測定》 SN0168-92 《中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准 出口食品菌落計數》 三、說明 （一）樣品的處理和稀釋： 1．操作方法：以無菌操作取檢樣25g（或25ml)，放於225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內，經充分振要或研磨製成1：10的均勻稀釋液。 固體檢樣在加入稀釋液後，最好置滅菌均質器中以8000~10000r/min的速度處理1min，製成1：10的均勻稀釋液。 用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖試管混合均勻，製成1：100的稀釋液。 另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，制10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。 2．無菌操作：操作中必須有「無菌操作」的概念，所用玻璃器皿必須是完全滅菌的，不得殘留有細菌或抑菌物質。所用剪刀、鑷子等器具也必須進行消毒處理。樣品如果有包裝，應用75%乙醇在包裝開口處擦拭後取樣。 操作應當在超凈工作台或經過消毒處理的無菌室進行。瓊脂平板在工作台暴露15分鍾，每個平板不得超過15個菌落。 3．采樣的代表性：如系固體樣品，取樣時不應集中一點，宜多采幾個部位。固體樣品必須經過均質或研磨，液體樣品須經過振搖，以獲得均勻稀釋液。 4．樣品稀釋誤差：為減少樣品稀釋誤差，在連續遞次稀釋時，每一稀釋液應充分振搖，使其均勻，同時每一稀釋度應更換一支吸管。 在進行連續稀釋時，應將吸管內液體沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀釋液內，以免吸管外部粘附的檢液溶於其內。 為減少稀釋誤差，SN標准採用取10mL稀釋液，注入90mL緩沖液中。 5．稀釋液：樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水，有的採用磷酸鹽緩沖液（或0.1％蛋白腖水），後者對食品已受損傷的細菌細胞有一定的保護作用。如對含鹽量較高的食品（如醬油）進行稀釋，可以採用滅菌蒸餾水。 （二）傾注培養 1．操作方法：根據標准要求或對污染情況的估計，選擇2~3個適宜稀釋度，分別在制10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。 將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml，並轉動平皿，混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。 待瓊脂凝固後，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h，取出計算平板內菌落數目，乘以稀釋倍數，即得每克（每毫升）樣品所含菌落總數。 2．傾注用培養基應在46℃水浴內保溫，溫度過高會影響細菌生長，過低瓊脂易於凝因而不能與菌液充分混勻。如無水浴，應以皮膚感受較熱而不燙為宜。 傾注培養基的量規定不一，從12~20ml不等，一般以15ml較為適宜，平板過厚可影響觀察，太薄又易於乾裂。傾注時，培基底部如有沉澱物，應將底部棄去，以免與菌落混淆而影響計數觀察。 3．為使菌落能在平板上均勻分布，檢液加入平皿後，應盡快傾注培養基並旋轉混勻，可正反兩個方向旋轉，檢樣從開始稀釋到傾注最後一個平皿所用時間不宜超過20min，以防止細菌有所死亡或繁殖。。 4．培養溫度一般為37℃（水產品的培養溫度，由於其生活環境水溫較低，故多採用30℃）。培養時間一般為48h，有些方法只要求24h的培養即可計數。培養箱應保持一定的濕度，瓊脂平板培養48h後，培養基失重不應超過15％。 5．為了避免食品中的微小顆粒或培基中的雜質與細菌菌落發生混淆，不易分辨，可同時作一稀釋液與瓊脂培基混合的平板，不經培養，而於4℃環境中放置，以便計數時作對照觀察。 在某些場合，為了防止食品顆粒與菌落混淆不清，可在營養瓊脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培養後菌落呈紅色，易於分別。 （三）計數和報告 1．操作方法：培養到時間後，計數每個平板上的菌落數。可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落總數後，求出同稀釋度的各平板平均菌落數，計算處原始樣品中每克（或每ml）中的菌落數，進行報告。 2．到達規定培養時間，應立即計數。如果不能立即計數，應將平板放置於0－4℃，但不得超過24h。 3．計數時應選取菌落數在30~300之間的平板（SN標准要求為25~250個菌落），若有二個稀釋度均在30~300之間時，按國家標准方法要求應以二者比值決定，比值小於或等於2取平均數，比值大於2則其較小數字（有的規定不考慮其比值大小，均以平均數報告）。 4．若所有稀釋度均不在計數區間。如均大於300，則取最高稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。如均小於30，則以最低稀釋度的平均菌落數乘稀釋倍數報告之。如菌落數有的大於300，有的又小於30，但均不在30~300之間，則應以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。如所有稀釋度均無菌落生長，則應按小於1乘以最低稀釋倍數報告之。有的規定對上述幾種情況計算出的菌落數按估算值報告。 5．不同稀釋度的菌落數應與稀釋倍數成反比（同一稀釋度的二個平板的菌落數應基本接近），即稀釋倍數愈高菌落數愈少，稀釋倍數愈低菌落數愈多。如出現逆反現象，則應視為檢驗中的差錯（有的食品有時可能出現逆反現象，如酸性飲料等），不應作為檢樣計數報告的依據。 6．當平板上有鏈狀菌落生長時，如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，則應作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，則每條鏈均應按一個菌落計算，不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數。如有片狀菌落生長，該平板一般不宜採用，如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，則可以半個平板的菌落數乘2代表全平板的菌落數。 7．當計數平板內的菌落數過多（即所有稀釋度均大於300時），但分布很均勻，可取平板的一半或1/4計數。再乘以相應稀釋倍數作為該平板的菌落數。 8．菌落數的報告，按國家標准方法規定菌落數在1~100時，按實有數字報告，如大於100時，則報告前面兩位有效數字，第三位數按四捨五入計算。固體檢樣以克（g)為單位報告，液體檢樣以毫升（ml）為單位報告，表面塗擦則以平方厘米（cm2）報告。

❹ 食品中菌落總數測定的原理是什麼

菌落總數為一般衛生狀況指示菌，用以指示檢品衛生狀況及安全性。由於細菌個體是非常非常小的，難以觀察得到也難以進行生化試驗來驗證其存在，所以一般是經過一定適宜條件的培養激勵其快遞增殖生長形成微生物菌落，以便於觀察。由於是一定條件下培養的，所以菌落總數不等於細菌總數！
菌落是指細菌在固體培養基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物，它是由數以萬計相同的微生物集合而成。通常認為，食品中細菌數量越多，則食品的新鮮度越差，含有致病菌污染的可能性也越大，危害人體健康的幾率也就越高。

❺ 如何判斷食品中菌落總數合格，按gb 4789.2-2010測定

《GB 4789.22-2010 食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》是食品菌落總數的測定方法，若要看檢驗結果是否合格，需要去查對應食品的微生物限量標准，低於標准算合格。

❻ 食品安全檢驗中細菌總數的測定有哪幾中方法

現在一般是用平板計數法，以前的標準是用營養瓊脂，新標准時用平板計數瓊脂。還可以用快速測試紙檢驗。前者比較普遍。

❼ 食品中菌落總數的測定步驟主要為

菌落總數檢測一般步驟為：

采樣 — 樣品制備與稀釋 — 倒平板 — 塗布平板 — 倒置培養 — 菌落計數 — 計算菌落總數

樣品制備，需要對樣品進行均質，根據客戶需要檢測的樣品不同。WIGGENS提供不同的均質設備，如均質機，拍打式均質器等；

樣品的稀釋，國標中採用1:10的十倍稀釋方法，SOCOREX提供各種手動精密移液器，瓶口分液器，移液管控制器為液體操作提供了保證。

倒平板，使用的培養基為含有瓊脂的固體培養基。培養基在配備的過程中需要經過煮沸和保溫的步驟。WIGGENS紅外加熱磁力攪拌器，直接使用紅外輻射方式進行加熱，1L培養基只需要10分鍾即可煮沸，極大節約了客戶培養基制備時間。在倒平板之前，需要恆溫培養基46±1 ℃， WIGGENS恆溫水浴鍋，可以為用戶提供的溫度控制和恆溫條件；

塗布平板，培養基在培養皿中冷卻成固態之後，將稀釋後的樣品用移液器取1mL,滴到培養基表面，用塗布棒塗勻。WIGGENS有專用的培養皿轉盤，可以有效的將樣品液均勻的塗布在培養基表面。

倒置培養，將塗布完畢的平板，放入恆溫培養箱中進行培養，一般培養時間約為48h。WIGGENS恆溫培養箱內容積50-140L各種規格的台式及落地式培養箱，先進的設計及數據介面，可以直接通過電腦編程式控制制及信息處理，非常適合規范化培養要求。

菌落數計算，經過48小時的培養之後，在培養基表面會長出菌斑，每個菌斑代表一個微生物。一般在培養皿中菌落數為30-300個之間，為有效菌落數。低於30個，會因為樣本量不足，隨機性大；超過300個，會因為菌落數太多，過於密集產生菌斑重疊等現象，不利於准確計數。WIGGENS菌落計數器，是帶有非閃爍式環形光源，放大鏡，壓力感測器，計數筆等，可以讓使用者輕松計數。

計算菌落總數，培養皿中的菌落數需要通過公式換算。 WIGGENS菌落計數器，配套軟體可以直接通過壓力感測器進行培養皿中菌落計數，通過軟體內嵌程序直接計算出被檢測樣品中菌落總數。

❽ 菌落總數的檢驗方法

菌落總數的測定，一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液，然後從每個稀釋液中分別取出1mL置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合，在一定溫度下，培養一定時間後（一般為48小時），記錄每個平皿中形成的菌落數量，依據稀釋倍數，計算出每克（或每ml）原始樣品中所含細菌菌落總數。
基本操作一般包括：樣品的稀釋－－傾注平皿－－培養48小時－－計數報告。
國內外菌落總數測定方法基本一致，從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數報告無何明顯不同，只是在某些具體要求方面稍有差別，如有的國家在樣品稀釋和傾注培養進，對吸管內液體的流速，稀釋液的振盪幅度、時間和次數以及放置時間等均作了比較具體的規定。
檢驗方法參見：
GB4789.2-2010 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》

❾ 檢測食品化驗菌落總數的實驗步驟更原理

其實菌落總數和大腸菌的測定方法、步驟都差不多，只是一個是用培養皿一個是用試管