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大批量檢測hiv是用的什麼方法

發布時間:2022-02-18 03:51:24

⑴ 艾滋病的檢測辦法是什麼

由於AIDS是一種新的疾病,對其了解正在逐步深入。對AIDS的診斷標准、臨床分期、症狀表現、機會性感染、病程及預後等的認識,均隨AIDS研究的不斷推進而不斷深入。

一、AIDS的潛伏期

HIV從侵入人體到出現AIDS臨床症狀的時間稱為AIDS的潛伏期。最早認為約為幾個月到1年,後來大多數專家認為可能是5~8年,最近又發現了少數感染HIV者10多年仍無臨床症狀者,因此目前提出AIDS的潛伏期長短不一,因人而異,可能與下列因素有關:患者本身的免疫功能、健康狀態、HIV的種類、數量、致病強度、感染途徑等。

二、AIDS的檢測辦法及窗口期

對傳染病的診斷比較理想的辦法是在患者體內檢測出該傳染病的病原微生物。如瘧疾要查到瘧原蟲,結核要找出結核桿菌。但有些病原微生物一旦侵入人體後,就立即與人體的體細胞融合在一起,因此較難檢測到病原微生物本身,則代之以抗原檢測。然而感染了HIV後,HIV及抗原檢測在臨床診斷中均難以實施,目前應用較廣泛的是HIV感染者血清特異性抗體的檢測。即HIV侵入人體後,與其他病原微生物一樣,HIV也能激起人體的免疫系統產生相應抗體(但這種抗體消滅不了HIV病毒),這種特異抗體可在HIV感染者的體液中檢測出。從HIV侵入人體到抗體的形成有一個免疫應答過程,這個過程所需的時間就稱為「窗口期」。顯然,在「窗口期」內,是無法通過檢測特異性抗體的方法來檢查出HIV的。現在認為大多數受HIV感染者,其「窗口期」在2周到4個月之間。

三、AIDS的分類及主要臨床表現

1986年,美國疾病控制中心建議把AIDS的臨床表現分為以下四類:

1.急性HIV感染,患者臨床表現為一過性的發熱、感冒樣症狀,無特異性,血清HIV抗體陽性。

2.無症狀的HIV感染狀態,HIV陽性,無任何臨床症狀,即處於AIDS的潛伏期。

3.持續的全身淋巴結腫大。

4.有非特異性的全身臨床症狀。這一類包括了多個亞型,如A亞型主要是指發熱、腹瀉、體重減輕等全身非特異性症狀;B亞型主要是指痴呆、周圍神經病變等症狀。但這一類主要還是表現為所有AIDS者最終都要經歷的機會性感染。

所謂機會性感染,是指許多病原微生物對免疫功能無缺損者並不致病,當病人由於某種原因免疫功能受損到一定程度時,這些原本不致病的病原微生物就乘機侵入人體並引起疾病。HIV破壞人體的免疫功能到一定程度時,常引起的機會性感染或稱條件性感染有:卡氏肺囊蟲性肺炎、隱孢子蟲腹瀉、皰疹病毒感染、白色念珠菌感染、巨細胞病毒感染、弓形體病、結核、卡波希氏肉瘤等,防不勝防,最終引起患者全身衰竭、死亡。

⑵ 艾滋病檢測試紙用的什麼檢測方法

艾滋病檢測試紙的原理是: 艾滋病檢測試紙條是使用膠體金免疫層析科技研發的新一代檢測試劑,可檢測血清或血漿標本中的HIV-1/2特有性抗體。所有操作時間約是15分鍾,動作簡便、迅速、准確、自帶質控對照、無需所有附加葯劑。適合於臨床檢驗、無償獻血現場篩查等。
抗體檢測
抗體檢測
血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍,可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
確證試劑
篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot(WB),由於該法相對窗口期較長,靈敏度稍差,而且成本高昂,因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高,WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。
FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相對簡單,整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果,而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准,但不作為血液合格的標准。
篩檢試驗
篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查,因此要求操作簡便,成本低廉,而且靈敏、特異。2012年,世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA,還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性,操作簡單,僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用,特別適合於試驗室大規模篩檢使用。
顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便,成本低廉的檢測方法,該方法結果可通過肉眼判定,靈敏度很高,特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用,缺點是必須使用新鮮樣品,特異性較差。
80年代後期發展起來的斑點印跡檢測(Dot-blot assay)是一種快速ELISA(Rapid ELISA)方法,這種方法操作極為簡便,過程短暫,整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束,但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。
人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液檢測試劑盒(膠體金法)就屬於側向免疫層析法(金免疫)類別,基於免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20分鍾即可定性得出檢測結果的快速診斷試劑,用於檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。可用於自願咨詢檢測、不願采血、暈針患者的初篩。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需進行進一步篩查確認。[3]
【HIV陰性】說明從人體內檢測不到HIV抗體,陰性符號以(-)表示。不能說沒有感染HIV, 要看是什麼時候檢測的,在窗口期內,感染者的體內還沒有產生HIV抗體,或還沒有產生足量的HIV抗體,這時HIV檢測是陰性結果,如果在窗口期之後檢測的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV陽性】說明從人體內檢測到了HIV抗體,陽性符號以(+)表示。
【檢測結果不定因素】
感染還處於窗口期:從HIV進入體內到檢測這段時間還不夠長,因此血清還沒有形成典型的抗體反應
艾滋病進展到終末期,抗體水平下降
其他非病毒蛋白抗體的交叉反應:自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下,身體可以產生一些抗體,其反應與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應很相似

抗原檢測
病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大,且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄-PCR)可用於臨床診斷。HIV-1P24抗原檢測可用於HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷;HIV-1抗體陽性母親所生嬰兒早期的輔助鑒別診斷;第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性,但HIV-1抗體確認陰性者的輔助診斷。P24抗原檢測一般用ELISA雙抗體夾心法試劑,試劑必須經過SDA批准注冊、在有效期內,其陽性結果必須依據試劑說明書經中和試驗確認。HIV-1P24抗原檢測的敏感性為30-90%,該結果僅作為HIV感染的輔助診斷依據,不能據此確診;HIV-1 P24抗原檢測陰性只表示在本試驗中無反應,不能排除HIV感染,臨床中一般不作為常規診斷項目。

核酸檢測
HIV核酸檢測可用於HIV感染的輔助診斷、病程監控、指導治療方案及療效判定、預測疾病進展等。常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉錄PCR實驗(RT-PCR)、核酸序列擴增實驗(NASBA)、分支DNA雜交實驗(bDNA)以及實時熒光定量PCR技術。值得注意的是,每一種HIVRNA定量系統都有其最低檢測限,即可以測出的最低拷貝數或國際單位,RNA定量檢測時未測出不等於樣品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性檢測陰性,只可報告本次實驗結果陰性,但不能排除HIV感染;HIV核酸檢測陽性,可作為診斷HIV感染的輔助指標,不能單獨用於HIV感染的診斷。報告HIV核酸定量檢測結果時應按照儀器讀數報告結果,註明使用的實驗方法、樣品種類和樣品量,當測定結果小於最低檢測限時,應註明最低檢測限水平。
HIV核酸定性檢測也可用於HIV感染的輔助診斷,在分析HIV基因亞型和變異等基礎研究中應用。通常使用PCR或RT-PCR技術,使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑,引物可來自文獻或自行設計,應盡量覆蓋所有或常見的毒株,也可使用復合引物。報告定性檢測結果時應註明反應條件和所使用的引物序列。此外,利用核酸檢測方法的高度敏感性,使用集合核酸擴增檢測技術和方法,對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進行集合核酸檢測,可及時發現窗口期感染者。該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。aware天貓

⑶ 三甲醫院艾滋病檢測用什麼方法

你是問的初篩的試劑試紙以及方法吧。哪怕同樣是三甲醫院,不同的三甲醫院也會使用不同的試劑試紙。由於我有一段時間未關注最新的試劑試紙了,只能根據我之前的記憶告訴你,至少是3代之後的產品,檢測的是血液中的抗體載量,確診試驗是檢測的抗原載量。其實我這樣回答你未必滿意,這樣跟你說吧,艾滋病這個東西政府是很重視的,現在正規的三甲醫院用的試劑試紙以及方法,無論是具體哪一種,金標也好,elisa也好,酶原也好,它們有一個共同點,靈敏度高,也就是說,在度過了窗口期的前提下,幾乎不會漏診(我看過一篇對比實驗的文獻,漏診率是0)但是會出現假陽,也就是准確率不夠高。所以總結一下,通俗的講,窗口期之後去檢測,是陰性就不用再擔心了,是陽性的話還需要多種初篩加確診,因為有可能是假陽。漏診是要擔責任的,政府又重視,所以現在的試劑試紙靈敏得很,只要是去的正規醫療機構,而且已經度過窗口期,你就不用擔心試紙試劑和方法的問題。

⑷ 艾滋病檢測用什麼方法最好

如果你是在窗口期一周左右,強烈推薦你去上海維斯塔做核酸檢測。前提是你要有錢,核酸檢測的成本比較高的,大約要1000元左右。如果你高危2個月了,建議你上網買個試紙在家測試下好了,大約150元左右。

⑸ HIV有幾種檢測方法

一、 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)

目前應用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過99%。

二、 顆粒凝集法(PA)

PA為快速、簡便的一種篩選方法。如屬陽性,應經WB證實。PA不需任何特殊儀器,其結果用肉眼可判別。全過程僅需5分鍾。缺點有假陽性,且價格昂貴。

三、快速試劑

(一)人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法)

雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)是用於體外,肉眼觀察,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,用於幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本品僅用於無償獻血員現場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,需進行進一步篩查確認。

(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑

InstantCHEKTM-HIV1+2是一種快速、簡單、靈敏的檢驗方法, 用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。

四、HIV-抗體確認實驗

免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉澱試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。國內常用的確認試驗方法是WB。

(一_免疫印跡實驗(westernblot,WB)是廣泛用於許多傳染病診斷的實驗方法,就HIV的病原學診斷而言,它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法,WB的檢測結果常常被作為鑒別其他檢驗方法優劣的「金標准」。

確認試驗流程:

有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測,如果呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性;如果呈陽性反應,則報告HIV-1抗體陽性;如果不滿足陽性標准,則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗,呈陰性反應,報告HIV-2抗體陰性;呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,並將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析,

WB的敏感性一般不低於初篩實驗,但它的特異性很高,這主要是基於HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化,能夠檢測針對不同抗原成分的抗體,因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的准確性。從WB確認試驗結果看出,初篩試驗盡管選擇質量較好的試劑,如第三代ELISA,仍會有假陽性出現,必須通過確認試驗才能得出准確結果。

(二)免疫熒光實驗(IFA)

IFA法經濟、簡便、快速,曾被FDA推薦用於WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡,需要受過良好訓練的技術人員、觀察和解釋結果易受主觀因素的影響,結果不宜長期保存,IFA不宜在一般的實驗室開展和應用。

⑹ HIV的檢測步驟有哪些

艾滋病檢測種類:血液試紙和唾液試紙兩大類。
目前市場上的艾滋病試紙種類主要分為兩大類,其中血液試紙主要包括雅培hiv試紙、愛康hiv試紙等。而唾液艾滋病試紙的種類就顯得比較單調,其中使用最廣泛的就是美國艾衛艾滋病檢測試紙,深受很多的高危人群及恐艾症患者的青睞。

專家指出,自從第一例艾滋病毒被確診以後,全球對於艾滋病毒的研究已經有30多年的歷史,而在這些年中也確實取得了十分重大的突破,其中艾滋病試紙研發問世,其所提倡的艾滋病自測就為艾滋病毒的預防奠定了嶄新的里程碑。據本站筆者了解得知,艾滋病試紙是一種使用膠體金免疫層析科技研發的新一代檢測試劑,可檢測血清或血漿標本中的HIV-1/2特有性抗體,從而准確的判斷出患者體內是否含有艾滋病毒,進而了解該患者是否是艾滋病毒感染者。
艾滋病檢測試紙優勢多,不同艾滋病試紙准確率達99.99%
不同的艾滋病試紙在不同的情況下使用起來具有更高的准確性和方便性。但是這幾種常見的HIV檢測試紙使用起來主要有以下幾個方面的優勢:所有操作時間15分鍾,所有的檢測操作過程簡便、出檢測結果十分迅速又准確、而且全部都是自帶質控對照,檢測過程中還不需要使用附加葯劑。值得一提的是,自己在家就能夠獨立完成所有的檢測過程,並不再像過去那樣一定要到專業的疾控中心檢測,這樣不但減輕了疑似感染者的心理折磨,而且還出檢測結果快速高效,為感染者及時治療爭取了更多有利的時間。
據悉,要想准確知道檢測結果,還需要注意的一個問題就是艾滋病檢測的最佳時間,而國際上規定以高危發生的日期開始計算,2周後即可檢測艾滋病病毒,以6周以後為准。而且如果在檢測過程中要想更加准確了解結果,最好是一次性使用多種不同品牌的艾滋病試紙,注意准確率更高,幾乎是100%。

⑺ 艾滋病有什麼檢查方法

艾滋病有幾種檢測方法?艾滋病的檢測方法有很多種,目前應用最廣泛的當屬艾滋病抗體檢測,其他有P24抗原檢測、病毒載量檢測、CD4+T淋巴細胞檢測等等,因為艾滋病抗體一經出現終生攜帶,只有抗體檢測能夠用於艾滋病診斷,艾滋病抗體檢測也就成為了應用最廣泛的一種艾滋病檢測方法。
國內外艾滋病抗體檢測方法有哪些?目前國外用於 HIV 抗體篩查的方法很多,根據檢測原理不同分為酶聯免疫吸附法、凝集法和層析法,可對血液、唾液和尿液標本進行常規或快速檢測。
常用的艾滋病抗體檢測方法有哪些?在實際工作中常用的有酶聯免疫吸附試驗( ELISA )、明膠凝集試驗和各種快速診斷試劑。
自 1985 年第一代 ELISA 試劑問世以來,隨著醫學技術的飛速發展,包被抗原已從一代的全病毒裂解物發展為目前以基因重組和多肽抗原包被和標記、有著良好敏感性和特異性的三代雙抗原夾心試劑,檢測亞型包括 HIV-1 、 HIV-2 和 HIV-1 型的 O 亞型,窗口期由 10 周縮短至 3-4 周。為避免窗口期傳染,荷蘭、法國等國已研製出第四代以重組的多肽抗原和抗 P24 抗體包被的雙抗原夾心法試劑盒,可同時檢測抗原抗體,使窗口期縮短了 2-3 周,但其臨床價值有待評估。
按《規范》要求,我國采供血機構進行血液篩查和各醫療衛生機構常規篩查檢測宜採用 ELISA 法,自采自供血的單位必須進行 HIV 抗體檢測,在尚未建立艾滋病篩查實驗室的偏遠地區或大醫院急診手術前可由經過培訓的技術人員在規定的場所用快速試劑進行血液篩選。對用 ELISA 試劑或快速診斷試劑進行的篩查實驗如呈陰性反應,即報告 HIV 抗體陰性;對呈陽性反應的標本,篩查實驗室應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,如兩種試劑復測均呈陰性反應,則報告 HIV 抗體陰性;如均呈陽性反應,或一陰一陽,需送艾滋病確認實驗室進行確認。篩查試劑必須是 HIV-1/2 混合型、經國家葯品監督管理局( SDA )注冊批准、批批檢合格、臨床評估質量優良、在有效期內的試劑。
艾滋病抗體確證實驗方法:
HIV 抗體篩查呈陽性反應的標本由於存在假陽性的可能,必須做確認試驗。國際上有 3 種確認試驗方法,包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗及免疫熒光試驗,目前以免疫印跡試驗最為常用。確認試劑必須經 SDA 注冊批准。免疫印跡試劑有 HIV-1/2 混合型和單一型

⑻ 有什麼快速檢測艾滋病的方法

艾滋病是人類免疫缺陷病毒感染引起的。臨床常用的HIV抗體檢測方法駐要有:酶聯免疫吸附法、明膠顆粒凝集試驗、免疫熒光檢測法、免疫印跡檢測法、放射免疫沉澱法。其中前三項常用於篩選試驗,後二者用於確診試驗。目前大多採用熒光檢測法進行篩查。

⑼ 常用的艾滋病檢測方法有哪些

常用的艾滋病檢測有:

  1. 抗體檢測:HIV-1/HIV-2抗體檢測是HIV 檢測的金標准。經篩查試驗(初篩和復檢)確證試驗兩步。初篩實驗室主要是採用酶聯免疫試驗、化學發光法或免疫熒光法試驗。確認實驗室進行復檢主要是檢測血清gp24及gp120抗體,靈敏度達99%,抗體初篩檢測結果還要用免疫蛋白印跡法檢測確認即確認試驗。

  2. 抗原檢測:抗HIVp24抗原單克隆抗體制備試劑,用酶聯免疫法測血清HIVp24抗原。有助於抗體產生窗口期和新生兒早期感染的診斷。

  3. 病毒載量測定:病毒載量的測定可了解疾病進展,提供病毒治療依據、評估治療效果、指導治療方案調整以及為早期診斷提供參考。可用熒光定量PCR擴增技術。

⑽ 疾控中心檢查hiv是用的什麼方法是第幾代。

一般都是3 或4代。通常要在2—12周後才能在血液中檢測出病毒抗體,這段時間稱為窗口期,但此時被感染者已具有傳染性,所以病毒抗體檢測陰性者,3個月後要進行復查。

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